孙小芬
- 作品数：170 被引量：422H指数：11
- 供职机构：上海交通大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划上海市教育委员会重点学科基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学文化科学更多>>
- 一种利用基因工程方法增强烟草抗冻性能的方法
- 本发明属分子生物学、酶学、生理学、育种学以及基因工程等领域。具体涉及利用莨菪AOC基因的cDNA构建高效植物表达载体和工程菌株在烟草中表达该基因、筛选转化子、验证抗冻性能的方法。本方法从莨菪中克隆AOC基因，构建了植物高...
- 蒋科技唐克轩唐燕雷皮妍孙小芬
- 文献传递
- 褐飞虱喂养试验显示表达GNA的转基因水稻纯系抗褐飞虱(英文)被引量：7
- 2001年
- 利用基因枪法将含有３个不同基因（ｈｐｔ，ｇｕｓ和ｇｎａ）的质粒ｐＷＲＧ１５１５和ｐＲＳＳＧＮＡ１共同转化粳稻品种鄂晚５号成熟胚诱导的愈伤组织．共再生出３５株独立转基因植株．ＰＣＲ／Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹法分析发现，８３ ％的转基因植株含有所有３个外源基因．Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法分析发现 ７９％的含 ｇｎａ基因的转基因植株以不同水平表达ＧＮＡ。遗传分析证实外源基因在转基因植株后代中以孟德尔方式遗传．从其Ｒ１代亲本为孟德尔３：１方式遗传的Ｒ２代中，鉴定出２个含有所有３个外源基因的独立转基因植株纯系．这些纯系具有相似的外源基因表达量．褐飞虱喂养试验表明，这些纯系对褐飞虱具有显著的抑制作用．这些揭飞虱抗性提高的转基因纯系将应用于水稻抗虫育种中．实验证明，通过遗传转化和筛选可获得含在农业上有应用价值基因的转基因水稻纯系．
- 唐克轩费炯姚剑虹孙小芬万柄良戚华雄卢兴桂
- 关键词：转基因水稻抗虫育种褐飞虱GNA
- 半夏凝集素基因(pta)导入水稻及其表达的初步研究被引量：49
- 2003年
- 半夏凝集素基因是一种有重要价值的抗虫基因。利用RACE PCR技术克隆出半夏凝集素 (pta)基因 ,并将它构建到载体pCAMBIA1 30 5中形成双元载体 (含pta基因和hpt基因 )。利用农杆菌介导法将pta基因转入粳稻品种鄂宜 1 0 5、中花 1 2和籼稻品种E优 5 32成熟胚诱导的愈伤组织中。通过PCR检测 ,从 1 1 7株T0 代再生植株中筛选出 36株 (其中鄂宜 1 0 5、中花 1 2、E优 5 32分别为 1 9株、7株、1 0株 )转基因植株。对这些转基因后代植株进行Southernblot分析和RT PCR分析表明 :pta基因已经整合到受体细胞基因组中 ,并在转录水平上得到了有效表达。通过对转基因后代的遗传分析 ,成功地从T1 代表现为 1∶2∶1孟德尔分离的分离群体中筛选出 7个独立转基因水稻纯系 (其中包括 4个鄂宜 1 0 5、1个中花 1 2和 2个E优 5 32转基因纯系 )。对这 7个独立转基因水稻T2 代纯系进行褐飞虱生物抗性鉴定和田间隔离喂养实验 ,结果显示 ,这些转基因纯系对褐飞虱的存活率和发育进度均有显著的抑制作用。同时 ,实验结果还表明 2～ 5mg L的 2 ,4 D是愈伤组织诱导和生长的必需条件 ,而且受体的基因型对愈伤组织诱导率和转化频率均有显著影响 ,在同等条件下 。
- 张红宇吴先军唐克轩汪旭东孙小芬周开达
- 关键词：抗虫转基因水稻SOUTHERNBLOTRT-PCR
- 调控基因在分泌型腺毛基细胞中优势表达的启动子及应用
- 调控基因在分泌型腺毛基细胞中优势表达的启动子及应用。本发明公开了一种植物生物技术领域的基因启动子，该启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，能够调控目的基因在植物分泌型腺毛基细胞中优势表达。同时本发明还涉及前述基...
- 唐克轩石璞付雪晴唐岳立孙小芬吕宗友颜廷祥陈明慧
- 文献传递
- 通过遗传转化获得含多基因的水稻转基因纯合植株(英文)被引量：4
- 2001年
- 利用基因枪法将含有４个不同基因的３个质粒共转化由粳稻品种鄂宜１０５号和鄂晚５号种子胚 诱导的愈伤组织（５～１０ ｄ龄）． 从轰击的９８６块愈伤组织中共再生出１６９株独立的转基因水 稻植株（转化率为１７％）． ＰＣＲ／Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析显示７０％以上的转基因植株含有 所有４个基因． ＧＵＳ组织化学分析、Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ和／或ＲＴ－ＰＣＲ分析表明所有４个基因的共表 达率为７０％． 未观察到任何质粒在整合中存在优势，转基因拷贝数也与基因表达量无关． 遗传分析证实外源基因在后代植株中大多以孟德尔方式遗传． 从其Ｒ１代为３∶１孟德尔方式遗传 的后代Ｒ２代植株中，鉴定出含有３个或４个不同基因的转基因纯合植株系． ＰＣＲ／Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏ ｔ分析证实了这些转基因纯合植株系． 这些系的植株具有相似的外源基因表达量． 我们证实 通过基因枪介导的共转化，结合常规育种方法筛选可以获得含多基因的转基因水稻纯合植株 ． 这项技术为利用基因工程同时改良作物多个性状提供了一种途径．
- 唐克轩孙小芬姚剑虹戚华雄卢兴桂
- 关键词：转基因水稻基因工程基因表达
- 按植物偏爱密码子合成降钙素基因相关肽基因及其在植物中的应用
- 本发明提供了一种按植物偏爱密码子设计合成的编码降钙素基因相关肽的基因。涉及包含所说基因的融合基因构建体,携带该构建体的新的重组表达载体。该表达载体具有在普通植物中高效表达的特性。还涉及被所说的表达载体转化的植物细胞,以及...
- 唐克轩庞永珍赵凌侠孙小芬
- 文献传递
- 一种亚铁离子在治疗疟疾的药物中的应用
- 本发明提供一种亚铁离子在治疗疟疾的药物中的应用，所述药物包括含有亚铁离子的第一制剂和含有用于治疗疟疾的药物的第二制剂。本发明通过亚铁离子对常规治疗疟疾的药物的辅助作用，可治疗对青蒿素类药物或奎宁类药物产生耐药性的疟疾株，...
- 唐克轩付雪晴王玉亮孙小芬
- 文献传递
- 提高长春花毛状根萜类吲哚生物碱含量的方法
- 本发明是一种生物技术领域的提高长春花毛状根TIAs含量的方法。本发明从长春花中克隆str和g10h基因，构建含str和g10h基因的植物表达载体，遗传转化长春花获得转基因长春花毛状根，高效液相色谱法测定长春花毛状根中TI...
- 唐克轩龚一富廖志华苗志奇孙小芬
- 文献传递
- 红豆杉内生真菌发酵培养基和原生质体制备酶系统的筛选被引量：12
- 2006年
- 在对红豆杉内生真菌(Ozoniumsp.)适生碳源、氮源和生长情况研究的基础上,通过正交试验筛选了其发酵培养基和原生质体制备的酶系统;用L9(34)安排了四因素三水平并考虑交互作用的正交试验,对实验结果进行了分析.结果表明,最优的发酵培养基为果糖1%、蔗糖1%、蛋白胨0.2%、酵母粉0.5%、KH2PO40.5%、MgSO4·7H2O0.3%、VB10.001%;分离原生质体的最优酶系统为1.5%溶壁酶+0.5%蜗牛酶+1.5%纤维素酶+1.0%溶菌酶;用此酶系统在30℃条件下酶解3h,原生质体的产量达6.55×107个/mL酶液;经荧光素二醋酸酯(FDA)染色评估原生质体活力,表明该条件下分离的原生质体活力较高,原生质体的再生率为2.56%.该研究为利用生物技术手段改良紫杉醇生产菌奠定了基础.
- 周选围王子楠魏雅敏蒋科技林娟孙小芬谈锋苗志奇唐克轩
- 关键词：内生真菌培养基酶系统原生质体
- 一种AaTSW1基因启动子及其应用与制备方法
- 本发明公开了一种AaTSW1基因启动子及制备方法，该启动子的核苷酸序列如序列表中序列1所示；同时本发明还涉及该AaTSW1基因启动子在利用植物腺毛组织表达和生产代谢产物的基因工程育种中的应用。本发明提供的启动子能引导基因...
- 唐克轩陈明慧颜廷祥付雪晴石璞马亚男郝小龙孙小芬
