何春梅
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
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- 吗替麦考酚酯对大鼠肾小管上皮-间充质转化的作用及其机制探讨被引量：2
- 2008年
- 目的探讨吗替麦考酚酯（MMF）对腺嘌呤致慢性肾衰竭大鼠肾间质纤维化及肾小管上皮-间充质转化（EMT）的作用，以及该作用同肾组织血管内皮生长因子（VEGF）和分化抑制因子（Id2、Id3）变化的关系。方法雄性Wistar大鼠64只，分对照组（16只）、慢性肾衰竭组（24只，腺嘌呤125mg·kg^-1·d^-1灌胃）、MMF干预组（24只，腺嘌呤125mg·kg^-1·d^-1＋MMF15mg·kg^-1·d^-1灌胃）。分别于第2、4、6、8周处死动物，收集血、尿标本测血肌酐、尿蛋白。取肾组织，Masson染色作肾间质纤维化程度评分，免疫组化法检测肾组织α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、转化生长因子β1（TGFβ1）表达，RT-PCR测肾组织TGFβ1、VEGF mRNA表达，Western blot测肾组织α-SMA、VEGF及Id2、Id3蛋白表达。结果（1）慢性肾衰竭组、MMF干预组血肌酐均显著高于对照组，但慢性。肾衰竭组、MMF干预组之间无显著差异；MMF干预组第6、8周时24h尿蛋白显著低于慢性肾衰竭组。（2）慢性肾衰竭组、MMF干预组在第6、8周肾间质纤维化程度显著重于对照组，但MMF干预组间质纤维化程度显著低于慢性肾衰竭组。（3）慢性肾衰竭组、MMF干预组在第6、8周肾组织α-SMA、TGFβ1表达较对照组明显增强，但MMF干预组肾组织α-SMA表达在第6、8周明显低于慢性肾衰竭组，TGFβ1表达在第2、4、6周亦显著低于慢性肾衰竭组。（4）慢性肾衰竭组第8周肾组织VEGF蛋白表达低于对照组，MMF干预组。肾组织VEGF表达第6、8周显著高于慢性肾衰竭组。（5）MMF干预组肾组织Id2、Id3蛋白表达高于慢性肾衰竭组，在第4、6周差异显著。结论MMF具有减轻慢性肾衰竭大鼠肾间质纤维化、抑制肾小管上皮细胞EMT的作用，该作用可能与MMF下调。肾组织TGFβ1表达及上调VEGF、Id2、Id3表达有关，其确切机制需进一步探讨。
- 何春梅郑法雷刘燕萍
- 关键词：霉酚酸上皮-间充质转化血管内皮生长因子分化抑制因子
- 血管内皮生长因子抑制肾小管上皮间充质转化及其与结缔组织生长因子和PI3K-Akt信号通路的关系
- 2009年
- 目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）对转化生长因子β1（TGF—β1）诱导的肾小管上皮间充质转化（EMT）的作用，及其与结缔组织生长因子（CTGF）、P13K—Akt信号通路的关系。方法（1）将体外培养的HK2细胞分为正常对照组、TGF-β1（5μg／L，下同）组、VEGF组（100μg／L，下同）、TGF—β1＋VEGF组。HK2细胞体外培养48h，用免疫组化双染方法检测肾小管上皮细胞α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和E钙黏蛋白的表达。（2）将体外培养的HK2细胞分为正常对照组、TGF-β1组、VEGF组、TGF—β1＋VEGF组、PI3K—Akt信号通路阻断剂LY294002组（25txmol／L，下同）、TGF-β1＋LY294002组、VEGF＋LY294002组、TGF-β1＋VEGF＋LY294002组。HK2细胞体外培养48h，用Western印迹和RTPCR方法检测α-SMA和CTGF的表达；用ELISA方法检测培养上清中纤连蛋白（FN）和Ⅰ型胶原（ColⅠ）的表达。结果免疫组化结果显示，TGF—β1组α-SMA表达比正常对照组增强，而E钙黏蛋白表达减弱；TGF-β1＋VEGF组-αSMA表达比TGF—β1组显著减弱，而E钙黏蛋白表达增强。TGF—β1组α—SMA、CTGF蛋白和mRNA及FN、ColⅠ表达比正常对照组显著增强（均P〈0．05）；TGF-β1＋VEGF组α-SMA、CTGF蛋F1和mRNA及FN、ColI表达比TGF—β1组显著减弱（均P〈0．05）；TGF-β1＋VEGF＋LY294002组α-SMA、CTGF蛋白和mRNA及FN、ColI表达比TGF—β1＋VEGF组显著增强（均P〈0．05）。结论VEGF能抑制TGF—β1诱导的体外培养的HK2细胞发生EMT，其机制可能与VEGF下调HK2细胞CTGF表达及减少细胞外FN、ColⅠ合成有关。VEGF的这种作用可能部分通过PI3K-Akt信号转导通路实现，其确切机制有待进一步研究。
- 连耀国何春梅郑法雷
- 关键词：血管内皮生长因子类转化生长因子Β1上皮细胞结缔组织生长因子上皮间充质转化
- VEGF抑制肾小管上皮-间充质转化与CTGF表达变化的关系及PI3K/Akt信号转导途径的作用
- 本研究目的在于探讨VEGF对TGF-β1诱导的EMT的作用及其与CTGF及细胞外基质表达变化的关系，并探讨VEGF的P13K/Akt信号转导途径在EMT过程中的作用。研究结果表明，VEGF可抑制TGF-β，诱导的体外培养...
- 连耀国郑法雷何春梅
- 关键词：肾间质纤维化血管内皮细胞生长因子信号转导机制
- 血管内皮生长因子对肾小管上皮-间充质细胞转化的作用及其与骨形成蛋白-7、分化抑制因子表达的关系被引量：9
- 2008年
- 目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)对肾小管上皮-间充质细胞转化(EMT)的作用及其与骨形成蛋白-7(BMP-7)、分化抑制因子(Id)2、Id3表达的关系。方法体外培养的人肾小管上皮细胞(HK-2)经转化生长因子-β1(TGF-β1,5ng/ml)与不同浓度VEGF165(0.1、1、10、100ng/ml)共同作用,或TGF-β1(5ng/ml)与血管内皮生长因子受体-1(VEGFR1)抗体(10μg/ml)共同作用48h后,免疫组织化学双染方法检测细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏素表达,实时荧光定量PCR法、Westernblot法检测细胞α-SMA、BMP-7、Id2和Id3的表达。TGF-β1(5ng/ml)、VEGF165(100ng/ml)与激活素受体样激酶-6/Fc嵌合体(Alk6/FcChimera)(2μg/ml,中和内源性BMP-7)共同作用48h后,Westernblot法检测细胞α-SMA、Id2的表达情况。结果TGF-β1作用后,α-SMA表达比正常对照显著增强(P<0.05),E-钙黏素、BMP-7、Id2及Id3的mRNA及蛋白质表达均显著减弱(P<0.05)。VEGF165以浓度依赖方式增强BMP-7及Id2蛋白表达,而显著降低TGF-β1上调α-SMA表达的作用(P<0.05)。加入VEGFR1抗体(10μg/ml)后,TGF-β1上调α-SMA表达的作用显著增强(P<0.05),而E-钙黏素、BMP-7、Id2表达显著减弱(P<0.05)。TGF-β1+VEGF165+Alk6/FcChimera共同作用后α-SMA蛋白表达比TGF-β1+VEGF165共同作用后显著增强(P<0.05),而Id2表达差异无显著性。结论VEGF165可抑制TGF-β1诱导HK-2细胞发生EMT;其机制可能与BMP-7和Id2表达上调有关,而与Id3表达变化无关。Id2表达增强可能与VEGF165的直接作用有关,而与BMP-7无关。
- 何春梅郑法雷连耀国刘燕萍
- 关键词：血管内皮生长因子骨形成蛋白-7分化抑制因子
- 霉酚酸酯对腺嘌呤致大鼠肾间质纤维化作用的初步研究
- 目的霉酚酸酯(mycophenolate mofetil,MMF)是一种免疫抑制剂,主要用于治疗免疫性疾病。近年个别报告MMF 对肾间质纤维化和肾小管上皮细胞转分化有直接的抑制作用,但机制尚不完全清楚。血管内皮生长因子(...
- 何春梅郑法雷刘燕萍
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