吕海燕
- 作品数:12 被引量:2H指数:1
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- Cyr61真核表达载体构建及在人原代培养软骨细胞中的表达研究
- 2013年
- 目的通过体外原代培养获得人软骨细胞,将重组真核表达载体pcDNA3.1-cyr61转染人软骨细胞,探讨外源性cyr61在软骨细胞中的表达效应。方法应用机械分离联合胶原酶消化法,原代培养获得人软骨细胞,镜下观察及扫描电镜分析软骨细胞形态,Ⅱ型胶原(CollagenⅡ)免疫细胞化学及甲苯胺蓝染色鉴定软骨细胞表型;构建pcDNA3.1-cyr61真核表达载体,Fugene介导转染人软骨细胞,Western blot验证其表达效应;RT-PCR检测重组质粒转染后软骨细胞CollagenⅡ、聚集蛋白聚糖(Aggrecan)基因mRNA表达改变。结果Ⅱ型胶原免疫细胞化学、甲苯胺蓝染色及形态学分析证实原代培养获得的细胞为人软骨细胞;酶切与DNA测序显示pcDNA3.1-cyr61重组质粒成功构建,Western blot检测表明外源性cyr61重组质粒能有效表达于人原代软骨细胞,且目的蛋白cyr61表达水平较空白组细胞明显升高;cyr61重组质粒转染软骨细胞后其CollagenⅡ、AggrecanmRNA表达呈明显增高。结论 Cyr61蛋白在人原代培养软骨细胞中呈表达缺失,外源性cyr61基因能有效表达于人软骨细胞,并且能增加软骨细胞CollagenⅡ、Aggrecan基因的mRNA表达,为进一步利用cyr61基因修饰软骨细胞增强其生物学功能奠定基础。
- 朱敏潘伟波洪盾王晨汪志军范厉龙吕海燕
- 关键词:软骨细胞原代培养CYR61基因转染
- 倍它米松和确炎舒松对大鼠MSCs凋亡增值功能的影响
- 目的运用不同浓度倍他米松/确炎舒松干预MSCs,观察其对MSCs凋亡增值功能的影响。方法全骨髓贴壁法体外培养大鼠骨髓间充质干细胞,流式以及成骨、成脂方向诱导分化鉴定细胞。不同药物浓度干预细胞,观察其对MSCs形态以及增值...
- 姚灿郏舜杰吕海燕范历龙朱敏洪盾陈海啸
- 关键词:确炎舒松间充质干细胞凋亡
- 文献传递
- 倍它米松和确炎舒松对大鼠MSCs凋亡增值功能的影响
- 姚灿郏舜杰吕海燕范历龙朱敏洪盾陈海啸
- 甲强龙和强的松对大鼠MSCs凋亡增殖分化功能的影响
- 目的:运用不同浓度甲强龙和强的松干预MSCs,观察其对MSCs凋亡增殖分化功能的影响。方法:全骨髓贴壁法体外培养大鼠骨髓间充质干细胞,流式以及成骨、成脂方向诱导分化鉴定细胞。不同药物浓度干预细胞,观察其对MSCs形态以及...
- 郏舜杰姚灿吕海燕范历龙洪盾
- MMP-14基因外显子区单核苷酸多态性与脑梗死的相关性被引量:2
- 2014年
- 目的探讨汉族人群基质金属蛋白酶-14(matrix metalloproteinase-14,MMP-14)基因外显子区单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)与大动脉粥样硬化型脑梗死的相关性。方法应用酶联免疫吸附法测定574例大动脉粥样硬化型脑梗死患者和463名健康对照者的血清MMP-14水平,应用TaqMan探针法确定MMP-14基因rs1042704和rs2236307两个SNP位点的基因型。多因素Logistic回归分析脑梗死和MMP-14基因多态性及其他脑梗死危险因素的关系。结果MMP-14基因rs1042704位点基因型(χ2=0.593,P=0.441,1-β=0.195)和等位基因频率(χ2=0.580,P=0.447,1-β=0.192)分布在两组间是否有差异尚不能做出可靠结论。MMP-14基因rs2236307位点CT基因型(CT vs.TT,OR=0.705,95%CI:0.536~0.927,P=0.012)、CC基因型(CC vs.TT,OR=0.606,95%CI:0.420~0.873,P=0.007)在脑梗死组中的分布频率偏低。MMP-14基因rs2236307位点C等位基因频率在脑梗死组为37.46%,对照组为43.95%,两者比较差异具有统计学意义(χ2=8.986,P=0.003)。MMP-14血清水平在脑梗死组和对照组间差异有统计学意义(P=0.003),在MMP-14 rs2236307TT基因型群体高于CT、CC基因型群体,差异有统计学意义(P=0.000;P=0.009)。多因素Logistic回归分析显示MMP-14 rs2236307CT+CC基因型是脑梗死的保护因子(校正OR值为0.710)。结论MMP-14基因rs2236307多态性位点与脑梗死的发病相关,C等位基因可能是脑梗死的保护因子。rs1042704多态性位点与脑梗死无明确关系,其与缺血性脑血管病的关系有待进一步研究。
- 李彩金笑平朱敏王凤胡晓飞王皖芬李卫玲朱峰郑周吕海燕朱宗亚
- 关键词:脑梗死单核苷酸多态性
- MMP-14基因外显子区单核苷酸多态性与脑梗死的相关性
- 目的:探索我国浙江地区汉族人群基质金属蛋白酶-14(matrix metalloproteinase-14,MMP-14)基因外显子区单核苷酸多态性和大动脉粥样硬化型脑梗死的相关性.方法:收集大动脉粥样硬化型脑梗死患者5...
- 李彩吕海燕朱宗亚金笑平朱敏王凤胡晓飞王皖芬李卫玲朱峰郑周
- 关键词:脑梗死发病机制基因分型单核苷酸多态性
- 文献传递
- S100A4在大鼠卵巢切除骨质疏松模型中表达情况
- 目的研究S100A4钙结合蛋白在大鼠卵巢切除骨质疏松模型中各时间段表达情况。材料与方法选择健康4周龄的雌性SD大鼠36只,购买浙江省医学科学院,体重约为100±20g,随机分成2组,实验组为行双侧卵巢切除术(OVX组)2...
- 袁赤庭洪盾朱敏吕海燕陈利华
- 甲泼尼龙诱发小鼠骨质疏松模型的构建
- 目的探索野生型小鼠中引起GCOP的最低剂量和不引起疏松的最高剂量的甲泼尼龙给药时程和剂量。方法 ICR10周龄雄性小鼠分成生理盐水对照组,3mg/kg甲泼尼龙低剂量组和5mg/kg高剂量组,皮下注射,一周5次,每周称2次...
- 吕海燕吴希美范历龙郏舜杰姚灿洪盾陈海啸
- 关键词:股骨骨密度骨小梁
- 文献传递
- 甲强龙和强的松对大鼠MSCs凋亡增殖分化功能的影响
- 郏舜杰姚灿吕海燕范历龙朱敏洪盾陈海啸
- 甲强龙和强的松对大鼠MSCs凋亡增殖分化功能的影响
- 目的运用不同浓度甲强龙和强的松干预MSCs,观察其对MSCs凋亡增殖分化功能的影响。方法全骨髓贴壁法体外培养大鼠骨髓间充质干细胞,流式以及成骨、成脂方向诱导分化鉴定细胞。不同药物浓度干预细胞,观察其对MSCs形态以及凋亡...
- 郏舜杰姚灿吕海燕范历龙朱敏洪盾陈海啸
- 关键词:甲强龙间充质干细胞凋亡
- 文献传递