姜云波
- 作品数：11 被引量：6H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 以hTERT为靶点的肿瘤治疗性腺病毒疫苗
- 本发明公开了一种以hTERT为靶点的肿瘤治疗性腺病毒疫苗。本发明是先将hTERT复合基因eTERTFcGB插入pShuttle-CMV穿梭载体中CMV启动子的下游，得到携带hTERT复合基因eTERTFcGB的重组穿梭载...
- 于继云阎瑾琦肖毅徐元基姜云波张巍王宇刘宁杜芝燕
- 文献传递
- mag-1基因与肿瘤细胞转移的相关性研究被引量：3
- 2008年
- 目的:探讨mag-1基因与肿瘤细胞转移的关系。方法:检测mag-1在人肺巨细胞癌高低转移细胞株PLA801D与PLA801C、肺癌高低转移细胞株A549与H1299及乳腺癌高低转移细胞株MCF-7与MDA-MB-231中mag-1的表达水平;检测构建的mag-1正反义真核表达载体转染细胞后mag-1表达水平的变化;将mag-1正义表达载体分别转染低转移细胞株PLA801C及MCF-7并筛选出稳定克隆;研究mag-1过表达对细胞形态、增殖、迁移、黏附及侵袭等生物学行为的影响。结果:高转移细胞株PLA801D中mag-1的mRNA及蛋白表达水平均显著高于低转移细胞株PLA801C中mag-1的表达水平,乳腺癌高低转移细胞株中mag-1的蛋白表达水平也有明显的差异;过表达mag-1细胞的形态及增殖能力没有发生改变,而细胞的黏附、迁移及侵袭能力增强。结论:mag-1可能促进肿瘤细胞的转移。
- 贾海泉蔺会云徐元基杜芝燕王妍陈惠华姜云波陆应麟
- 关键词：肿瘤转移转染基因表达肺肿瘤乳腺肿瘤
- 大鼠TNFR-Fc重组腺相关病毒载体的构建、表达及中和活性鉴定
- 2013年
- 目的构建携带大鼠肿瘤坏死因子II型受体胞外区(TNFR)融合大鼠IgG Fc片段的重组2型腺相关病毒载体(pAAV2/TNFR-Fc),并对目的蛋白TNFR-Fc的表达和生物学活性进行初步鉴定,为后续的类风湿关节炎基因治疗研究做准备。方法构建大鼠TNFR-Fc融合基因重组腺相关病毒(AAV)载体,体外转染293T细胞,收集转染上清,以ELISA和Western blot等方法检测目的蛋白的表达,并应用L929细胞测定重组表达产物的TNF-α细胞毒中和活性。结果成功构建重组表达载体pAAV2/TNFR-Fc,在转染细胞上清中检测到目的蛋白TNFR-Fc的表达,其可有效中和大鼠TNF-α的L929细胞毒活性。结论成功构建了大鼠TNFR-Fc融合基因,并验证了其在2型AAV载体上的分泌性表达,为进一步病毒包装及动物实验奠定了基础。
- 王芳杜芝燕王琳姜云波于继云阎瑾琦徐元基张巍
- 关键词：重组腺相关病毒载体中和活性
- 携带p53AIP1基因的重组复制缺陷型腺病毒载体的构建、鉴定及其在人宫颈癌细胞系HeLa中的表达
- 2013年
- 目的构建携带外源性p53调节的凋亡诱导蛋白1(p53AIP1)基因重组复制缺陷型腺病毒载体,观察其在HeLa细胞中的表达。方法设计针对p53AIP1基因序列并插入特定酶切位点的特异引物,通过PCR扩增p53AIP1基因序列,利用DNA重组技术将p53AIP1基因定向插入到腺病毒穿梭载体pDC316,构建穿梭质粒pDC316-p53AIP1;在LipofectamineTM2000介导下穿梭载体pDC316-p53AIP1和腺病毒骨架载体pBHGloxΔE1,3Cre共转染进HEK293细胞;通过Cre-loxP重组酶系统,使Shuttle质粒和辅助大质粒发生定点重组从而包装产生携带目的基因p53AIP1的复制缺陷型重组腺病毒(Ad-p53AIP1)。将Ad-p53AIP1和Ad-null按MOI=100感染HeLa细胞,应用Western blot法检测蛋白水平的表达。结果基因片段成功连入pDC316载体上,对所构建新载体分别行PCR扩增、酶切、测序鉴定,与预计一致。Western blot法检测证实,Ad-p53AIP1感染HeLa细胞后蛋白有表达。结论成功构建携带p53AIP1基因的重组复制缺陷型腺病毒载体,并且有较强的感染能力。
- 林晓亮姜云波赵倩殷小涛田仁礼李云奇徐元基阎瑾琦张巍高江平于继云
- 关键词：腺病毒载体HELA细胞基因治疗
- 人肿瘤转移相关基因mag-2的多克隆抗体的制备和鉴定
- 2007年
- 目的:制备和鉴定针对人肿瘤转移正相关基因mag-2蛋白产物的特异性多克隆抗体。方法:采用生物软件分析mag-2蛋白序列特性,预测特异性抗原表位,人工合成17肽抗原表位片段,将之与钥孔碱血蓝蛋白(KLH)耦联,采用背部皮下及皮内多点注射法免疫日本大耳白兔,收集分离血清,间接酶联免疫吸附试验(ELISA)测定其效价,Western印迹试验鉴定其特异性及其在多种肿瘤细胞中的表达。结果:成功免疫日本大耳白兔,ELISA结果表明得到的抗血清与免疫多肽有良好的结合,获得了高效价的多克隆抗体;Western印迹试验结果显示抗血清检测到的条带大小约为55×103,与mag-2理论蛋白产物相对分子质量相符;发现mag-2在多种肿瘤细胞中均有表达。结论:成功制备了mag-2特异性多克隆抗体,为深入研究mag-2基因在肿瘤转移中的作用提供了一个有用的工具。
- 刘刚徐元基姜云波贾海泉潘和平杜芝燕陆应麟
- 关键词：多克隆抗体肿瘤转移表位
- 人PSCA和PAP融合基因真核表达质粒的构建与表达
- 2015年
- [目的]构建人PSCA和PAP融合基因的真核表达质粒,并在体外进行表达和鉴定。[方法]设计并合成人PSCA和PAP融合基因,然后将其定向克隆到真核表达载体p IRES-neo中,双酶切鉴定后,将重组质粒p IRES-neoPSCA-2A-PAP瞬时转染293T细胞,采用流式细胞术和免疫荧光细胞化学技术验证其表达。[结果]构建了p IRES-neo-PSCA-2A-PAP真核表达质粒,流式细胞术和免疫荧光细胞化学技术结果显示融合抗原可以在293T细胞表达,阳性率高达67.85%。[结论]成功构建了融合抗原PSCA与PAP的真核表达质粒p IRES-neo-PSCA-2A-PAP,为建立稳定转染人PSCA和PAP融合基因的细胞系奠定了基础。
- 于涧王宇朱晓明武帅王籽橙姜云波杜芝燕阎瑾琦于继云
- 关键词：PSCAPAPDNA疫苗前列腺癌
- 促凋亡基因p53AIP1的研究进展
- 2008年
- p53AIP1基因是近年发现的促凋亡基因,在p53依赖性的凋亡通路中起重要作用。p53AIP1介导线粒体凋亡途径,其表达依赖于p53蛋白的Ser46的磷酸化。p53AIP1可直接促进凋亡,其促凋亡作用可能强于p53本身,并对p53抗性的肿瘤细胞也有作用。因此,对p53AIP1的深入研究可能会为对p53基因治疗有抗性的肿瘤患者带来新的希望。
- 姜云波陆应麟
- 关键词：肿瘤抑制细胞凋亡
- 重组复制缺陷型腺病毒Ad-p53AIP1的抗肿瘤效应及其作用机制被引量：3
- 2008年
- 目的:探讨外源性p53AIP1(p53-regulated apoptosis-inducing protein 1)基因抗肿瘤效应及其作用机制,以评估p53AIP1基因在肿瘤基因治疗中应用的可行性。方法:构建携带p53AIP1基因的重组复制缺陷型腺病毒Ad-p53AIP1,感染人肝癌细胞HepG2,应用MTT比色法、Western blotting、流式细胞术、罗丹明染色以及电镜等观察外源性p53AIP1基因表达对肿瘤细胞的作用及其相关机制。小鼠皮下接种感染Ad-p53AIP1的小鼠乳腺癌4T1细胞,观察Ad-p53AIP1对肿瘤细胞体内成瘤性的影响;建立4T1细胞皮下移植瘤小鼠模型,直接瘤内多点注射重组腺病毒,观察Ad-p53AIP1的抗肿瘤疗效。结果:感染Ad-p53AIP1的HepG2细胞能够高效表达P53AIP1蛋白。MTT检测显示Ad-p53AIP1对人肝癌细胞HepG2的生长抑制率达50%以上;流式细胞术分析证实p53AIP1使肿瘤细胞周期阻滞于G_2/M期;罗丹明染色、电镜观察以及凋亡相关蛋白PARP表达的检测均证实p53AIP1能诱导肿瘤细胞发生明显凋亡。感染Ad-p53AIP1的肿瘤细胞体内成瘤受到非常明显的抑制(P<0.01),Ad-p53AIP1瘤体注射对移植瘤生长也有明显的抑制作用(P<0.05)。Western blotting以及RT-PCR检测证实Ad-p53AIP1对p53 mRNA表达无影响,能下调mdm2基因的表达;p53AIP1能上调P53蛋白的表达、下调MDM2蛋白的表达水平,同时还影响P21等细胞周期相关蛋白和凋亡相关蛋白的表达。结论:p53AIP1有明显的体内外抗肿瘤作用,其作用机制与其反向调控P53蛋白、调控多种细胞周期和细胞凋亡相关蛋白、诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡有关,该基因在肿瘤基因治疗中具有潜在的应用前景。
- 姜云波陆应麟贾海泉徐元基陈惠华刘刚王妍杜芝燕
- 关键词：肝癌细胞抗瘤效应
- 重组复制缺陷型腺病毒Ad-p53AIP1的构建及其对肿瘤的作用研究
- 肿瘤严重威胁着人类的健康。治疗肿瘤的传统方法包括手术、化疗、放疗,虽然取得了不可估量的成效,但是距离彻底根治肿瘤还很遥远。近十几年来,人们将彻底根治肿瘤的希望寄托于基因治疗。早有学者预言,肿瘤的基因治疗将是人类征服恶性肿...
- 姜云波
- 关键词：细胞周期肿瘤基因治疗
- 文献传递
- 重组复制缺陷型腺病毒Ad—p53AIP1的构建及其对肿瘤的作用研究
- 目的通过观察外源性p53AIP1基因高表达后对肿瘤细胞的作用及机理的研究,以探讨p53AIP1基因在肿瘤基因治疗中应用的可行性。方法将外源性p53AIP1基因置于MCMV启动子下游,构建携带p53AIP1基因的重组复制缺...
- 姜云波陆应麟
- 关键词：细胞周期细胞凋亡肿瘤基因治疗
- 文献传递
