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shRNA沉默TPX2基因对人肺癌细胞株A549增殖及侵袭的影响: 目的：TPX2(Targeting for Xklp2)基因是近年发现的一个参与细胞有丝分裂过程的基因，与多种恶性肿瘤增殖凋亡，侵袭转移等密切相关。本实验第一部分构建靶向人TPX2基因的短发夹RNA(shorthairp...; 唐熹; 关键词：SHRNA沉默肺癌细胞株A549 细胞增殖细胞侵袭

TPX2基因沉默对人肺腺癌A549细胞增殖的影响被引量：2: 2012年; 目的探讨TPX2基因沉默对人肺腺癌A549细胞增殖的影响。方法构建3个靶向TPX2基因的短发夹RNA(shRNA)表达质粒,转染A549细胞,RT-PCR检测TPX2基因mRNA的转录水平;筛选干扰效果最佳的质粒转染的细胞,RT-PCR检测增殖相关基因CDK4和CyclingD1 mRNA的转录水平,Western blot检测TPX2蛋白的表达水平,显微镜下观察细胞的生长情况,MTT法检测细胞的增殖活力。结果 TPX2 shRNA-3质粒干扰效果最佳,有效沉默TPX2基因后,A549细胞中TPX2基因mRNA的转录水平及蛋白的表达水平均受到明显抑制(P<0.01),与空白对照组比较,抑制率分别为73.8%和82.8%;CDK4和CyclingD1基因mRNA的转录水平也明显降低(P<0.01或<0.05),与空白对照组比较,抑制率分别为76.7%和67.3%;A549细胞的生长和增殖也明显受到抑制,转染后72 h,增殖抑制率可达61.55%(P<0.05)。结论成功构建了靶向TPX2基因的shRNA表达质粒,其在mRNA和蛋白水平有效抑制A549细胞TPX2基因的表达后,细胞生长受到抑制,增殖能力减弱。; 唐熹张徽刘莹; 关键词：短发夹RNA 肺腺癌细胞增殖

shRNA沉默TPX2基因对人肺腺癌细胞株A549增殖及侵袭的影响: 目的：TPX2（Targeting for Xklp2）基因是近年发现的一个参与细胞有丝分裂过程的基因，与多种恶性肿瘤增殖凋亡，侵袭转移等密切相关。本实验第一部分构建靶向人TPX2基因的短发夹RNA（shorthairp...; 唐熹; 关键词：SHRNA 增殖; 文献传递

抗坏血酸与乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的相关性: 2011年; 目的探讨抗坏血酸与乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的相关性。方法分别用0.5、1.0、2.0和4.0mmol/L的抗坏血酸处理MDA-MB-231细胞,MTT法检测细胞增殖水平;RT-PCR检测细胞p53和bcl-2基因mRNA的转录水平;West-ern blot检测细胞P53和bcl-2蛋白的表达;流式细胞术检测细胞的凋亡率。结果不同浓度的抗坏血酸均可明显抑制MDA-MB-231细胞增殖,促进其凋亡,并使细胞p53基因mRNA转录水平及P53蛋白的表达水平明显升高,而bcl-2基因mRNA转录水平及bcl-2蛋白表达水平明显降低,且均呈剂量依赖性。结论抗坏血酸能抑制MDA-MB-231细胞增殖,诱导其凋亡,其机制可能是通过上调P53,下调bcl-2介导的。; 卫惠杰张徽刘莹唐熹; 关键词：抗坏血酸乳腺肿瘤细胞增殖细胞凋亡

短发夹RNA靶向沉默TPX2基因促进人肺腺癌A549细胞凋亡及其相关机制被引量：5: 2011年; 目的:探讨靶向Xklp2靶蛋白(targeting protein for Xenopus kinesin-like protein2,TPX2)基因的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)对肺腺癌A549细胞凋亡的影响及其可能机制。方法:构建靶向TPX2基因的shRNA重组载体,将其转染至肺腺癌A549细胞中,RT-PCR检测细胞中TPX2、Aurora-A、p53和Bcl-2mRNA的表达,蛋白质印迹法检测TPX2蛋白的表达,FCM检测细胞周期和细胞凋亡情况。结果:成功构建重组载体pMagic4.1-shRNA-TPX2。将pMagic4.1-shRNA-TPX2转染至A549细胞后,TPX2、Aurora-A和Bcl-2mRNA的表达水平明显下调,p53mRNA的表达水平明显上调,TPX2蛋白的表达水平明显下调,细胞凋亡率明显增加,细胞阻滞于S期,与空白对照组(未转染组)和阴性对照组(转染pMagic4.1-shRNA-NC)相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:靶向TPX2的shRNA能促进肺腺癌A549细胞的凋亡,其作用可能与上调p53表达和下调Bcl-2表达有关。; 刘莹张徽唐熹; 关键词：细胞凋亡

shRNA沉默TPX2基因对肺腺癌细胞A549紫杉醇敏感性的影响: 2013年; 目的观察靶向Xklp2靶蛋白(TPX2)-短发夹状RNA(shRNA)对肺腺癌A549细胞TPX2基因以及紫杉醇敏感性的影响。方法将靶向TPX2基因的片段插入载体后构建重组质粒,经Lipofectamine 2000将其导入A549细胞,并进行筛选及克隆化培养。细胞分3组培养:(1)转染组;(2)阴性对照组;(3)空白对照组。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白印迹法(Western Blot)分析转染前后TPX2基因的表达情况。MTT法检测转染干扰载体后A549细胞对紫杉醇化疗的敏感性变化。RT-PCR检测肺耐药蛋白(LRP)及多药耐药相关蛋白(MRP)mRNA表达水平的变化。结果与对照组相比,转染重组质粒后,TPX2基因的表达明显降低,MTT法显示转染TPX2-shRNA载体质粒的A549细胞对紫杉醇的敏感性明显增加;RT-PCR检测相关基因显示,LRP、MRP mRNA表达水平与空白对照组相比无明显改变(P>0.05)。结论 TPX2-shRNA干扰载体能有效抑制肺腺癌细胞系A549中TPX2基因的表达,并增强其对化疗药物的敏感性。; 刘莹张徽唐熹; 关键词：短发夹RNA 腺癌药物敏感性

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唐熹