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井健: 作品数：19 被引量：17H指数：3; 供职机构：北京师范大学生命科学学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金国家重点基础研究发展计划更多>>; 相关领域：生物学农业科学医药卫生文化科学更多>>

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关于(A6,A11)-双位点突变胰岛素原作为外源肽呈递骨架可行性的研究: 2009年; 通过重组DNA技术,以(A6,A11)-双突变胰岛素原分子为支架构建了含有外源抗栓肽功能区的嵌合分子,并在大肠杆菌进行了表达和纯化.对嵌合分子进行胰岛素受体结合活性、放射免疫活性及抗血小板聚集活性分析,结果表明该嵌合分子具有较强的血小板聚集抑制活性,而无胰岛素生物活性,证明以(A6,A11)-双突变胰岛素原作为外源肽序列呈递骨架是可行的.; 井健唐建国

Fibrinogen receptor recognition mechanism and protein engineering: 井健

包涵体溶解与复性的策略与方法: 2012年; 原核细胞表达外源基因常常会导致包涵体的产生。包涵体的复性是制备有效的功能蛋白质的必需途径。每一种蛋白质的基本结构与性质不同,决定了包涵体中外源蛋白质的复性方法多种多样。本文总结并介绍了目前在包涵体复性方面的几种方法与策略。初步讨论了在复性过程中蛋白质的结构变化。; 王苹井健; 关键词：包涵体蛋白质复性蛋白质结构

利用实验微视频制作培养师范生教学能力被引量：4: 2020年; 新课程标准和信息网络技术的发展给未来教师带来了新的挑战与机遇。为了培养师范生的教学设计能力、信息技术应用能力和实验教学实践能力,北京师范大学生命科学学院实验教学中心以分子生物学实验课程为平台对生物科学专业师范生开展了实验微视频制作训练。从实施效果来看,实验微视频制作能够显著提高师范生的实验技能、教学实践能力和信息技术应用能力,但同时也体现了师范生在教学实践和实验教学能力中的不足。高校应进一步加强师范生的教学实践培训和实验教学训练。; 李小蒙井健尹燕霞向本琼邴杰; 关键词：师范生教学设计实验教学

人尿激酶原纤原受体识别区嵌合突变体的构建与表达被引量：1: 2007年; 采用同源转座方法,构建了在尿激酶原K区138-139位点插入了赖氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（KGD）序列的2种尿激酶原嵌合体基因（proUK-KGDW,proUK-KGDS）,并以昆虫细胞SF9为宿主获得了高效表达,表达量在33.34μkat·mL^-1,细胞密度为10^6·mL^-1,表达高峰期表达产物占细胞总蛋白的15%以上.表达产物展示出较高的纤溶活性,并具有良好的人尿激酶原免疫原性,同时,经SDS-PAGE试验检测,昆虫细胞分泌的突变体相对分子质量符合理论预期,为5.4×10^4,绝大多数为单链态形式.经过离子交换、分子筛层析及超滤浓缩等步骤对突变体蛋白进行了初步纯化,光浊度法试验表明含有KGDW序列的尿激酶原突变体具有较强的血小板聚集抑制活性,而含有KGDS序列的突变体几乎不具有任何活性,表明羧基端边侧序列对KGD展示正常的受体结合活性影响较大.溶解圈试验表明2种突变体均保留了较高的纤溶活性,说明插入序列不影响尿激酶原的酶切活性.; 尹吉伟岳俊杰李森井健; 关键词：尿激酶原纤溶活性

重组人膜联蛋白的尿激酶原融合蛋白衍生物的复性及制备被引量：2: 2012年; 构建重组人膜联蛋白的尿激酶原融合蛋白基因,并在大肠杆菌中实现高效表达.目标基因表达产物以包涵体形式存在于细菌细胞质中.通过稀释复性的实验方法,对目标基因表达产物进行了变复性处理及进一步的分离纯化,最终制备出具有正确空间结构的有活性的尿激酶原融合蛋白衍生物.; 王苹井健; 关键词：尿激酶原包涵体稀释复性纯化

抗栓胰岛素原钙调素重组融合蛋白表达条件的摸索: 2011年; 以无活性人胰岛素原突变体为分子支架,在C肽位置嵌合特异拮抗血小板GPⅡbⅢa受体的去整合素活性结构位点序列,构建嵌合人胰岛素原突变体.该突变体相对分子质量大小为7.0×103,与钙调素的C末端融合后形成新型重组融合蛋白质,相对分子质量为24.7×103.构建该重组融合蛋白质的大肠杆菌BL21(DE3)表达系统,尝试在大肠杆菌表达体系中,对该重组融合蛋白质进行高效表达.结果表明,该重组融合蛋白质的表达率约占菌体全蛋白的30%,优化后的表达条件为25℃,50μmol.L-1诱导表达16 h.; 井健; 关键词：钙调素融合蛋白

尿液作为新型生物标志物来源的探索被引量：4: 2016年; 机体各种变化是生物标志物研究的核心内容.因为机体固有的稳态调控机制,在血液中早期产生的变化容易被清除.而在尿液中不存在稳态调控机制,允许容纳更多的变化因素存在.尤其在疾病发生的早期阶段,从尿液中更有可能发现新型的早期生物标志物.在尿液生物标志物研究中,亦应当考虑药物的影响.使用尿液生物标志物研究路线图,能够有效规避各种影响因素对于尿液生物标志物研究的干扰;同时,结合膜处理新技术,有利于经济、高效地大规模收集尿液样本,促进尿液生物标志物的大规模研究.另外,本文介绍了最容易在尿液中体现出变化的肾脏疾病生物标志物的研究进展.尿液生物标志物的研究,将赋予人类在疾病预防、诊断、治疗及预后监测等诸多方面实现更多进步的可能性.; 井健高友鹤; 关键词：尿液生物标志物

重组抗栓人胰岛素基因工程菌高密度发酵研究: 2013年; 通过重组DNA技术构建抗栓人胰岛素突变体基因,并转化入大肠杆菌宿主菌,构建基因工程菌株.通过高密度发酵技术对重组菌株进行大规模培养.通过对培养条件包括温度、溶氧量、pH值、补料等的调整,达到最佳培养状态,进而获得高产量的重组大肠杆菌菌体.检测大量培养重组大肠杆菌的表达率,并对表达产物进行纯化与进一步的理化分析鉴定.; 井健唐建国; 关键词：高密度发酵重组大肠杆菌

人膜联蛋白A5:从生物标志物到药物候选物: 2022年; 人膜联蛋白A5(human annexin A5,hAnxA5)是人体中一种重要的功能蛋白质分子,广泛存在于人体的细胞和体液中。hAnxA5作为具有特定结构、隶属于一个复杂成员膜联蛋白家族的一个成员分子,其生化特性也是非常独特的。它以钙离子依赖方式,可逆、特异性、高效地结合磷脂酰丝氨酸分子;并基于此特性发挥重要生物学功能,在诸多人体生理、病理现象中发挥重要作用。本文就hAnxA5的结构特点、生化特性、作用机制、影响效应以及在生物医学领域中的重要应用进行了较为系统的归纳与总结。游离态hAnxA5以单体形式存在,发挥生物学活性时通常形成聚合体形式。hAnxA5影响了人体的血管血栓疾病、自身免疫性疾病、肿瘤疾病、肺纤维化及肺损伤、非酒精性脂肪性肝炎等病理现象的发生与发展;hAnxA5作为疾病生物标志物,也应用在肿瘤、神经退行性疾病、心力衰竭、急性肾损伤和哮喘等疾病的研究中;作为新型药物候选物,hAnxA5及其衍生物被多次设计、运用于多类疾病的治疗探索,尤其在血管血栓类疾病的治疗探索上。对于hAnxA5的研究,仍存在某些空白与不足。对其研究的深入,不仅将拓展对于hAnxA5结构与功能关系的认识,而且将促进其在相关生物医学领域的应用。; 张茜孟庆玉井健; 关键词：磷脂酰丝氨酸生物标志物靶向药物凋亡检测

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