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排序方式：

牙龈卟啉单胞菌prtH基因水解活性区域的表达: 2007年; 目的克隆、表达牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)prtH蛋白水解酶活性结构域(prtHN),制备多克隆抗体,检测其特异性。方法采用Generunner软件分析prtH蛋白水解酶活性结构域prtHN片断,PCR扩增prtHN片段并进行DNA序列测定;构建原核表达质粒pQE30-prtHN,E.coliJM109表达prtHN重组蛋白,镍亲和柱纯化,SDS-PAGE分析鉴定;以兔抗P.g菌体抗体和抗膜泡抗体进行Westernblot分析重组蛋白免疫原性。制备兔抗prtHN多克隆抗体,不同菌种牙周致病菌Westernblot检测抗体特异性。结果克隆重组基因测序结果与GenBank中P.gingivalisRgpA蛋白酶的基因序列U15282一致。SDS-PAGE显示,IPTG诱导的E.coliJM109(pQE30-prtHN)以包涵体形式表达14KDa的重组蛋白。Westernblot检测证实其具有免疫原性。所制备的兔抗prtHN多克隆抗体具有特异性。结论成功克隆,原核表达的prtHN蛋白具有免疫原性。prtHN蛋白的多克隆抗体具有菌种反应特异性。; 刘锐杨圣辉刘洁董小平; 关键词：基因克隆免疫原性

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刘洁