任慧子
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 供职机构：兰州大学基础医学院医学生物化学与分子生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 丽蝇抗病毒肽Alloferon1基因串联体的构建和表达
- 目的：利用同尾酶构建基因同向串联体的方法，构建Alloferonl基因2串联体重组质粒，并将其在大肠杆菌中融合表达。为大规模制备Alloferonl奠定基础。
方法：根据瑞士微生物肽数据库(APD)收录的All...
- 任慧子
- 关键词：基因串联体
- 文献传递
- 天蚕素A-蛙皮素杂合肽突变体的构建、表达及其抗菌活性被引量：3
- 2008年
- 目的构建天蚕素A(1～8)-蛙皮素(1～12)杂合基因抗菌肽(CA-MA杂合肽)突变体,在大肠杆菌中融合表达,并进行抗菌活性检测。方法采用PCR体外定点突变技术,设计1对方向相反的引物,其中1个引物引入突变点,应用高保真的PolybestDNA多聚酶进行重组表达质粒pGEX-4T-1-CA-MA的PCR扩增,使CA-MA杂合肽第16位密码子由AGT突变为TGG。将扩增片段自身连接,构建CA-MA杂合肽突变重组表达质粒pGEX-4T-1-W16-CA-MA,转化E.coliBL21,IPTG诱导表达突变体蛋白W16-CA-MA,并对表达产物进行纯化。分离GST融合蛋白后,进行抗菌活性检测。结果重组突变表达质粒DNA测序结果表明,在预期位点发生了突变;突变蛋白在大肠杆菌中的表达量约占菌体总蛋白的18%;纯化后蛋白纯度可达75%以上,并具有一定的抗菌活性。结论已成功获得了具有抗菌活性的杂合肽突变体W16-CA-MA。
- 冯惟萍韩跃武任慧子陈建国张庆华卢天龙
- 关键词：突变体抗菌活性
- BAG-1、Bcl-2双靶区反义RNA重组载体诱导SGC-7901细胞凋亡被引量：2
- 2009年
- 目的构建BAG-1、Bcl-2双靶区反义RNA重组载体并初步探讨其对SGC-7901细胞增殖活性的影响。方法从SGC-7901细胞总RNA中逆转录扩增包括全部编码序列的BAG-1和Bcl-2 cDNA,利用生物工程技术,反向插入真核细胞双表达载体pVITRO2的多克隆位点中,转染SGC-7901细胞,MTT法检测对细胞增殖的影响,RT-PCR法观察对细胞BAG-1和Bcl-2 mRNA表达水平的变化,流式细胞术检测对细胞周期的影响。结果限制性内切酶和测序分析表明,双表达质粒pVITRO2-AsBAG-1-Bcl-2构建成功。MTT法检测显示pVITRO2-AsBAG-1-Bcl-2载体抑制SGC-7901细胞增殖,并呈时间依赖性,其中以72 h转染组抑制作用最显著(P<0.01);与对照组比较,pVITRO2-AsBAG-1-Bcl-2组BAG-1和Bcl-2mRNA表达水平下降(P<0.05),细胞凋亡比例升高(P<0.01)。结论成功构建反义双靶区重组载体pVITRO2-AsBAG-1-Bcl-2,并发现其能抑制SGC-7901细胞增殖并引起细胞凋亡。
- 陈建国卢天龙韩跃武冯惟萍任慧子
- 关键词：BAG-1BCL-2反义RNA胃癌
- 丽蝇抗病毒肽Alloferon1基因串联体的构建和表达被引量：1
- 2008年
- 目的:克隆和表达Alloferon1基因2串联体.方法:利用同尾酶法基因同向串联方案,在人工合成Alloferon1全基因的基础上,将Alloferon1基因由单体连接成2串联体,继而将获得的正确Alloferon1基因2串联体插入pGEX-4T-1表达载体诱导表达.结果:构建的Alloferon1基因2串联体经酶切和DNA测序分析,结果表明该基因串联体的序列与设计的序列完全相同.Alloferon1基因2串联体插入pGEX-4T-1载体后,重组菌经37℃诱导4h,SDS-PAGE分析结果显示,该串联体得到较高水平的表达.结论:Alloferon1基因2串联体的构建与表达均获得了成功.
- 任慧子韩跃武冯惟萍张庆华陈建国卢天龙
- 关键词：基因同尾酶大肠杆菌
