凌雪萍
- 作品数：116 被引量：193H指数：8
- 供职机构：厦门大学更多>>
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- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程环境科学与工程更多>>
- 重组大肠杆菌产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的培养基优化被引量：5
- 2011年
- 为了提高重组大肠杆菌(Escherichia coli)Rosetta(DE3)-pET-22-bgl-(kil-Km)的产酶能力,采用单因素试验研究了培养基碳源、氮源及碳氮比(摩尔比)对重组大肠杆菌Rosetta(DE3)-pET-22-bgl-(kil-Km)分泌表达重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶H(A107-M)的影响.在此基础上,采用Box-Behnken设计法和响应面分析法对以上影响因素进行优化,得出最优培养基成分为(g/L):甘油10.01,酪蛋白胨12.03,酵母粉24,NaCl 10,(NH4)2SO44.77,KH2PO42.31,K2HPO412.54.
- 陈亚兰黄伟强周晓波凌雪萍卢英华
- 关键词：重组大肠杆菌培养基优化
- α-1,6-葡聚糖酶基因的克隆及在毕赤酵母中的表达被引量：1
- 2011年
- 根据朱黄青霉(Penicillium minioluteumHI-4)α-1,6-葡聚糖酶的基因序列,人工合成α-1,6-葡聚糖酶基因并将其插入毕赤酵母(Pichia pastoris)表达载体pPICZαA,PCR和双酶切验证结果均表明成功构建了重组质粒pPICZαA-Dex.重组质粒经SacⅠ线性化后整合到毕赤酵母X33基因组中进行表达.摇瓶发酵表明,重组毕赤酵母经甲醇诱导120 h产酶活力达到最高值29.2 U/mL,SDS-PAGE结果显示在67 ku附近有明显的条带,与α-1,6-葡聚糖酶理论分子质量相符合.
- 钟丽娟Bwegendaho Damien陈龙军凌雪萍何宁卢英华
- 关键词：毕赤酵母
- 人胰岛素原密码子的优化及其在毕赤酵母中的表达被引量：2
- 2012年
- 依据毕赤酵母偏好密码子,设计合成长效人胰岛素原(human proinsulin,HPI)基因序列,所合成的HPI基因全长为200bp,并在其N端添加信号肽(EEAEAEAEPK)以提高目的蛋白表达.将改造后基因克隆到pPIC9K载体中,构建分泌表达型载体pPIC9K-HPI,转化到毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中.用遗传霉素G418梯度筛选获得高拷贝菌株,在甲醇诱导下表达分子质量为7.87ku的HPI,利用金属螯合层析纯化蛋白质,胰蛋白酶酶切后利用人胰岛素试剂盒测得生物活性,HPI摇瓶最高产量可达35.4mg/L.该研究为获得大量长效胰岛素基因工程产品奠定研究基础.
- 史莹飞敬科举凌雪萍卢英华
- 关键词：胰岛素原基因改造毕赤酵母
- 维生素对红法夫酵母产虾青素的影响被引量：6
- 2011年
- 采用单因素实验方法研究了不同维生素对红法夫酵母(Phaffia rhodozyma)生长及虾青素积累的影响.结果表明:生物素、泛酸钙、肌醇、VB1可显著提高红法夫酵母的生物量、类胡萝卜素和虾青素的产量,其较适质量浓度分别为0.05,25.00,0.50,0.05 mg/L.VB12和核黄素对红法夫酵母的细胞生长有明显的促进作用,同时可略微提高虾青素产量,其较适质量浓度分别为0.50和0.005 mg/L;VB6、烟酸和叶酸虽然可促进细胞生长,但却明显抑制了虾青素的积累;而硫辛酸既抑制细胞生长也抑制其虾青素的积累.根据单因素实验结果,在培养基中按以上较适浓度添加生物素、泛酸钙、肌醇、VB1、VB12和核黄素,菌体生物量和虾青素质量浓度分别达到5.000 g/L和16.77 mg/L,较对照组分别提高了33.2%和108%.
- 王宝贝凌雪萍郑宗宇熊玮卢英华
- 关键词：维生素单因素红法夫酵母虾青素
- 一种裂殖壶菌发酵产多不饱和脂肪酸的调控方法
- 本发明公开了一种裂殖壶菌发酵产多不饱和脂肪酸的调控方法，将产PUFAs的裂殖壶菌经过平板培养基培养和种子培养基活化后，获得种子液，将该种子液接种于发酵培养基中进行发酵培养，在该发酵培养处于对数生长初期时，向发酵液中添加三...
- 凌雪萍周豪卢英华于盛洋杨庆华李俊陈翠雪潘雪珊李志朋
- 文献传递
- 一种虾青素生产菌株及其诱变筛选方法与应用
- 一种虾青素生产菌株及其诱变筛选方法与应用，涉及一种微生物菌株及其获取方法。所述一种虾青素生产菌株为红法夫酵母(Phaffia rhodozyma)的诱变菌株N1806-04。以红法夫酵母为出发菌株，采用酶法制备红法夫酵母...
- 卢英华王宝贝敬科举凌雪萍
- 文献传递
- 褐黄孢链霉菌生产纳他霉素工艺条件研究被引量：5
- 2009年
- 目前，国内纳他霉素产量低，为提高其产量，实现其工业化生产，主要对褐黄孢链霉菌ATCC13326发酵生产纳他霉素的培养条件及前体添加策略进行研究．得出最佳培养条件为：培养温度28℃，种龄40～44h，接种量10％，装液量10％，初始pH7．3，发酵24h时加入0．6％的前体丙酸钠．在此条件下摇瓶分批发酵生产纳他霉素的产量可达到6．87g／L，比未添加前体的纳他霉素产量（3．72g／L）提高了84．7％．利用10L发酵罐进行纳他霉素的发酵研究，在最优培养条件下，发酵罐中的纳他霉素产量可达到8．34g／L，比摇瓶分批发酵生产纳他霉素产量（6．87g／L）提高了21．4％．
- 郝晓兵卢英华凌雪萍敬科举
- 关键词：褐黄孢链霉菌纳他霉素前体发酵条件优化
- 优化提取与分离海兔大脑神经节蛋白质组被引量：3
- 2006年
- 蓝斑背肛海兔(Notarcus Leachii cirrosusStimpson,NLCS)属于海洋软体动物.NLCS大脑神经节(cerebral ganglion,CG)富含高丰度的脂类物质,并干扰了三氯醋酸-丙酮法沉淀CG蛋白质.本实验的目的是找到一种适合提取、分离海兔CG蛋白的方法.经各种实验方法对比后,发现超速离心法能有效分离CG破碎液中的脂类化合物,提高双向凝胶电泳法分离BG蛋白质组的分辨率,大约可检测到450个蛋白质点.
- 詹怿婕陆永进卓慧钦凌雪萍黄河清
- 关键词：海兔蛋白质组
- 发酵罐底物流加生产二十二碳六烯酸的方法
- 发酵罐底物流加生产二十二碳六烯酸的方法，涉及二十二碳六烯酸。将菌种转接于平板培养基中培养，得活化的菌种，所述菌种为裂殖壶菌(Schizochytrium sp.)LU310，保藏编号：CGMCC No.12528；将得到...
- 凌雪萍潘雪珊卢英华郭静敬科举姚传义陈翠雪
- 文献传递
- 用CRISPR-Cas9技术构建的重组大肠杆菌及其在制备磷脂酶D中的应用
- 本发明公开了用CRISPR‑Cas9技术构建的重组大肠杆菌及其在制备磷脂酶D中的应用。本发明涵盖敲除三个海藻糖酶基因treA、treC及treF构建耐盐菌株和磷脂酶D表达菌株及优化磷脂酶D表达条件两部分。所述磷脂酶D表达...
- 凌雪萍陈少锋卢英华姚传义陈翠雪赵旭蕊
