周欣阳
- 作品数：15 被引量：46H指数：4
- 供职机构：南通大学医学院神经科学系更多>>
- 发文基金：江苏省中医药管理局资助项目南通市科技计划项目江苏省高校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 天花粉蛋白诱导黑色素瘤B-16细胞DNA损伤及其机制的研究
- 本文研究目的：研究天花粉蛋白(Trichosanthin，TCS)对黑色素瘤B-16细胞的作用，探讨天花粉蛋白抗肿瘤的机制。
研究方法：1.应用FITC标记TCS，在激光共聚焦扫描显微鏡下，观察FITC-TCS...
- 周欣阳
- 关键词：天花粉蛋白黑色素瘤DNA损伤
- 文献传递
- 异硫氰酸荧光素标记动态观察天花粉蛋白对黑色素瘤B16细胞的损伤被引量：4
- 2007年
- 目的:应用异硫氰酸荧光素标记天花粉蛋白,在激光共聚焦显微镜下直接观察天花粉蛋白进入黑色素瘤B16细胞的动态过程并分析其对黑色瘤B16细胞的损伤作用。方法:实验于2003-08/2004-08在南通大学神经再生重点实验室完成。将常规传代培养的黑色素瘤B16细胞用胰酶消化,以5×109个/L的浓度种植于24孔培养板。将天花粉蛋白、异硫氰酸荧光素-天花粉蛋白、异硫氰酸荧光素-牛血清白蛋白分别加入培养细胞中,终浓度为50mg/L,同时加入等量生理盐水作为正常对照组,每组再分别设3,6,12h不同孵育时间组。异硫氰酸荧光素标记天花粉蛋白后,利用激光共聚焦显微镜观察异硫氰酸荧光素-天花粉蛋白进入细胞的过程及其荧光强度,CCK-8细胞毒性实验评估各组细胞存活率、并用单细胞凝胶电泳及hoechst33258染核观察天花粉蛋白对黑色素瘤B16细胞致DNA损伤作用。结果:①终浓度50mg/L的异硫氰酸荧光素-天花粉蛋白孵育3h时已经进入黑色素瘤细胞,6h时进入细胞量达到最高,12h时已轻度下降,各时间点比较差异有统计学意义(P<0.01)。异硫氰酸荧光素-天花粉蛋白组与异硫氰酸荧光素-牛血清白蛋白组荧光强度差异有显著性(P<0.01)。②终浓度50mg/L异硫氰酸荧光素-天花粉蛋白、天花粉蛋白孵育黑色素瘤细胞3,6h后利用单细胞电泳和Hoechst33258染色未观察到核形态的变化;但孵育6h后CCK-8细胞毒性实验显示活细胞数量明显下降;孵育12h后出现DNA损伤的特征性彗星尾现象,并观察到明显的核浓缩和边集现象,出现特征性凋亡小体。结论:孵育6h时天花粉蛋白进入细胞量最多,但并没有明显的细胞DNA损伤的作用,而孵育12h时产生明显的细胞毒作用和凋亡的发生。
- 周欣阳张天一顾君一
- 关键词：天花粉蛋白黑色素瘤B16细胞DNA损伤
- HSPgp96与rIL-2治疗小鼠H22肝癌移植瘤的实验研究被引量：2
- 2004年
- 目的 :研究热休克蛋白 gp96 (Heat- Shock Protein gp96 ,HSPgp96 ) -肽复合物瘤苗与重组人白介素 -2 (Recombinant Human Interleukin- 2 ,r IL- 2 )对小鼠 H2 2肝癌移植瘤的治疗效果。方法 :从 H2 2肝癌细胞中提取和纯化 HSPgp96。建立小鼠 H2 2肝癌移植瘤模型 ,应用 HSPgp96与 r IL - 2治疗并比较疗效 ,观察指标 :瘤重 ,光镜、电镜下观察组织结构。结果 :经鉴定获得纯化的 HSPgp96。HSPgp96 5 μg与 r IL- 2 2 5 ku治疗小鼠 H2 2肝癌有效。结论 :该实验方法提纯的 HSPgp96与重组人 IL - 2都能有效抑制小鼠 H2
- 施海燕周欣阳张天一林琳吴坚顾君一
- 关键词：热休克蛋白GP96H22肝癌小鼠
- 骨髓基质细胞对背根神经节细胞生长的影响被引量：3
- 2006年
- 目的:体外研究骨髓基质细胞(Bonemarrowstromalcells,MSCs)对背根神经节细胞生长的影响。方法:采用差速贴壁的方法分离、培养大鼠骨髓基质细胞。经transwell膜与新生大鼠背根神经节细胞联合培养。利用MTT、细胞免疫荧光组织化学方法检测骨髓基质细胞对背根神经节细胞生长的影响。结果:联合培养后的新生大鼠背根神经节细胞活力增加,神经突起增长。结论:骨髓基质细胞对于背根神经节细胞的活力以及神经突起生长有一定的促进作用。
- 王洁周欣阳刘炎丁斐顾晓松
- 关键词：骨髓基质细胞背根神经节细胞
- 《生物医学电子显微镜技术》课程教学初探被引量：3
- 2013年
- 《生物医学电子显微镜技术》主要是在很多医学等高等学校中,特别是在研究生教育中开设的的一门多学科交叉课程。该门课程对于培养高素质的生物医学类人才具有重要意义。为提高学生的学习兴趣,努力取得较好的教学效果,本文结合日常的课堂及实验课教学实践,探索适应现阶段实际情况的本课程教学方法。
- 朱昌来周欣阳王莹洁张天一
- 关键词：教学方法教学质量
- PBL教学模式在神经生物学教学中的应用体会被引量：13
- 2009年
- 神经生物学（Neurobiology）是一门在分子、细胞、器官和整体等多个水平上研究神经系统的形态和功能的综合学科。神经生物学是在传统神经科学的基础上成长和发展起来的一门新兴的综合性的边缘学科，涵盖了基础神经科学的诸多学科，内容涉及神经解剖、生理、药理、病理、生物化学和细胞生物学及分子生物学等学科。如何将神经科学基本原理和科研进展以系统、合乎逻辑的方式教给学生，是当今神经生物学教学的一项难题。针对神经生物学的教学特点，我们尝试运用PBL（problembasedlearnin）教学模式来充分调动教师和学生两方面的积极性。收到了较好教学效果。
- 周欣阳丁斐
- 关键词：神经生物学PBL教学模式
- 热休克蛋白gp96-肽复合物的提取及纯化被引量：3
- 2005年
- 目的:建立从H22肝癌细胞中提取、纯化热休克蛋白gp96肽复合物的方法。方法:①制备H22肝癌细胞蛋白:将H22肝癌细胞裂解、离心、过滤及透析后获得。②gp96肽复合物的纯化:上述可溶性H22肝癌细胞蛋白经分级硫酸铵盐析后,依次用ConASepharose亲和层析、SephadexG25更换缓冲液及DEAESephacel离子交换层析分离纯化。③gp96肽复合物的鉴定和浓度测定:所得蛋白经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳和Westernblot进行蛋白分子量及性质鉴定,Lowry法测定蛋白浓度。结果:分离、纯化得到的蛋白经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染鉴定为单一带,分子量为96kD;Westernblot结果证实为HSPgp96。每20ml压积H22细胞最终获得1mg的HSPgp96。结论:使用本分离纯化方法可获得高纯度HSPgp96肽复合物。
- 张天一牛纪晓周欣阳林琳顾君一
- 关键词：HSPGP96-肽复合物纯化H22肝癌小鼠
- 天花粉蛋白诱导H22肝癌细胞凋亡的研究
- 目的:观察天花粉蛋白(Trichosanthin,TCS)在体外诱导H22肝癌细胞凋亡的效果。方法:1.细胞接种与培养将H22肝癌细胞以10%小牛血清的RPMI1640培养液调整至1×106个/ml并加入24孔培养板中,...
- 林琳周欣阳张天一顾君一
- 文献传递
- 天花粉蛋白诱导黑色素瘤凋亡机制的研究被引量：5
- 2007年
- 目的:研究天花粉蛋白(TCS)对黑色素瘤B-16细胞的作用,探讨天花粉蛋白抗肿瘤的机制。方法:(1)应用单细胞电泳及Hoechst33258染核形态观察来研究TCS对黑色素瘤B-16细胞损伤作用。(2)应用激光共聚焦扫描显微术结合特异性荧光探针Fluo-3/AM、H2DCF-DA和DAF-FM diacetate观察在TCS作用下,单个瘤细胞内钙离子(Ca2+)、一氧化氮(NO)和活性氧(ROS)的信号动态变化,并探讨细胞内ROS和NO的增加与钙离子的关系。结果:(1)终浓度50mg/L TCS孵育3h、6h后,单细胞电泳、Hoechst33258染色的核形态观察未发现与对照组有明显区别;孵育12h后单细胞电泳可见DNA损伤的特征性现象-彗星尾巴;Hoechst33258染色的核形态观察发现有明显的核浓缩和边集现象,出现特征性凋亡小体。(2)终浓度50mg/L的TCS可引起细胞内Ca2+、NO和ROS的生成量明显高于对照组(P<0.01)。细胞内ROS和NO的增加与钙离子的增加密切相关。结论:天花粉蛋白对黑色素瘤B-16细胞DNA具有较强损伤作用,可诱导其发生凋亡;天花粉蛋白诱导凋亡可能与细胞内钙、ROS和NO的增加有关。
- 周欣阳张天一顾君一丁斐
- 关键词：黑色素瘤活性氧一氧化氮
- 天花粉蛋白诱导H_(22)肝癌细胞凋亡的研究被引量：7
- 2003年
- 目的 :观察天花粉蛋白 (trichosanthin,TCS)在体外诱导 H2 2 肝癌细胞凋亡的效果。方法 :以不同剂量的 TCS加入到H2 2 肝癌细胞溶液中 ,在 2 4孔培养板上培养 72 h后荧光染色并涂片 ,激光共聚焦显微镜下观察 TCS诱导 H2 2 肝癌细胞凋亡的作用效果。结果 :10 μg/ml浓度的 TCS就可诱导 H2 2 肝癌细胞出现典型的凋亡形态学特征。经统计学分析 ,10 0 μg/ml TCS组与 5 0 μg/ml TCS组间差异无统计学意义 (P>0 .0 5 ) ,其余各组间差异均有统计学意义 (P<0 .0 1)。TCS的作用浓度与凋亡指数间有正相关关系 (r=0 .9713,P<0 .0 1)。结论 :TCS在体外可诱导 H2 2 肝癌细胞发生凋亡 ,诱导 H2 2 肝癌细胞凋亡是 TCS抗肝癌作用的机制之一 ,具有成为肝癌治疗新药的潜在价值。
- 周欣阳张天一施海燕林琳顾君一
- 关键词：天花粉蛋白凋亡激光共聚焦显微镜H22肝癌细胞
