吕洋
- 作品数：14 被引量：16H指数：2
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生电子电信自动化与计算机技术机械工程更多>>
- 整合素αvβ3在SDF-1/CXCR4介导的脉络膜新生血管中的作用被引量：2
- 2018年
- 目的探讨内皮细胞表达的整合素αvβ3在基质细胞衍生因子-1(stromal derived factor-1,SDF-1)/趋势化因子受体4(chemokine receptor 4,CXCR4)调控脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)生成过程中的作用。方法 (1)体内动物实验:采用激光诱导C57BL/6J小鼠CNV模型,实验分为4组:单纯CNV组(对照组)、CNV后立即玻璃体内注射SDF-1组(SDF-1组)、CNV后立即玻璃体内注射SDF-1+CXCR4抑制剂AMD3100组(SDF-1+AMD3100组)和CNV后立即玻璃体内注射SDF-1+αvβ3抑制剂SB273005组(SDF-1+SB273005组)。实时定量PCR观察小鼠激光诱发CNV后1 d、3 d、5 d、7 d、10 d、14 d CXCR4和αvβ3的表达;免疫荧光染色观察4组处理后CNV局部及内皮细胞上αvβ3的表达;OCT观察4组处理后CNV中视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)层隆起高度。(2)体外细胞实验:Western blot检测正常对照组、Si-CXCR4敲减组和Si-NC模拟敲减组RF/6A细胞中CXCR4蛋白的表达,同时检测对照组、SDF-1组、SDF-1+AMD3100组、SDF-1+Si-NC组和SDF-1+Si-CXCR4组中整合素αvβ3蛋白的表达。Transwell检测正常对照组、SDF-1组、SDF-1+AMD3100组和SDF-1+SB273005组的细胞迁移能力。结果 (1)体内动物实验:实时定量PCR显示随着CNV诱导后时间的增加,CXCR4 mRNA和整合素亚基β3 mRNA表达开始增加,CXCR4 mRNA在CNV后3 d表达量最高(4.263±0.464),β3 mRNA在CNV后7 d表达量最高(3.678±0.364),随后开始下降。免疫荧光结果显示:SDF-1组β3荧光强度显著增加,β3/CD31比率也明显增加,显著高于CNV对照组(P<0.01);而SDF-1+AMD3100组和SDF-1+SB273005组β3荧光强度和β3/CD31比率显著减弱(P<0.05)。OCT显示SDF-1组RPE层的隆起明显升高(135.503±10.301)μm,显著高于CNV对照组(94.443±12.156)μm(P<0.05);而SDF-1+AMD3100组和SDF-1+SB273005组RPE隆起的高度显著降低(95.283±20.062)μm和(99.807±10.403)μm(P<0.05)。(2)体外细胞实验:SDF-1组和SDF-1+Si-NC组整合素亚基β3蛋白的表达均升高(1.301±0.043)、(
- 吕洋王雨生窦国睿李曼红常天芳孙嘉星徐文芹胡至察程子芳
- 关键词：脉络膜新生血管内皮细胞SDF-1/CXCR4整合素ΑVΒ3
- 整合素调节TGFβ的活化在新生血管发生发展中的作用
- 吕洋王雨生
- 骨髓来源细胞表达的基质金属蛋白酶在脉络膜新生血管发生发展中的作用
- 吕洋侯慧媛王雨生
- 论营养和生活方式对年龄相关性黄斑变性的影响
- 吕洋王雨生
- 遗传因素和自身免疫反应预测年龄相关性黄斑变性早期阶段
- 吕洋王雨生
- 高血糖对小鼠骨髓来源细胞参与脉络膜新生血管形成的体内动态观察被引量：1
- 2014年
- 背景 我们先前的研究提示高血糖可加重脉络膜新生血管（CNV）的严重程度,并有可能通过促进骨髓来源细胞（BMCs）的趋化参与血管发生,且已证实在体生物发光成像（BLI）技术能实时、活体观察CNV的动态变化,但糖尿病与CNV发生的关联性尚无明确的研究证据.目的 应用BLI技术并结合组织学研究方法,动态观察高血糖状态下BMCs参与CNV的形成过程. 方法 将荧光素酶-绿色荧光蛋白（FlucGFP）双转基因小鼠的BMCs移植至野生型C57BL/6J小鼠构建嵌合体,嵌合度＞85％的小鼠纳入实验并按照随机数字表法分为对照组和糖尿病组,每组9只.糖尿病组嵌合体小鼠采用腹腔内注射链脲佐菌素法[（STZ60 mg/（kg＆#183;d）,连续5d]建立糖尿病模型,血糖浓度＞15 mmol/L者视为建模成功,对照组不进行注射.2个组嵌合体小鼠均应用532 nm倍频激光视网膜光凝法诱导CNV形成.采用IVIS Kinetics小动物成像系统,分别于CNV模型建立后第1、3、5、7、14、21和28天对2个组小鼠进行BLI检测,动态观察CNV小鼠眼部发光信号.于CNV模型建立后第7天处死动物,制备视网膜脉络膜组织切片行苏木精-伊红染色,比较2个组小鼠CNV的长度和厚度.结果 流式缅胞仪分析显示,C57BL/6J小鼠行Fluc-GFP双转基因小鼠BMCs移植后28 d,纳入实验的嵌合体小鼠平均嵌合度为（88.85±2.46）％;糖尿病组嵌合体小鼠平均血糖浓度为（17.88±0.86） mmol/L.小鼠视网膜脉络膜组织病理学检查显示,CNV造模后第7天,新生血管穿过Bruch膜到达视网膜下腔,糖尿病组小鼠CNV长度为（338.67±33.17） μm,明显长于对照组小鼠的（180.33±24.68） μm,差异有统计学意义（t=8.943,P＜0.05）;2个组间小鼠CNV的厚度差异无统计学意义（t=1.790,P＞0.05）.CNV建模后第1天,两组小鼠眼部出现光学信号,第7天光学信号值均达最高,且糖尿病组明显强于对照组;第14天后两组小鼠眼部信号减弱.CNV建
- 王瑜王雨生曹丰张健吕洋王海燕药立波
- 关键词：高血糖药物诱导脉络膜新生血管骨髓来源细胞光凝
- SDF-1/CXCR4在新生血管疾病发生发展中的作用
- 吕洋王雨生
- 光学相干断层扫描血管造影诊断2型新生血管性黄斑病变
- 吕洋王雨生
- 脉络膜新生血管小鼠微小RNA对骨髓来源细胞表达基质金属蛋白酶的调控作用被引量：2
- 2015年
- 背景 基质金属蛋白酶-2（MMP-2）/MMP-13在脉络膜新生血管（CNV）生成过程中发挥重要作用,但CNV原位细胞中MMP-2/MMP-13的表达有限.骨髓来源细胞（BMCs）参与CNV生成,可能是CNV中MMP-2/MMP-13的重要来源,而微小RNA188-5p（miR188-5p）可能是调控BMCs表达MMP-2/MMP-13的关键节点. 目的 探讨参与CNV生成的BMCs表达MMP-2/MMP-13的情况及BMCs表达的MMP-2/MMP-13是否受miR188-5p调控.方法 将表达绿色荧光蛋白（GFP）的转基因雌性小鼠的骨髓细胞移植到野生型雌性C57BL/6J小鼠以建立C57BL/6J.GFP嵌合体小鼠模型,流式细胞术检测嵌合度大于85％的42只小鼠纳入实验作为实验组,未进行骨髓细胞移植的野生型雌性C57BL/6J小鼠作为对照组.两组小鼠均以视网膜激光光凝法诱导CNV,两个组分别于光凝前及光凝后第1、3、5、7、10、14、28天各取3只小鼠分离视网膜脉络膜组织,采用ELISA法检测小鼠视网膜脉络膜组织匀浆中MMP-2/MMP-13质量浓度的变化;采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测上述时间点小鼠视网膜脉络膜组织中miR188-5p mRNA的相对表达量变化;采用免疫荧光染色和原位杂交技术观察上述时间点小鼠CNV区GFP阳性细胞中MMP-2/MMP-13和miR188-5p的表达情况,并进行定量分析.结果 实验组C57BL/6J.GFP嵌合体模型小鼠外周血单核细胞中表达GFP细胞所占比例平均为（90.67＆#177;3.02）％,符合实验要求.ELISA检测显示,对照组与实验组小鼠视网膜脉络膜匀浆中MMP-2/MMP-13的表达趋势一致,总体比较差异均无统计学意义（MMP-2：F=0.060,P=0.810;MMP-13：F=0.012,P=0.915）.ELISA和免疫荧光均显示在诱导CNV后1d,实验组和对照组MMP-2表达均快速增加,3d时表达量最高,实验组占总表达量的64.21％,随后两组MMP-2表达均下降.两组MMP-13表达量在诱导CNV后1d缓慢增加,7d时表达量最高,实验组占总表达量的79.61％,随后MMP-13总体表达下降.靶基因预测结果可显示MMP-2�
- 吕洋侯慧媛王雨生
- 关键词：脉络膜新生血管基质金属蛋白酶骨髓细胞微小RNA
- miRNA在脉络膜新生血管发生发展中的作用研究进展被引量：12
- 2015年
- 脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)见于多种眼部疾病,是引起视力障碍的重要原因之一。近期多项研究表明,miRNA在CNV的发生发展中起着重要作用。miRNA可参与新生血管形成的多个步骤,通过特异性调控多种靶蛋白的水平,与多种细胞、细胞因子及信号通路发生交互作用。因此,揭示miRNA在CNV发病中的作用及其机制,是未来CNV发病机制研究的重要方向,并可为CNV的防治提供新的思路。脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)可发生于多种眼部疾病,如年龄相关性黄斑变性、中心性渗出性脉络膜视网膜病变、高度近视、外伤性脉络膜破裂等,是引起视力损害的重要原因之一[1-2]。CNV的发病机制目前尚未完全明确,但众多研究已证实多种细胞、生长因子和细胞外基质共同构成CNV局部的微环境,通过细胞、因子及信号通路之间的交互作用对CNV的生成进行调控[3]。大量研究表明,miRNA也参与调控CNV的发生。深入研究miRNA在CNV中的作用,有助于理解CNV的发病机制,为CNV的治疗提供新的靶点。
- 吕洋侯慧媛王雨生
- 关键词：脉络膜新生血管MIRNA血管内皮生长因子
