刘青华
- 作品数：7 被引量：51H指数：3
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- 腰椎后路减压内固定融合术治疗退行性腰椎管狭窄症177例疗效分析被引量：32
- 2013年
- 目的评价腰椎后路减压内固定融合术(PLIF)治疗退行性腰椎管狭窄症(DLSS)的临床效果,并分析腰椎内固定融合术对邻近节段退变的可能影响因素。方法对行PLIF的177例DLSS患者的随访资料进行回顾性分析,随访时间24～103个月。采用JOA下腰痛治疗评价标准、ODI功能障碍指数、VAS评价表、Henderson疗效标准观察手术疗效,并通过UCLA及Pearce分级标准分析术后邻近节段退变(ASD)的危险因素。结果 (1)177例患者术前JOA评分(4.1±1.127)分,术后(12.7±1.495)分,术后平均改善指数为(8.6±0.2)分,平均改善率为(79±1)%;术前ODI指数(54.86±15.87)%,术后(19.36±8.98)%,术后平均改善指数为(35.50±1)%,平均改善率为(64.71±1)%;术前VAS评分(6.4±0.2)分,术后(2.1±0.2)分,术后平均改善指数为(5.15±0.2)分;Henderson疗效标准:177例患者中优148例(83.61%),良21例(11.86%),可5例(2.82%),差4例(2.26%),优良率达95.47%。术后较术前明显改善,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)术后邻近节段退变ASD的发生与患者年龄、性别无显著相关,与术前是否存在邻近椎间盘退变显著相关,且融合节段越多,其术后ASD退变程度越高。结论 PLIF是治疗DLSS的有效方法,术后ASD的发生与患者年龄、性别无显著关系,与术前邻近椎间盘是否存在退变呈显著相关,即术前邻近椎间盘退变是ASD的可能危险因素。
- 周勇刘章盛刘青华徐绘华梁俊波郭奇峰
- 关键词：腰椎管狭窄椎管减压内固定邻近节段退变
- 成人骨髓间充质干细胞的体外分离培养与鉴定被引量：10
- 2010年
- 目的对成人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）进行体外分离培养与鉴定，研究其生物学特性。方法将密度梯度离心法获得的单个核细胞，用贴壁培养法分离纯化、扩增获得大量hBMSCs，观察细胞形态，分析细胞生长特性，并经流式细胞仪检测细胞表面抗原、细胞周期，和进行成骨诱导鉴定。结果经密度梯度离心和贴壁培养法可成功分离纯化、扩增得到大量hBMSCs，其细胞形态、分化特性和表型均符合干细胞特点，在特定培养条件下能向成骨细胞分化。结论骨髓间充质干细胞分离扩增容易，细胞增殖能力和成骨性能好，是骨组织工程理想的种子细胞。
- 郭奇峰刘青华徐绘华向帅梁俊波温世锋
- 关键词：骨髓间充质干细胞种子细胞组织工程骨
- 成骨诱导双基因共表达腺病毒载体的构建被引量：2
- 2011年
- 目的探讨用一条Link序列T2A连接骨形态发生蛋白-2（BMP-2）基因与碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）基因构建含目的基因的腺病毒载体的可行性。方法先从cDNA中扩增得到全长BMP-2和bFGF基因片段．再接于Link序列T2A的两端，通过T2APeptide的互补，延伸得到BMP2-T2A—bFGF的全长PCR产物，利用上游引物的BglⅡ酶切位点和下游引物的EcoRV酶切位点将其插入到pShuttle—IRES载体中，酶切、测序鉴定；利用同源重组技术将目的基因表达框从穿梭质粒转移到腺病毒载体，鉴定阳性克隆；将PacI线性化后的腺病毒载体转染到293A细胞，观察GFP表达，PCR鉴定后进行大量扩增，并用CsCl梯度离心法进行纯化；测量A260计算病毒感染滴度。结果克隆得到的BMP-2与bFGF基因测序正确，经BglⅡ和EcoRV双酶切得到的BMP2-bFGF2个基因全长序列完全克隆到穿梭质粒和重组腺病毒载体质粒中；转染293A细胞2周后观察到明显的GFP聚集表达，即病毒包装成功，扩增纯化后滴度为3．6×10^11 VP／ml。结论经酶切鉴定BMP-2与bFGF双基因共表达腺病毒载体构建成功。
- 徐绘华郭奇峰厉新妍刘青华向帅娄盼
- 关键词：骨形态发生蛋白-2碱性成纤维细胞生长因子双基因共表达腺病毒
- 构建椎体后凸成形术新型骨填充材料的相关研究
- 背景：随着全球人口的日益老龄化，老年骨质疏松症越来越受到关注，是老年人常见病、多发病，临床表现为疼痛、身长缩短、驼背、骨折、呼吸功能下降等，据估计我国目前有骨质疏松症患者90百余万，2015年将达110百万。骨量减少，骨...
- 刘青华
- 关键词：磷酸钙骨水泥细胞相容性骨组织工程骨形态发生蛋白椎体压缩骨折
- 文献传递
- 钌（Ⅱ）多吡啶配合物诱导骨肉瘤细胞凋亡及其机制被引量：1
- 2013年
- 目的研究钌（U）多吡啶配合物[Ru（dmb）2（DBHIP）]（C104）2对人骨肉瘤MG-63细胞凋亡的诱导作用及机制。方法在培养液体系中加入不同浓度的钌（Ⅱ）多吡啶配合物对骨肉瘤MG-63细胞进行诱导，以CCK-8计数法测细胞生长曲线、细胞集落形成法观察细胞生长抑制情况，流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡情况，Hoeehst-33258染色观察细胞核的形态变化。结果发现（6．25-100）μmol／L钌（Ⅱ）多吡啶配合物均能不同程度抑制骨肉瘤细胞增殖，其半数致死浓度（LD50）为（66．10±0．228）μmol／L，对骨肉瘤细胞生长有抑制作用呈时间和剂量依赖关系，作用96h后最高抑制率达80．2％。50．0、25．0、12．5μmol／L钌（Ⅱ）多吡啶配合物作用于细胞24h后的凋亡率分别为（71．43±9．99）％、（57．634±2．78）％、（24．07±3．83）％，与对照组（3．30±0．33）％比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；流式检测药物作用后的骨肉瘤细胞，呈现G1／G0期阻滞，并呈剂量依赖效应，浓度越高细胞处在G1／G0期的比例越高。药物处理后的细胞经Hoechst-33258染色，细胞核出现浓染致密的固缩形态和颗粒状荧光。结论钌（Ⅱ）多吡啶配合物能够诱导人骨肉瘤细胞发生凋亡，呈现G1／G0期阻滞，与时间、剂量正相关。
- 周勇赵建华刘四红徐绘华刘青华伍勇郭奇峰
- 关键词：骨肉瘤细胞细胞凋亡
- 重组腺病毒体外诱导山羊骨髓间充质干细胞成骨分化的研究被引量：6
- 2013年
- 目的探讨腺病毒介导骨形态发生蛋白2（BMtr2）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）双基因体外转染山羊骨髓间充质干细胞（BMSCs）后目的基因表达与诱导成骨情况。方法从2岁健康雌性山羊髂骨处骨穿抽取骨髓2ml，利用密度梯度离心法分离培养山羊BMSCs，将前期构建好的腺病毒载体Ad—BMP2一bFGF、Ad—BMP2分2组，以MOI=5000分别转染BMSCs，每2d用ELISA法检测BMP2和bFGF的表达情况，每周用ALP染色试剂盒及定量试剂盒检测ALP表达情况。结果Ad—BMP2-bFGF转染BMSCs48h后，目的蛋白已有显著表达（BMP2为3996．22pg／ml、bFGF为1352．15pg／m1），第6天达到高峰（BMP2为5146．63Pg／ml、bFGF为1434．75Pg／m1），与未转染组比较差异有统计学意义（P〈0．05），3周后细胞呈现明显的成骨改变,All。P活性明显增高（266mol／L），Ad—BMP2-bFGF组ALP表达量约为Ad—BMP2组的1．5倍（P〈0．05）。结论经Ad—BMP2-bFGF转染的BMSCs具有持续高水平目的蛋白表达活性，转染后的BMSCs表现出明显的成骨活性．成骨活性明显强于Ad—BMP2组。
- 严瀚徐绘华郭奇峰刘青华刘四红娄盼梅勇
- 关键词：重组腺病毒骨形态发生蛋白2碱性成纤维细胞生长因子骨髓间充质干细胞
- 新型钌（Ⅱ）配合物抑制骨肉瘤MG-63细胞增殖并诱导其凋亡被引量：3
- 2013年
- 【摘要】目的通过体外实验探讨新型钌（Ⅱ）多吡啶配合物△-[Ru（phen）2MCMIP]2＋（△-1）对人骨肉瘤细胞MG-63株增殖及凋亡作用。方法CCK-8法检测经0．00、12．50、25．00、50．00、100．00、150．00Ixmol／LA-1作用24、48、72h后，MG-63细胞的增殖情况；流式细胞术检测经0．00、25．00、50．00、100．00μmol／LA-1作用24h后，MG-63细胞的凋亡及周期变化。结果A．1可明显抑制人骨肉瘤MG-63细胞增殖，并呈明显剂量和时间依赖性；24、48、72hICs0分别为57．80μmol／L、45．27Ixmol／L、32．51μmol／L；流式细胞术检测得不同浓度△-1作用24h后，细胞早期凋亡比例从（1．06±0．12）％上升至（37．10±1．25）％，细胞周期被阻滞在G0／G1期。结论Δ-1能抑制MG-63细胞增殖，诱导细胞凋亡，并将细胞周期阻滞在G0／Gl期。
- 容智敏郭奇峰刘四红刘青华徐绘华
- 关键词：MG-63细胞增殖细胞周期
