刘婉君
- 作品数：4 被引量：2H指数：2
- 供职机构：暨南大学生命科学技术学院生殖免疫研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 酪蛋白激酶Ⅰα在肺癌中的表达及其意义被引量：2
- 2010年
- 目的检测酪蛋白激酶Ⅰα(casein kinase1α,CK1α)在正常肺组织、肺腺癌组织、肺鳞癌组织和小细胞肺癌组织中的表达并分析其病理意义。方法采用组织芯片技术和免疫组织化学SP法检测104例肺癌组织和12例远端正常肺组织CK1α蛋白的表达;RT-PCR法检测30例新鲜肺癌组织及配对远端正常肺组织CK1αmRNA的表达。结果 CK1α蛋白主要表达于细胞质,在远端正常肺组织、肺腺癌组织、肺鳞癌组织和小细胞肺癌组织中的阳性表达率依次降低,分别为100%(12/12)、85.7%(30/35)、68.3%(41/60)、11.1%(1/9),4组间差异有显著性(P<0.001);在高、中、低分化程度的肺腺癌和肺鳞癌组织中,CK1α蛋白的阳性表达率分别为100%(10/10)、76.9%(50/65)和55%(11/20),3组间差异有显著性(P<0.005);CK1α在肺癌组织及配对远端正常肺组织的mRNA产物以转录变异体CK1αS为主,且其在46.7%(14/30)的肺癌组织中低表达。结论 CK1α在部分肺癌组织中低表达,且与肺癌组织学类型及肺癌组织分化程度密切相关。
- 邹飞雁李俐娟姜少杰刘婉君刘晓刘兰兰
- 关键词：肺癌组织芯片免疫组织化学法RT-PCR
- 人CSNK1A1基因两种转录变异体CK1αLS与CK1αS在细胞株中的表达
- 2011年
- 目的:分析CSNK1A1基因两种转录变异体CK1αLS和CK1αS在人正常细胞株和人肿瘤细胞株中的表达及在肿瘤发生发展中的作用。方法:RT-PCR法半定量检测不同细胞株中CSNK1A1基因的CK1αLS与CK1αS的mRNA表达水平。结果:36个细胞株中有32个细胞株存在CK1αLS与CK1αS的表达差异。在胚肾细胞293A、2株肺纤维细胞(MRC-5与HLF)、2株肺腺癌细胞(A549与SPC-A1)、巨细胞肺癌细胞HLAmp、小细胞肺癌细胞H446、鼻咽高分化鳞癌细胞CNE1、胃癌细胞SGC7901、骨肉瘤细胞MG-63以及3株白血病细胞(HL60、MOLT-4与Daudi)中,CK1αLS比CK1αS mRNA表达量少(P<0.05);而在肺泡细胞癌细胞H1650、肺鳞癌细胞L78、大细胞肺癌细胞H460、鼻咽低分化鳞癌细胞CNE2、3株乳腺癌细胞(Bcap-37、MDA-MB-435S与MCF-7)、2株胰腺癌细胞(BxPC-3与Panc-1)、肝细胞L02、肝癌细胞HepG2、胃上皮细胞GES-1、胃癌细胞MGC-803、结肠腺癌细胞SW620、前列腺癌细胞DU145、宫颈癌细胞Hela、卵巢癌细胞HO8910、纤维肉瘤细胞HT1080、神经胶质瘤细胞U251、脐静脉内皮细胞ECV304,CK1αLS比CK1αS mRNA表达量多(P<0.05)。胰腺癌细胞Panc-1高表达CK1αLS,低表达CK1αS;胃癌细胞SGC7901低表达CK1αLS,高表达CK1αS;结肠腺癌细胞SW620 CK1αLS与CK1αS两者表达较低;肺泡细胞癌细胞H1650 CK1αLS与CK1αS两者表达较高。结论:CK1αLS和CK1αS的mRNA表达存在差异,可能与肿瘤细胞的来源和分化程度有关。
- 邹飞雁刘婉君刘晓刘卫海曹佐武刘兰兰姜少杰
- 关键词：信使RNA逆转录多聚酶链式反应
- 靶向CK1α基因shRNA表达载体的构建及其对A549细胞增殖的影响被引量：2
- 2010年
- 通过RNA干扰实验沉默酪蛋白激酶1α(Casein Kinase1α,CK1α)基因,探讨其对肺癌细胞A549生长增殖的影响.首先构建3个针对CK1α基因不同位点的短发夹表达载体pGenesil-CK1α-S1、pGenesil-CK1α-S2、pGen-esil-CK1α-S3和一个无义错配载体pGenesil-NK,分别转染A549细胞,用G418筛选出阳性克隆,得到A549-S1、A549-S2、A549-S3及A549-NK细胞株.再通过RT-PCR和W estern b lotting方法,分别检测了CK1α基因的mRNA和蛋白的表达情况.比对A549-NK,A549-S1、A549-S2及A549-S3 mRNA水平的抑制率分别为84.3%、57.9%和61.8%(P<0.001);蛋白质水平的抑制率分别为78.4%、51.3%和59.9%(P<0.001).选择干扰效率较好的A549-S1细胞进行后续实验.细胞计数绘制生长曲线、CCK-8法观察细胞增殖状况和流式细胞仪检测细胞所处周期时相来分析转染CK1α基因shRNA表达载体对A549细胞生长增殖的影响.实验结果显示,A549-S1与A549和A549-NK两对照组的平均值比较,细胞计数抑制率为(37.7±2.2)%(P<0.01);CCK-8抑制率为(26.2±1.5)%(P<0.05);S期减少(75.0±4.0)%(P<0.01);G2/M期减少(45.2±5.4)%(P<0.05).因此,转染CK1α基因shRNA表达载体可导致CK1α基因的沉默,明显抑制A549细胞的生长和增殖.
- 邹飞雁姜少杰刘晓李俐娟刘婉君
- 关键词：RNA干扰细胞增殖
- 金雀异黄素对SGC-7901胃癌细胞超微结构及极光激酶A基因表达的影响
- 2011年
- 应用原子力显微镜(Atomic Force Microscope,AFM)技术、Real-time PCR及Western blotting方法,分别检测金雀异黄素(genistein)对SGC-7901胃癌细胞超微结构、Aurora-A基因mRNA和蛋白表达的影响。AFM扫描显示,经20μg/mLgenistein处理SGC-7901胃癌细胞48 h,细胞的超微结构呈现凋亡形态特征改变;Aurora-A表达分析,5μg/mL组、10μg/mL组和20μg/mL组与对照组比较,其mRNA表达量分别下降(31.6±0.02)%、(38.8±0.04)%和(59.9±0.02)%,其中5μg/mL组与10μg/mL组间比较无显著性差异(P>0.05),其余组间比较均有显著性差异(P<0.05);其蛋白表达量分别下降(26.8±0.04)%、(33.0±0.10)%和(48.5±0.09)%,组间比较均有显著性差异(P<0.05)。由此推断金雀异黄素诱导SGC-7901胃癌细胞凋亡的分子机制可能涉及极光激酶A mRNA及蛋白表达下调。
- 邹飞雁刘晓刘婉君王秋兰晏光荣白顺
- 关键词：金雀异黄素原子力显微镜凋亡
