冯娇娇
- 作品数:9 被引量:5H指数:1
- 供职机构:南京医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省“青蓝工程”基金江苏高校优势学科建设工程资助项目更多>>
- 相关领域:生物学农业科学医药卫生更多>>
- 肌醇依赖性激酶1α对心脏发育的影响
- 2012年
- 目的探讨肌醇依赖性激酶1α(IRE1α)对非洲爪蟾心脏发育的影响。方法通过显微注射IRE1αmRNA实现基因过表达,注射IRE1α或其下游基因XBP1特异性反义寡核苷酸(MO)实现基因封闭;利用全胚胎原位杂交方法检测基因表达,免疫组化方法检测体节形成。结果过表达IRE1α对心脏发育无明显影响;利用MO封闭IRE1α或XBP1后,心脏明显减小,形态异常,心脏发育相关基因nkx2.5表达下降,但对体节无影响。结论 IRE1α影响非洲爪蟾心脏的发育,可能是通过XBP1发挥作用。
- 陶正贤冯娇娇李昕昕殷晨阳袁栎
- 关键词:非洲爪蟾心脏发育
- 稳定表达小鼠PNPLA7的Huh7细胞系的构建被引量:1
- 2016年
- 目的 :构建稳定表达小鼠PNPLA7-Flag蛋白的人类肝癌细胞Huh7细胞系,观察小鼠PNPLA7在Huh7细胞中的过表达以及对Huh7细胞脂质含量的影响。方法:构建p CMV6-PNPLA7-Flag真核表达载体,应用脂质体转染技术将该质粒导入Huh7细胞,随后通过G418筛选稳定表达的细胞系,运用Western blot方法检测PNPLA7蛋白表达;并通过油酸处理及油红染色观察过表达PNPLA7蛋白对Huh7细胞中脂质含量的影响。结果:成功获得2株稳定过表达PNPLA7-Flag的Huh7细胞系;Huh7细胞中过表达PNPLA7蛋白,在油酸处理后细胞内脂滴含量减少。结论:稳定表达小鼠PNPLA7的Huh7细胞系构建成功;小鼠PNPLA7在Huh7细胞中的表达会引起细胞中脂质含量减少,从而为后续研究PNPLA7蛋白在脂代谢通路的功能及机制提供可靠的细胞模型。
- 鞠境冯娇娇李仲
- 关键词:脂滴脂代谢
- 氯化铝对非洲爪蟾胚胎神经发育的影响被引量:1
- 2012年
- 为探讨氯化铝对非洲爪蟾胚胎神经发育的影响,以不同浓度(1和2 mmol/L)AlCl3溶液处理原肠期的胚胎,采用免疫组化方法检测铝处理对胚胎体节发育的影响;采用整胚原位杂交方法检测神经发育标志基因Sox3、NeuroD的表达;利用BrdU掺入法检测细胞增殖;利用TUNEL方法检测细胞凋亡。结果显示:氯化铝处理的胚胎体轴弯曲、缩短,神经褶未完全融合。铝处理后胚胎体节发育未受明显影响;神经发育相关基因sox3、neuroD的表达明显减少;细胞增殖减少,凋亡增加。结果提示:氯化铝通过抑制增殖,促进凋亡而影响非洲爪蟾胚胎神经发育。
- 冯娇娇徐校佩李昕昕殷晨阳陶正贤袁栎
- 关键词:氯化铝非洲爪蟾神经发育增殖凋亡
- IRE1α在非洲爪蛙心脏发育中的作用
- 内质网应激(Endoplasmic reticulum stress,ERS)是指由于某种原因导致细胞内质网内稳态失衡、生理功能发生紊乱的一种病理过程,未折叠蛋白反应(Unfol ded protein response...
- 冯娇娇
- 关键词:心脏发育非洲爪蛙
- 文献传递
- 封闭内质网蛋白激酶IRE1α对肠道发育的影响
- 2012年
- 目的探讨肌醇酶1α(IRE1α)在非洲爪蟾胚胎发育中的作用。方法利用全胚胎原位杂交法检测IRE1α在胚胎发育晚期的表达;设计合成特异性封闭IRE1α的反义寡核苷酸(MO),通过显微注射方法实现基因封闭。结果 IRE1α在胚胎发育晚期高表达于胰腺。在体外翻译系统中,IRE1αMO可以阻断IRE1α蛋白质的合成。封闭IRE1α对胚胎发育早期无明显影响;但在发育晚期导致肠道结构消失,胚胎发育明显异常。结论 IRE1α对非洲爪蟾胚胎发育早期无影响,但在晚期导致肠道发育异常。
- 陶正贤李昕昕冯娇娇袁栎
- 关键词:非洲爪蟾胚胎发育
- IRE1α影响非洲爪蟾胰腺发育
- 2012年
- 目的:探讨肌醇依赖性激酶1α(inositol requiring enzyme 1α,IRE1α)对非洲爪蟾胰腺发育的影响。方法:通过显微注射基因特异性反义寡核苷酸实现基因敲降;利用整体胚胎原位杂交方法检测基因表达。结果:IRE1α表达于爪蟾发育中的胰腺;利用基因特异性反义寡核苷酸敲降IRE1α后,非洲爪蟾肠道明显异常,胰腺内外分泌标志性基因胰岛素、淀粉酶表达显著减少;胰腺前体细胞的标志基因pdx1和p48表达明显减少;敲降IRE1α下游基因X-盒结合蛋白1(X-box binding protein 1,XBP1)后,非洲爪蟾的胰岛素、淀粉酶表达也明显减少。结论:IRE1α影响非洲爪蟾胰腺发育,可能通过XBP1发挥作用。
- 李昕昕冯娇娇殷晨阳徐校佩王璐璐郭静王学军王宁袁栎
- 关键词:非洲爪蟾胰腺发育
- XBP1在非洲爪蟾胚胎发育中的作用
- 2017年
- 目的 :探讨X盒结合蛋白1(X-box binding protein 1,XBP1)对非洲爪蟾胚胎发育的影响。方法:利用Western blot、原位杂交和免疫染色法检测XBP1在胚胎发育各个阶段的表达;通过显微注射基因特异性反义寡核苷酸实现基因敲降,利用RTPCR和整体胚胎原位杂交法检测基因表达变化。结果 :XBP1主要表达于非洲爪蟾胚胎发育期的神经、前肾、胰腺等器官中;敲降XBP1s在胚胎发育早期影响非洲爪蟾胚层形成相关基因,在胚胎发育后期影响胰腺发育相关基因。结论:XBP1s在胚胎发育早期可能影响胚层形成,在晚期可能影响胰腺的发育。
- 刘佳李卉冯娇娇郭静袁栎
- 关键词:非洲爪蟾胚层胰腺
- MIA影响非洲爪蟾胚胎中胚层的形成被引量:1
- 2013年
- 目的:探讨黑色素瘤抑制蛋白(melanoma inhibitory activity,MIA)在非洲爪蟾早期胚胎发育中的作用。方法:根据热带爪蟾MIA序列在非洲爪蟾EST数据库中找到MIA序列,利用RT-PCR扩增全长序列并克隆至pCS2+,用于测序。利用RT-PCR检测胚胎发育各阶段MIA mRNA的表达。通过显微注射特异的反义寡核苷酸morpholino(MO)敲降MIA;利用整胚原位杂交检测胚层标志性基因的表达。结果:克隆出非洲爪蟾MIA全长序列。在胚胎发育过程中MIA从受精卵开始持续表达。敲降MIA导致胚胎胚孔闭合延缓,中胚层标志基因xbra表达明显受抑,而内胚层标志性基因sox17α表达无明显改变。结论:MIA表达于非洲爪蟾胚胎发育各阶段,敲降MIA抑制中胚层的形成。
- 冯娇娇殷晨阳李昕昕徐校佩郭静王学军王宁袁栎
- 关键词:非洲爪蟾胚胎发育中胚层
- IRE1α通过UPR影响非洲爪蟾胚胎发育被引量:2
- 2011年
- 目的:探讨IRE1α在非洲爪蟾胚胎发育中是否介导未折叠蛋白反应(UPR),并在衣霉素(tunicamycin,TM)诱导的胚胎发育畸形中发挥挽救作用。方法:利用TM处理胚胎激发内质网应激;应用显微注射mRNA方法实现基因过表达,通过注射特异的反义寡核苷酸morpholino(MO)实现基因封闭;RT-PCR检测XBP1剪切情况。结果:XBP1剪切随IRE1α过表达及封闭而增加或减少;TM处理导致胚胎发育畸形,XBP1剪切增加,封闭XBP1可部分挽救发育畸形;封闭IRE1a可明显挽救发育畸形,XBP1剪切恢复。结论:IRE1α在非洲爪蟾胚胎发育中介导UPR,封闭IRE1α可逆转TM诱导的胚胎发育畸形,部分通过XBP1途径发挥作用。
- 李昕昕冯娇娇侯道荣郭静王学军王宁袁栎
- 关键词:非洲爪蟾胚胎发育