周佳平
- 作品数：3 被引量：9H指数：3
- 供职机构：浙江农林大学理学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 绿竹及拟南芥SEP3蛋白原核表达、纯化及寡聚体分析
- 竹类资源丰富，研究和开发利用的空间巨大。有关竹子开花生理过程的研究一定程度上受取样困难和相关基因组信息缺乏的限制，因此研究竹子开花中的关键因子是非常必要的。植物体内SEPALLATA3蛋白（简称SEP3）与其他蛋白或元件...
- 周佳平
- 关键词：绿竹拟南芥原核表达多聚体
- 文献传递
- 绿竹SEP3-like蛋白表达纯化以及不同结构域互作研究被引量：3
- 2016年
- 在双子叶植物中,SEPALLATA3(SEP3)参与生殖生长的很多方面,包括花分生组织和花器官的形成。但是在单子叶植物中,花器官形成的分子机制还不清楚。为了揭示单子叶植物中SEP3蛋白的结构以及聚合体的形成与生物学功能的关系,以单子叶植物绿竹Bambusa oldhami为材料,构建绿竹SEP3(BoSEP3)蛋白不同结构域原核表达载体,在大肠杆菌中进行重组蛋白诱导表达,获得不同结构域的可溶蛋白,通过镍柱及分子筛分离纯化表明,BoSEP3蛋白K结构域以四聚体形式存在;同时构建BoSEP3蛋白不同结构域的酵母表达载体,通过酵母双杂交系统检验BoSEP3蛋白同源互作表明,K结构域有参与形成多聚体的功能。实验提供了一套表达纯化BoSEP3蛋白以及检验蛋白质互作的有效方案,为开展BoSEP3蛋白功能和结构生物学研究奠定了基础。
- 吴文魁周佳平林新春徐英武曹友志
- 关键词：蛋白质纯化酵母双杂交
- 拟南芥SEPALLATA3蛋白质原核表达与纯化被引量：3
- 2014年
- SEPALLATA3(SEP3)属于花器官建成ABCE模型中的E类基因,为了揭示SEP3蛋白是如何形成多聚体的,以及多聚体与其生物学功能之间的联系,开展了拟南芥Arabidopsis thaliana AtSEP3蛋白质体外可溶性表达实验,构建了原核表达载体,并在大肠埃希菌Escherichia coli细胞中进行重组蛋白的诱导表达。从蛋白不同的结构域、诱导时间和诱导温度等方面对蛋白的可溶性表达进行了分析。最后以pET-15b为表达载体,大肠埃希菌表达菌株E.coli‘Rosetta’为宿主菌株,22℃诱导表达15 h,获得不同片段的AtSEP3可溶性蛋白。通过镍柱及分子层析色谱柱分离纯化,表明AtSEP3蛋白以四聚体形式存在。
- 周佳平林新春徐英武
- 关键词：植物学原核表达蛋白纯化多聚体
