周丽君
- 作品数:3 被引量:4H指数:1
- 供职机构:天津医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金:天津市卫生局科技基金天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 重组腺病毒rAd-E1A-CDglyTK对人卵巢癌SKOV3细胞的抑制作用被引量:3
- 2008年
- 目的:探讨含腺病毒基因E1A、融合自杀基因CDglyTK及报告基因GFP的重组腺病毒rAd-E1A-CDglyTK与酶前体药物5-FC和(或)GCV联合应用对人卵巢癌SKOV3细胞的抑制作用。方法:将重组腺病毒质粒prAd-E1A-CDglyTK经脂质体介导转染293细胞,进行病毒的扩增、纯化与PCR鉴定,以紫外分光光度法与TCID50法测定纯化病毒的颗粒浓度与感染性滴度,计算病毒比活性;在SKOV3细胞中观察重组病毒的复制能力及感染效率,确定感染率达90%以上的最小MOI。用MTT法观察感染重组病毒的SKOV3细胞对5-FC或GCV的敏感性,并计算IC_(50);观察一定MOI的rAd-E1A-CDglyTK或重组复制缺陷型腺病毒rAd-CDglyTK与IC_(50)的5-FC和(或)GCV联合应用对SKOV3细胞生长的抑制作用。结果:经PCR和琼脂糖凝胶电泳证实,纯化重组腺病毒中存在E1A和CDglyTK两个基因片段,其病毒颗粒浓度和感染性滴度分别为9.47×10^(11) VP/ml和3.16×10^(10)IU/ml,病毒比活性为3.34%。重组病毒可在SKOV3细胞中复制,对SKOV3细胞的感染效率随MOI的增加而增加,可致细胞感染率达90%以上的最小MOI为50 IU/cell。5-FC或GCV明显抑制感染细胞的生长,且存在明显的剂量依赖效应。两种重组腺病毒/前药系统的抑瘤作用比较显示,rAd-E1A-CDglyTK组细胞生长抑制率[(16.57±1.59)%]显著高于rAd-CDglyTK组[(10.44±1.80)%,P<0.01];与IC_(50)的5-FC和GCV双药联合应用,其抑制率达(71.68±2.63)%,显著高于rAd-CDglyTK/5-FC+GCV组的(63.64±2.91)%(P<0.01)。结论:重组腺病毒rAd-E1A-CDglyTK与酶前体药物联合应用对卵巢癌SKOV3细胞具有显著的抑制作用,其效果优于重组复制缺陷型腺病毒rAd-CDglyTK。
- 周丽君李秋香李冬田曹阳李光明佟惠春
- 关键词:卵巢癌重组腺病毒自杀基因SKOV3细胞
- 肿瘤靶向性腺病毒载体研究进展被引量:1
- 2006年
- 近年来,腺病毒载体广泛应用于恶性肿瘤的靶向性基因治疗的研究。对传统腺病毒载体的改造策略主要包括:通过改造腺病毒的嗜性,构建感染靶向性腺病毒载体,如纤维嵌合型靶向性腺病毒载体和免疫靶向性腺病毒载体;在转录水平,控制外源基因的靶向表达或腺病毒基因组自身的靶向复制,即转录靶向性腺病毒载体和选择性裂解肿瘤细胞的条件复制型腺病毒载体。
- 周丽君李秋香
- 关键词:腺病毒肿瘤基因疗法
- 重组溶瘤腺病毒rAd-E1A-CDglyTK的构建和体内、外抑杀瘤作用的实验研究
- 由于腺病毒载体在基因治疗方面的诸多优势,现已被广泛应用于人类恶性肿瘤的基因治疗。本研究鉴于以重组复制缺陷型腺病毒治疗恶性肿瘤存在着靶向性差、目的基因表达持续时间短等缺点,将前期构建的含有大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶(EC-CD)...
- 周丽君
- 关键词:腺病毒载体
- 文献传递