吴阳升
- 作品数：23 被引量：89H指数：6
- 供职机构：新疆维吾尔自治区畜牧科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项新疆维吾尔自治区科技支疆项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 应用AML基因进行牛性别鉴定的研究被引量：1
- 2005年
- 本文以染色体牙釉蛋白基因(AML)对牛肌肉基因组进行性别鉴定,为应用此基因进行胚胎鉴定提供理论依据。本研究应用奶牛染色体牙釉蛋白基因的DNA序列,设计了牛染色体特异性引物P1和P2,并通过聚合酶链反应(PCR)扩增牛肌肉组织中的X和Y染色体上的牙釉蛋白基因内第五内含子。最后依据其分子量的差异对电泳后的性染色体所呈现的不同区带进行区分,从而达到性别鉴定的目的,具有很高的应用价值。
- 陈晓军罗淑萍吴阳升徐雪萍王新华
- 关键词：胚胎性别鉴定
- 谷胱甘肽(GSH)对绵羊细管冻精质量的影响被引量：8
- 2015年
- 研究了在绵羊冻精稀释液中添加不同浓度(0、1、2、2.5、3 mmol/L)的谷胱甘肽(GSH)对细管冻精质量及体外受精的影响。结果显示:在绵羊精子的冷冻稀释液中添加1 mmol/L GSH具有最好的效果,可以显著地增加冷冻解冻精子的活力以及精子质膜、顶体膜和DNA的完整性,还可以在一定程度上提高体外受精的卵裂率及囊胚率。
- 唐淑红林嘉鹏吴阳升汪立芹黄俊成
- 关键词：绵羊谷胱甘肽精液冷冻
- 绵羊血小板糖蛋白4基因(CD36)的克隆及在不同生长时期卵泡中的表达
- 2018年
- 【目的】血小板糖蛋白4基因(CD36)在模式动物中发挥着各种生物学功能,通过转录组数据分析,可能在绵羊卵泡发育中发挥重要作用。本研究获得了CD36基因及探究其在不同组织中表达情况,从而预测其在绵羊生长过程中可能发挥的生物学功能。【方法】实验采用PCR扩增方法获得阿勒泰羊TSP-1基因的CDS区全长,运用软件分析CD36基因的蛋白质序列及其功能区域,同时利用荧光定量PCR的方法检测5头1周岁阿勒泰羊7个组织及不同直径卵泡中的表达情况。【结果】CD36基因序列全长为1419 bp,共编码472个氨基酸,与预测序列相比完全一致。系统进化树分析表明绵羊与牛的遗传距离较近。CD36蛋白为脂溶性亲水蛋白,具有1个跨膜螺旋结构,在氨基酸1~20位存在以信号肽,存在8个N-糖基化和41个潜在的磷酸化位点,包括19个Ser,15个Thr和7个Tyr。检测不同组织和不同直径卵泡中CD36基因发现:CD36基因在绵羊7个组织中都有表达,心与肺和小卵泡中CD36表达量差异显著(P<0.05),在不同直径卵泡中总体表达量较低。【结论】CD36基因可能在绵羊卵泡发育中发挥重要作用。
- 李晓林吴阳升林嘉鹏汪立芹黄俊成贾斌CHEN Ying
- 关键词：绵羊卵泡
- 激素处理后绵羔羊和成年母羊卵巢颗粒细胞miRNA特征分析被引量：3
- 2018年
- 【目的】通过small RNA高通量测序技术,筛选绵羔羊和成年母羊差异表达miRNA,进一步挖掘和鉴定与卵泡发育相关的相关基因,揭示其性状差异的信号通路及分子调控网络。【方法】以绵羔羊和成年母羊颗粒细胞为研究对象,应用高通量测序技术进行small RNA文库构建,获得miRNA表达谱,鉴定差异表达miRNA,进而对这些差异表达miRNA及其靶基因进行功能注释、聚类分析及通路富集等。【结果】从2个样本miRNA库鉴定出238个已知miRNAs和79个新miRNAs。共获得9个差异miRNA,与成年羊相比,羔羊有4个miRNA上调,5个下调。其中,oar-miR-106a上调倍数最大(1. 85),oar-miR-10a下调最为显著(-2. 20)。对差异miRNAs进行GO富集和KEGG通路富集分析表明,新陈代谢途径富集的基因最多。利用qRT-PCR对5个随机挑选的miRNA进行验证,结果与测序数据一致,说明测序结果可靠。【结论】miRNAs可能在激素处理后对绵羊生殖生理中起着重要的作用,包括卵泡和卵母细胞的发育,颗粒细胞的增殖等。
- 林嘉鹏吴阳升吴阳升韩冰李晓林汪立芹刘明军
- 关键词：成年母羊MICRORNA卵泡
- 一种新的高效快速核酸恒温扩增方法——LAMP法被引量：31
- 2004年
- 介绍一种新式恒温核酸扩增方法LAMP(Loop -MediatedIsothermalAmplification)法 ,其原理是采用四条特异引物及一种具有链置换活性的DNA聚合酶 ,在 6 5℃左右对核酸进行扩增。短时间扩增效率可达到 10 9- 10 1 0 个拷贝。LAMP法具有高特异性、高效性、快速、廉价、易检测等特点。预计在临床诊断。
- 吴阳升罗淑萍
- 关键词：LAMPDNA聚合酶
- Mg2Al-Cl-LDH载体转染细胞的研究
- 2013年
- 为探讨Mg2Al-Cl-LDH颗粒作为基因转染载体的可能性以及最优的转染体系和转染时间,为后续的基因治疗、创面修复、转基因技术等试验打下基础,自制Mg2Al-Cl-LDH纳米颗粒,与增强型荧光蛋白质基因eGFP结合后,转染入细胞,观察转染后细胞表达的绿色荧光蛋白质,计算转染率。结果表明Mg2Al-Cl-LDH纳米颗粒直径在100 nm左右,结构为六边形。200μg/ml的纳米颗粒浓度下细胞活性为87%,达到500μg/ml时细胞活性快速降至44%;DNA与LDH的质量比为4/50时转染率达到11.17%,质量比为10/50时,转染效率为3.93%;DNA与LDH作用时间在15 min时转染率为6.93%,30 min时反而下降至4.8%;转染细胞培养24 h时转染率达到17.4%,72 h后下降至3.7%。纳米颗粒的分子较小,比较容易被细胞膜胞吞,并且Mg2Al-Cl-LDH纳米颗粒能有效地与eGFP质粒相结合;在DNA与LDH质量比4/50的情况下,结合能力最高;最佳结合时间为15 min;转染时间在48 h时效果最好。HEK 293T细胞对Mg2Al-Cl-LDH纳米颗粒的最优耐受浓度为200μg/ml;同样条件下C2C12细胞的转染效率比HEK 293T细胞的转染效率高。
- 刘莉林嘉鹏吴阳升汪立芹田永芝黄俊成
- 关键词：基因转染
- 绵羊AMH基因克隆与原核表达
- 为研究AMH基因对绵羊繁殖性能的影响,用RT-PCR技术进行了绵羊AMH基因的克隆及原核表达.获得了绵羊AMH基因cDNA全长1081bp,最大开放阅读框为1728bp,共编码575个氨基酸,N端有24个氨基酸的信号肽,...
- 蒋香菊吴阳升黄俊成
- 关键词：绵羊繁殖性能基因克隆原核表达
- 文献传递
- 绵羊凝血酶敏感因子1(TSP-1)基因的克隆及在不同生长时期卵泡中的表达
- 2018年
- 凝血酶敏感因子1(TSP-1)基因在模式动物中发挥着各种生物学功能,FSH诱导后羔羊TSP-1的表达显著下调,而成年羊在激素诱导前后则无显著变化。为探究TSP-1基因的序列结构及生物学功能,实验采用PCR扩增的方法获得阿勒泰羊TSP-1基因的CDS区全长,软件分析TSP-1基因的蛋白质序列及其功能区域,同时利用荧光定量PCR的方法检测5头1周岁阿勒泰羊10个组织中的表达情况。结果显示,TSP-1基因序列全长为3 519 bp,共编码1 172个氨基酸,与预测序列相比有2个无义突变。系统进化树分析表明绵羊与牛、野猪的遗传距离较近。TSP-1蛋白结构不稳定,不存在跨膜结构,有一个信号肽,可能存在6个N-糖基化位点、50个潜在O-糖基化位点以及44个潜在的磷酸化位点,与TSP-3蛋白含有2个长重复区、3个短重复区、6个C型Ga离子结合位点和一个N型Ga离子结合位点。TSP-1基因在阿勒泰羊7个组织中都有表达,随着卵泡直径的增大,TSP-1基因的表达也逐渐升高。试验结果推测TSP-1基因可能在绵羊卵泡发育中发挥重要作用。
- 李晓林陈莹吴阳升林嘉鹏汪立芹汪立芹黄俊成
- 关键词：绵羊卵泡
- IGF-Ι对绵羊冷冻精液质量的影响被引量：1
- 2015年
- 【目的】探讨冻精稀释液中添加类胰岛素生长因子-I(IGF-Ι)对绵羊冷冻精液质量的影响,明确最佳的IGF-Ι添加浓度,为提高绵羊冻精受精率和加速其品种改良奠定基础。【方法】以特克赛尔年轻种公羊的精液为试验材料,在冻精稀释液中添加不同浓度(0、50、100、150和250 ng/m L)的IGF-Ι,通过SYBR-14/PI双染法、低渗肿胀试验和吖啶橙(AO)染色法检测解冻精液在孵育0、1和2 h后的顶体完整性、质膜完整性和DNA完整性,并通过体外培养验证其体外受精效果。【结果】Ⅱ组(IGF-Ι添加浓度100 ng/m L)的冷冻精液解冻孵育0、1和2 h后,其精子顶体完整性呈逐渐下降趋势,但整体效果优于其他试验组;在精子质膜完整性和DNA完整性方面,也表现为Ⅱ组高于其他试验组,且孵育时间越短(1 h内),效果差异越明显,均显著高于对照组(P<0.05)。体外受精试验结果显示,5个试验组间的卵裂率和囊胚发育率均不存在显著差异(P>0.05),但以Ⅱ组的体外受精效果略优于其他试验组。【结论】绵羊冻精稀释液中添加IGF-I可有效增强精子活力,改善冻精存活率,维持顶体、质膜和DNA完整性,但要求绵羊冷冻精液须在解冻后1 h内完成相关操作。
- 林嘉鹏唐淑红吴阳升汪立芹黄俊成
- 关键词：绵羊冷冻精液稀释液DNA完整性
- PCR及LAMP法牛胚胎性别鉴定的应用研究
- 胚胎性别鉴定是胚胎工程技术的重要部分之一,对家畜育种、生产和遗传疾病的防治均有非常重要的意义.该论文为建立一种快速、可靠、易操作的牛胚胎性别鉴定方法做了以下探讨:1、选用牛Y染色体特异序列设计引物建立PCR牛胚胎性别鉴定...
- 吴阳升
- 关键词：性别鉴定
- 文献传递
