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一种改良的云杉针叶总RNA提取方法被引量：5: 2014年; 云杉(Picea)是一种重要的绿化和用材树种。根据云杉的特点,本研究提出了改良的云杉RNA提取方法即SDS酚-LiCl法,以不同种云杉(青杄,白杄和红皮)的针叶为试验材料,采用TRIzol法、CTAB法、改进的SDS酚法和SDS酚-LiCl法提取RNA,并进行了质量验证。结果表明:TRIzol法不能提取云杉针叶总RNA;CTAB法和改进的SDS酚法提取的RNA质量少,并存在不同程度的多糖、多酚和DNA污染。SDS酚-LiCl法适当增加了提取液中SDS、PVP以及β-巯基乙醇的浓度,结合酸性条件、高盐溶液(3 mol/L NaAc)和LiCl等减少DNA、多糖污染的步骤,最终提取的RNA质量好、得率高。进一步反转录后,利用特异引物进行扩增验证,发现扩增的片段条带清晰,得率高,片段大小符合预期。研究结果表明,SDS酚-LiCl法可以较好的提取云杉RNA并进行后续的基因表达及转录组研究,为推动云杉在转录水平上的研究奠定了基础。; 刘洁江静怡徐吉臣; 关键词：云杉 RNA 多糖多酚

不同草地早熟禾品种愈伤组织再生体系研究被引量：4: 2012年; 草地早熟禾(Poa pratensisL.)是一种复杂的多倍体植物且具有兼性无融合生殖方式,建立高效的愈伤组织培养体系是进行基因工程育种的重要环节。本研究利用生产中常用的6个草地早熟禾品种为材料,经愈伤组织诱导后,对其愈伤组织分化及再生体系进行了研究。结果发现,不同草地早熟禾品种的分化再生能力具有明显的差异,不同激素处理组合对草地早熟禾愈伤组织的分化有显著的影响:品种如"帝王"、"超级伊克利"、"蓝鸟"等较易分化和再生,品种如"盛宴"、"布鲁克"等则只在特定条件下分化和再生;培养基激素处理组合Ⅴ(2mg/L6-BA+0.1mg/L2,4-D)较适合于所有检测的品种,处理组合Ⅳ(2mg/L6-BA)和Ⅵ(2mg/L6-BA+0.2mg/L2,4-D)对部分品种的分化有较大的促进作用。研究同时评估了2种激素配比(6-BA和2,4-D)对早地早熟禾愈伤分化再生的影响,发现不同草坪草品种对单独使用的6-BA浓度敏感性不同,补加2,4-D后不同品种的分化率也存在明显差异。研究建立的不同草地早熟禾品种的高效再生体系,不仅有利于这些品种的基因工程改造,也为草地早熟禾愈伤组织再生体系研究奠定了重要的理论基础。; 雷炳琪代亮柳玉霞刘洁徐筱徐倩徐吉臣; 关键词：草地早熟禾

12个草地早熟禾品种愈伤组织诱导体系的研究被引量：4: 2012年; 以生产中常见的12种草地早熟禾(Poa pratensis L.)成熟种子为外植体,对其愈伤组织诱导及愈伤组织增殖生长体系进行了优化试验.结果表明,在愈伤组织诱导试验中,单纯使用2,4-D时,不同品种愈伤组织诱导率在60%～93%之间,2,4-D质量浓度3 mg/L时12个早熟禾品种的愈伤组织诱导率均值最高,达到86%;在2,4-D基础上添加少量6-BA(0.1～0.2 mg/L)后,不同品种愈伤组织诱导率在30%～92%之间,12个品种的愈伤组织诱导率均值有所降低(3.1%～25.4%).在愈伤组织增殖试验中,单纯使用2,4-D时,不同品种愈伤组织增殖率在38%～164%之间,12个早熟禾品种的愈伤组织增殖率均值在3 mg/L 2,4-D时最高,达到81%;在3 mg/L 2,4-D基础上施加少量的6-BA(0.05～0.2 mg/L)后,愈伤组织增殖率均值有所降低,但存在品种的差异性.研究结果还显示,热激处理对部分草地早熟禾愈伤组织诱导及增殖有一定的促进作用.; 代亮柳玉霞刘洁李昊阳王晓桐徐吉臣; 关键词：草地早熟禾愈伤组织诱导增殖率

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刘洁