孙思源
- 作品数：11 被引量：20H指数：2
- 供职机构：浙江大学药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金宁波市科技局资助项目“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生理学环境科学与工程更多>>
- 表达人有机阳离子转运体1的细胞模型构建及应用
- 本发明提供一种表达人有机阳离子转运体1的细胞模型构建方法及应用，从肝组织中获得hOCT1的野生型基因片段，定点突变获得P341L，M420del两个突变体基因片段，并与质粒载体连接，染入MDCK细胞，经G418抗性筛选，...
- 涂美娟陈忠坚石爱琴孙思源李丽萍曾苏蒋惠娣
- 原小檗碱类生物碱与CYP450和药物转运体的相互作用研究
- 细胞色素P450（CYP450）是人体内最重要的一相代谢酶之一,参与机体内大部分外源性、内源性物质的代谢,主要催化氧化、过氧化等反应。CYP450酶主要分布在生物体的肝脏中,介导了人体内大量药物的代谢,其中与药物代谢关系...
- 孙思源
- 关键词：CYP450
- 稳定表达人MATE1转运体的细胞模型的构建及应用
- 本发明提供构建pcDNA3.1（+）-hMATE1重组质粒的方法，获得的pcDNA3.1(+)-hMATE1重组质粒用于构建MDCK-hMATE1、MDCK-hOCT1/hMATE1和MDCK-hOCT2/hMATE1三...
- 雷红梅孙思源李丽萍涂美娟王凯白梦如周慧曾苏蒋惠娣
- 文献传递
- 延胡索乙素对映体与药物转运体之间的相互作用研究
- 延胡索乙素（THP）为中药元胡的主要有效成分之一,其分子中含有一个手性中心。由于其具有多种药理活性,已广泛应用于临床。目前越来越多的研究表明,药物转运体在药物处置和相互作用中起到重要作用,因此研究THP和转运体之间的作用...
- 孙思源陈忠坚李丽萍孙冬黎涂美娟田野毕惠嫦黄民曾苏蒋惠娣
- 稳定表达人有机阳离子转运体1的细胞模型构建被引量：2
- 2011年
- 目的建立能稳定表达人有机阳离子转运体1(human organic cation transporter1,hOCT1)野生型及两个突变体的马丁达比狗肾上皮(Madin-Darby canine kidney,MDCK)细胞模型。方法从人肝组织中提取hOCT1野生型基因,经定点突变获得hOCT1P341L,hOCT1M420del两个突变型基因,构建表达质粒pcDNA3.1(+)-hOCT1,pcDNA3.1(+)-hOCT1P341L,pcDNA3.1(+)-hOCT1M420del。将质粒转染MDCK细胞,通过G418筛选获得抗性克隆,并通过hOCT1的荧光底物(4-二甲氨基苯乙烯基)-N-甲基吡啶(ASP+)筛选得到具有较高活性的MDCK-hOCT1细胞。经反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)及经典底物N-甲基-4-苯基吡啶(MPP+)的摄取实验,鉴定筛选得到的单克隆细胞株hOCT1 mRNA的表达及功能。结果本实验获得的hOCT1野生型及2个突变体细胞模型与转染空载体的MDCK细胞相比,其hOCT1 mRNA表达量显著增高,对经典底物MPP+的摄取为转染空载体细胞的12.5,13.7,12.0倍,hOCT1抑制剂可显著抑制细胞对MPP+的摄取。结论建立的细胞模型可用于hOCT1抑制剂及底物的筛选。
- 涂美娟陈忠坚孙思源石爱琴李丽萍曾苏蒋惠娣
- 关键词：基因多态性细胞模型
- 大鼠肠道对左旋延胡索乙素及其消旋体的吸收差异研究被引量：14
- 2007年
- 考察延胡索乙素(THP)的吸收机制,并研究其消旋体与左旋延胡索乙素(l-THP)在大鼠肠道的吸收差异。应用单向灌流模型,采用HPLC法测定THP及l-THP在灌流液中的浓度变化。灌流液中THP质量浓度为8,16,32μg.mL-1时,THP吸收速率常数和有效吸收系数均无统计差异(P>0.05),各肠段的吸收速率常数和有效吸收系数也无统计差异(P>0.05);l-THP和THP在大鼠肠道吸收存在显著性差异(P<0.05);在肠道灌流液中加入P-糖蛋白(P-gp)抑制剂维拉帕米后,THP吸收显著增加,而l-THP吸收几乎不变。THP在肠黏膜的转运为被动扩散过程,无特殊吸收窗口;THP消旋体与l-THP的吸收差异可能与P-gp与右旋THP的选择性结合有关。
- 吴佩盛黄善定叶亚菊孙思源蒋惠娣
- 关键词：延胡索乙素左旋延胡索乙素
- 表达人有机阳离子转运体1的细胞模型构建及应用
- 本发明提供一种表达人有机阳离子转运体1的细胞模型构建方法及应用，从肝组织中获得hOCT1的野生型基因片段，定点突变获得P341L，M420del两个突变体基因片段，并与质粒载体连接，染入MDCK细胞，经G418抗性筛选，...
- 涂美娟陈忠坚石爱琴孙思源李丽萍曾苏蒋惠娣
- 文献传递
- 有机阳离子类转运体介导的内外源物质转运及其意义
- 有机阳离子转运体(organic cation transporters,OCTs)、多药及毒素外排蛋白(multidrug and toxin extrusion proteins,MATEs)、肉毒碱/有机阳离子转运...
- 李丽萍翁娅韵杨希周思思涂美娟孙思源王凯雷红梅蒋惠娣
- 稳定表达hMATE1及共表达hMATE1与hOCT1或hOCT2细胞模型的构建被引量：1
- 2015年
- 为构建稳定表达人多药及毒素外排转运体1(h MATE1)的转基因细胞模型,提取人肾总m RNA,经逆转录PCR获得h MATE1 c DNA,借助HindⅢ、KpnⅠ两个酶切位点与pc DNA3.1(+)重组获得重组质粒。将pc DNA3.1(+)-h MATE1重组质粒转染至MDCK、MDCK-h OCT1和MDCK-h OCT2细胞中,经潮霉素B抗性筛选后,以4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)和N-甲基-4-苯基吡啶(MPP+)的积聚实验筛选获得具有良好h MATE1功能的单克隆。测定筛选获得的细胞中转运体m RNA的表达量,并表征其对二甲双胍的积聚或对西咪替丁的转运能力。结果表明,本研究构建的MDCK-h MATE1、MDCK-h OCT1/h MATE1、MDCK-h OCT2/h MATE1细胞模型均高表达h MATE1 m RNA,MDCK-h MATE1细胞对二甲双胍的积聚为转染空载体细胞的17.6倍;MDCK-h OCT1/h MATE1和MDCK-h OCT2/h MATE1细胞对西咪替丁的净外排率分别为17.5和3.65。因此,本研究成功构建了稳定表达h MATE1及共表达h MATE1与h OCT1或h OCT2的细胞模型,可用于h MATE1及其与h OCT1或h OCT2共同参与的药物转运或药物-药物相互作用的体外研究。
- 雷红梅孙思源李丽萍涂美娟周慧曾苏蒋惠娣
- 关键词：细胞模型共表达
- 四氢巴马汀对映体在制备P-糖蛋白抑制剂中的应用
- 本发明提供一种四氢巴马汀对映体在制备P-糖蛋白抑制剂中的应用，所述四氢巴马汀为中药元胡中主要有效成分之一，包括左旋四氢巴马汀及右旋四氢巴马汀。研究表明，四氢巴马汀对映体对P-gp功能有显著的抑制作用，但本身并不是P-gp...
- 孙思源李丽萍黄善定赵鸣孙冬黎刘瑶曾苏蒋惠娣
- 文献传递
