公共文化服务平台

卢赫: 作品数：11 被引量：30H指数：3; 供职机构：辽宁医学院畜牧兽医学院更多>>; 发文基金：辽宁省教育厅高等学校科学研究项目辽宁省科学技术计划项目辽宁省“百千万人才工程”资助项目更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生更多>>

合作作者

猪繁殖障碍性疫病常见病毒多重PCR诊断方法的建立及初步应用被引量：6: 2016年; 根据GenBank登录的猪细小病毒病(PPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒病2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒欧洲分离株LV(PRRSLV)和美洲分离株VR(PRRSVR)等5种病毒基因序列设计合成5对特异性引物。通过优化反应条件,建立了同时检测5种病毒混合感染的多重PCR方法,对其特异性、敏感性、重复性进行检测;并将其应用于临床病料检验。结果显示:多重PCR方法中,当PPV、PRV、PCV2、PRRSVR和PRRSLV引物浓度为1.0、0.5、0.5、1.5、1.5μmol/L、退火温度为60℃时,扩增效果最佳,其扩增出特异性目的片段分别为142、331、547、705、1 367bp,最低检测量分别为155、45.2、17.2、14.2、43.6pg,在不同时间对相同样本重复检验6次,结果一致;对临床收集的125份疑似猪病料样品进行多重PCR技术和单一PCR技术进行对比检测,总符合率在97.9%以上,PPV、PRV、PCV2、PRRSLV和PRRSVR的阳性率分别为31.20%、36.8%、34.4%、1.6%和40.8%,混合感染率分别为16.8%、28.8%、23.2%、1.6%和30.4%。结果表明:本试验建立的多重PCR方法具有敏感性高、特异性强、稳定性好,可检测PPV、PRV、PCV2、PRRSVR和PRRSLV的混合感染。; 关男卢赫费东亮王书全; 关键词：猪繁殖障碍性疾病多重PCR

辽宁省部分地区鸡源大肠杆菌种系分类群及分子多态性分析: 2014年; 为了解鸡源大肠杆菌不同种系的发育群及其分子上的多态性,本试验应用种系分类群鉴定与随机扩增多态性(RAPD)的方法对采自辽宁省4个市的26株鸡大肠杆菌进行了不同种系发育群的鉴定以及分型研究,种系分类群方法将26株大肠杆菌分为4种发育群,其中,A群13株、B1群3株、B2群8株、D群2株。在RAPD中从6条随机引物中筛选出2条能在26株大肠杆菌中具有较好多态性扩增的随机引物,共扩增出7条DNA片段,菌株HLD6、G2、G5、HLD3、HLD4、G7和G11遗传关系密切,菌株G22与其他25株大肠杆菌遗传关系较远。; 冯方周郭宏艳卢赫张晓冬李冰; 关键词：大肠杆菌多态性分析

猪输血传播病毒Ⅰ型与Ⅱ型双重PCR方法的建立与应用: 验建立了一种猪输血传播病毒Ⅰ型和Ⅱ型(Porcine torque teno virusⅠand Por-cine torque teno virusⅡ,PTTVⅠand PTTVⅡ)的双重PCR检测方法,根据GenBa...; 卢赫李冰关男冯方周张晓冬; 关键词：PCR检测特异性引物扩增产物

欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒辽宁分离株全基因测序与遗传演化分析被引量：9: 2015年; 为了研究欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)辽宁分离株的遗传变异情况及分子生物学特征,根据欧洲型PRRSV标准毒株LV设计15对引物,对LNEU12毒株全基因分段进行扩增并测序,将测序结果依次拼接得到病毒的全基因,然后进行序列的比对分析。结果表明:LNEU12毒株基因全长为15 398 nt(不含3'尾端序列),与LV毒株同源性为90.1%,其中NSP2和ORF3/4重叠区域缺失21 nt,ORF6、ORF7较为保守。根据基因变异特点和遗传进化亲缘关系推测LNEU12辽宁分离株为欧洲型PRRSV变异毒株。; 李冰高慎阳卢赫冯方周丁壮; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒遗传进化分析

欧洲型PRRSV N蛋白特异性抗原表位基因串联表达及其产物的纯化被引量：3: 2015年; 采用SOE-PCR方法将编码欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)N蛋白的aa2~12和aa40~46核苷酸片段进行重复串联,获得编码双表位重复串联基因NE,构建表达载体pGEX-4T-1-NE,将其转入BL21(DE3)pLysS菌中,获得融合蛋白。Western-blot检测结果表明,该融合蛋白可被欧洲型PRRSV阳性血清识别,而不能被美洲型PRRSV阳性血清、猪瘟病毒阳性血清和伪狂犬病病毒阳性血清识别。纯化所得的融合蛋白,为建立检测欧洲型PRRSV提供了抗原基础。; 李冰唐峰卢赫冯方周丁壮; 关键词：N蛋白原核表达纯化

鸡大肠杆菌宽谱噬菌体的分离及裂解性研究被引量：2: 2016年; 为了解鸡宽谱大肠杆菌噬菌体的裂解特性,本试验以30株大肠杆菌为宿主菌,从8份粪便中成功分离出5个噬菌体,并从中筛选出1个强裂解性宽谱大肠杆菌噬菌体,命名为Z-SN5,宽噬率为70%,热稳定性相对良好,60℃作用1 h,尚有活性;耐碱性强于耐酸性,在pH值=7时活性最高,经PCR鉴定后,成功扩增出目的基因片段。本试验为今后研究噬菌体治疗鸡大肠杆菌病奠定基础。; 张晓冬李冰汲晨卢赫冯方周; 关键词：大肠杆菌

猪繁殖与呼吸综合征3种毒株多重PCR检测方法的建立被引量：9: 2016年; 根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因序列设计2对特异性引物,第1对通用引物扩增美洲型经典毒株和变异毒株Nsp2基因(466bp/376bp),第2对引物特异性扩增欧洲型毒株ORF7基因(580bp)。反应条件优化后,建立了能够同时检测美洲型经典毒株、美洲型变异毒株和欧洲型毒株的多重PCR检测方法。该方法可以特异性扩增3种毒株的基因,目的基因片段大小差异在90bp以上便于电泳观察,重组质粒标准品检测下限为1.93×103拷贝。应用该方法检测183份临床疑似病例,结果 PRRSV阳性35份,其中美洲型经典株2份,美洲型变异株31份,欧洲型毒株3份,美洲型变异株和欧洲型毒株混合感染1份。表明建立的多重PCR检测方法具有快速、准确、敏感等优点,对PRRSV 3种毒株的快速诊断有十分重要的意义。; 李冰刘丽颖卢赫韩杰蒋红周子涛高慎阳周铁忠; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒多重PCR

杂交野猪猪繁殖与呼吸综合征病毒分离及其ORF6、ORF7基因的序列分析: 2014年; 试验旨在研究杂交野猪猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)辽宁分离株的遗传变异情况及分子生物学特征。用Marc-145细胞从辽宁某杂交野猪场疑似猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)病猪血液中分离到1株病毒,该分离毒株经Marc-145细胞6次传代后出现稳定的细胞病变,采用RT-PCR方法对分离病毒进行ORF6和ORF7基因的扩增、克隆和测序,并与已知序列毒株的相应片段进行同源性比对。结果表明,分离毒株的ORF6、ORF7基因与国内外美洲型毒株的核苷酸同源性分别为96.0%~100.0%、94.5%~99.4%;氨基酸同源性分别为89.6%~100.0%、87.3%~98.7%;与欧洲型代表毒株LV的ORF6、ORF7基因差异较大,核苷酸同源性分别为70.4%、70.1%,氨基酸同源性分别为48.8%、49.7%。推测辽宁杂交野猪体内分离毒株在基因型上属于美洲型毒株。; 李冰卢赫冯方周丁壮; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒杂交野猪

猪输血传播病毒1型与2型双重PCR方法的建立与应用: 了一种猪输血传播病毒(PTTV)1型和2型的双重PCR检测方法,根据GenBank中PTTV1型和PTTV2型基因序列设计了2对特异性引物,扩增产物大小分别为1677bp和469bp,经试验条件的优化,建立了检测PTTV...; 卢赫李冰关男冯方周张晓冬; 关键词：病毒检测聚合酶链式反应阳性率

猪肝脓肿型疾病的病原分离鉴定被引量：2: 2015年; 2012年6月-2013年8月,锦州地区部分猪场饲养的幼龄猪出现以肝脓肿为主要特征的疾病.发病主要特征为：5070日龄仔猪发病,生长缓慢,饮食正常,体温正常或略有升高,关节肿大,便秘与腹泻交替出现,病程1520 d,发病率为2％5％,病死率为33.3％71.4％.发病猪肝脏均出现直径为0.52 cm的脓肿,脓肿突出肝表面,呈灰白色,肺部斑点状出血,心冠脂肪出血,小肠黏膜轻度充血,关节腔积液,液体浑浊,其他器官变化不明显.为了明确发病原因,从而进行有效防治,我们对脓肿病变中的病原体进行了分离鉴定.; 李冰冯方周于迪卢赫刘孝刚; 关键词：病原分离鉴定猪肝脏脓肿疾病关节肿大

卢赫

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

卢赫

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈