吴晓明
- 作品数:8 被引量:8H指数:2
- 供职机构:中南大学湘雅二医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- Shh基因转染大鼠骨髓间充质干细胞的实验研究
- 目的研究对大鼠MSC进行重组Shh基因修饰的可行性。为下一步基因与细胞联合干预心肌缺血大鼠模型做好准备。方法克隆Wistar大鼠Shh基因并测序鉴定。构建PCDNA3.1-Shh真核表达载体,采用密度梯度离心—贴壁培养法...
- 吴晓明杨进福谭志平唐滔张伟史进历忠逵
- 文献传递
- SHH转染骨髓间充质干细胞心肌移植后成活与分化被引量:2
- 2014年
- 目的探讨SHH基因转染骨髓间充质干细胞心肌移植后的成活和分化情况。方法采用密度梯度离心-贝占壁培养法获得Wistar大鼠间充质干细胞(MSC);克隆SHH基因并构建pcDNA3.1-SHH真核表达质粒,用电转法将SHH基因转染入MSC中并体外证实转染SHH基因mRNA和蛋白在MSC中表达。结扎大鼠前降支建立心肌梗死模型,g周后在心肌梗死区移植150斗l3×10/6个转染SHH基因的骨髓间充质干细胞(BMMSC)。于移植后第1、2、4,8周取心肌梗死区心肌组织标本进行免疫组化和电镜检测移植后转染细胞的存活和分化情况。结果基因测序和双切酶(EcoRI,BamhI)分别证实SHH基因克隆与PCDNA3.1-SHH重组真核表达载体构建成功。荧光定量PCR及Western—blot检测证实转染后MSC的SHH基因表达明显上升;免疫组化证实移植后1~8周心肌内均有干细胞存活,第4,8周电镜可见移植干细胞向心肌细胞方向分化。结论SHH基因转染骨髓间充质干细胞后外源性基因表达明显增高,转染SHH基因的骨髓间充质干细胞能够在移植受体心脏内较好的存活并分化。为缺血性心脏病的转基因细胞治疗进一步研究提供实验依据。
- 刘俊东唐滔吴晓明汤建华史进伍明杨进福
- 关键词:间质干细胞移植心脏移植
- 小儿原发先天性心脏肿瘤的外科治疗被引量:3
- 2016年
- 目的总结小儿原发性心脏肿瘤的外科治疗经验。方法回顾性分析2004年至2013年11例组织病理学诊断为原发性心脏肿瘤(除黏液瘤)患者的临床资料。结果确诊的11例患者年龄13d至4岁,平均(23±16)月,体重3.1~15.3(13±5.7)kg。术后组织病理检查结果:横纹肌瘤5例、纤维瘤3例、血管纤维瘤2例、纤维肉瘤1例。所有患儿均因各自相应的症状行肿瘤切除术。其中仅1例患儿因经济原因实施了肿瘤次全切除术(纤维血管瘤侵及主动脉根部,上腔静脉和窦房结)。该例患者两年后死于肿瘤进展。另1例患儿(心包纤维肉瘤),术后1年因肿瘤复发家属拒绝再次手术死亡。另9例患儿在2—9年的随访期间都处于良好状态。结论对于有症状的原发性心脏肿瘤患者,手术往往是不可避免的。小儿原发性心脏肿瘤的手术治疗具有良好的早期和远期结果。
- 夏礼范成铭吴晓明宋逢林
- MSCSHH心肌移植对大鼠心肌梗死后血管新生的作用机制研究被引量:2
- 2014年
- 目的 探讨Sonic hedgehog(SHH)基因转染骨髓间充质干细胞并移植大鼠心梗区后,血管新生的变化及作用机制.方法 以结扎法制作大鼠急性心肌梗死模型,并按随机数字表法分为5组(每组40只).分别在梗死周边部位移植BMMSCSHH(转染组)、等量的BMMSC(细胞组)、BMMSC和pcDNA3.1-Shh DNA的混合物(混合组)、单纯pcDNA3.1-Shh DNA质粒(基因组)、等容积的低糖DMEM培养基(对照组).移植后第1、2、4、8周每组分别取10只为标本,qPCR检测移植后各组间移植部位Ptc1、Gli-2、COUP-TFⅡ等SHH信号传导通路下游基因以及血管内皮生长因子(VEGF)、Ang-1促血管再生因子的表达差异.结果 移植后第7天,转染组移植部位SHH下游基因Ptc1、Gli-2、COUP-TFⅡ表达分别较对照组、细胞组、基因组、混合组上调(Ptc1:P<0.01,P<0.01,P<0.05,P<0.05; COUP-TF Ⅱ:P<0.01,P<0.01,P<0.05,P<0.05;Gli-2:P<0.01,P<0.01,P<0.05,P<0.05);转染组VEGF、Ang-1等促血管再生因子分别较对照组、细胞组、基因组表达上调(VEGF:P<0.01,P<0.05,P<0.05;Ang-1:P<0.01,P<0.05,P<0.05),而与混合组比较差异无统计学意义,但有表达上升的趋势(VEGF:P=0.147,Ang-1:P=0.15).而在后续第2、4、8周检测上述因子表达差异无统计学意义(P>0.05).结论 转染SHH基因后的骨髓间充质干细胞移植大鼠心梗区后通过上调其下游基因表达促进血管新生,其作用随时间的推移逐渐减弱.
- 夏礼唐滔伍明吴晓明周文武史进王文祥
- 关键词:间质干细胞心肌梗死心肌梗死心肌
- 先天性心脏病术后重症婴幼儿遭遇泛耐药鲍曼不动杆菌感染的治疗策略
- 目的 探讨先天性心脏病术后重症婴幼儿遭遇多重耐药(MDR)鲍曼不动杆菌感染的以抗生素选择为首的集束化治疗策略.方法 回顾分析近3年7例先心病术后重症婴幼儿肺部或血液感染MDR鲍曼不动杆菌的高危因素,抗生素的有效性选择及患...
- 陈金兰杨一峰赵天力吴晓明尹倪
- Shh基因转染大鼠骨髓间充质干细胞的可行性被引量:1
- 2012年
- 目的探讨SonicHedgehog(Shh)基因有效转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)的可行性。方法构建pcDNA3.1-Shh真核表达质粒,酶切和测序鉴定。密度梯度离心.贴壁培养法获取Wistar大鼠BMSC,电击穿孔法将pcDNA3.1-Shh、pcDNA3.1(-)空质粒和pmaxGFP报告质粒转染进BMSC,48h后Western印迹法检测Shh基因的表达情况。结果酶切和测序结果证实pcDNA3.1.Shh正确性。转染48h后,荧光显微镜可观察到绿色荧光蛋白(GFP)的表达,有40%以上的细胞发出绿色荧光。Western印迹法检测证实有Shh基因表达,而转染pcDNA3.1(-)空质粒的BBMSC未检测到表达。结论重组真核表达质粒pcDNA3.1-Shh转染大鼠BMSC后能有效表达Shh基因,为进一步Shh基因与细胞联合治疗大鼠心肌缺血模型提供了实验依据。
- 杨进福吴晓明唐滔谭志平张伟
- 关键词:基因间质干细胞基因疗法
- SHH基因转染BMMSC心肌移植对大鼠心肌梗死后血管新生的影响被引量:1
- 2013年
- 目的探讨SHH(Sonic hedgehog)基因转染的骨髓间充质干细胞(BMMSCSHH)移植对大鼠心肌梗死区移植部位血管再生的影响。方法密度梯度离心法及贴壁培养获得BMMSC后,电转染法将SHH基因转入骨髓间充质干细胞。以结扎法制备大鼠急性心肌梗死模型,将实验动物200只大鼠按随机数字表法分5组,每组40只;分别在梗死与正常交界部位移植BMMSCSHH(转染组)、等量的BMMSC(细胞组)、pcDNA3.1-ShhDNA(基因组)、BMMSC和pcDNA3.1-ShhDNA的混合物(混合组)、等容积的低糖DMEM培养基(对照组)。于移植后第8周取正常心肌与心肌梗死交界区组织标本行免疫组化染色标记血管,通过血管密度分析法分析各组间交界区血管密度差异。结果经CD34免疫组化染色后行血管密度分析显示:转染组(36.48±5.22)较对照组(16.71±3.41)血管密度增加(P〈0.01);较细胞组(29.46±2.27)、基因组(28.78±2.91)及混合组(29.55±4.55)血管密度增加(P〈0.05)。结论BMMSCSHH移植能有效表达目的基因、促进心肌梗死后血管新生,为缺血性心脏病的细胞转基因治疗提供理论依据。
- 杨曙光伍明唐滔吴晓明周文武宋逢林
- 关键词:反式激活因子类骨髓细胞间质干细胞移植心肌梗死
- shh基因转染大鼠骨髓间充质干细胞的实验研究
- 目的探讨Shh(Sonic Hedgehog)基因有效转染大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)的可行性。方法克隆Wistar大鼠Shh基因并测序鉴定。构建pcDNA3.1-Shh真核表达载体,采用密度梯度离心-贴壁培养法获取W...
- 吴晓明唐滔杨进福谭志平张伟
- 文献传递