于颖
- 作品数：8 被引量：10H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点实验室开放基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪圆环病毒Ⅱ型TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立及应用被引量：2
- 2015年
- 为了快速准确检测猪圆环病毒Ⅱ型（PCV-2）并对病毒拷贝数进行定量,试验根据Gen Bank中PCV-2保守序列（登录号为FJ644559.1）设计1对特异性引物和Taq Man探针,制备标准品,建立PCV-2的荧光定量检测方法,并对临床样品进行检测。结果表明：该方法在1×10^1~1×10^8拷贝/μL的模板范围内具有良好的线性关系,相关系数可达0.999;敏感性是常规PCR方法的100倍;对猪细小病毒（PPV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）、猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）均为阴性,没有交叉反应;批内、批间重复试验变异系数均小于2.50%;在临床检测中,比常规PCR方法检测PCV-2的阳性检出率高出38%。说明试验成功建立了PCV-2 Taq Man荧光定量PCR检测方法,可用于临床检测PCV-2感染及对其拷贝数进行定量。
- 郝立沙张璐佟杰于颖杨莹莹张武超涂亚斌蔡雪辉
- 关键词：探针标准品拷贝数
- 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒依赖Caspase途径诱导仔猪胸腺细胞凋亡被引量：2
- 2016年
- 为研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)Hu N4株诱导断奶仔猪胸腺细胞凋亡的分子机制,本实验通过免疫荧光技术、流式细胞术、荧光定量PCR和western blot等方法检测HP-PRRSV感染仔猪胸腺内细胞凋亡相关因子Caspase-8、Caspase-9和Caspase-3表达量的变化。结果显示:HP-PRRSV感染仔猪后,胸腺内表达凋亡相关蛋白Caspase-8、Caspase-9和Caspase-3的细胞比例显著升高,并且凋亡相关蛋白Caspase-8、Caspase-9和Caspase-3表达量也明显升高。以上结果表明:HP-PRRSV感染仔猪引起胸腺细胞凋亡是通过Caspase依赖性通路介导。本研究为进一步了解HP-PRRSV感染机制提供了实验依据。
- 张冲赵识非王刚于颖刘永刚常亚飞涂亚斌王淑杰姜成刚蔡雪辉
- 关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞凋亡CASPASE-8CASPASE-9CASPASE-3
- 地塞米松对高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒感染仔猪的影响被引量：1
- 2015年
- 为研究地塞米松（DEx）对高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（HP—PRRSV）感染仔猪造成的免疫系统和呼吸系统损伤的影响，本实验在断奶仔猪感染HP-PRRSVHuN4株前后，肌肉注射不同剂量的DEX。观察临床症状，检测其免疫系统相关指标的变化。结果显示：不同剂量DEX注射组实验猪均表现典型临床症状，虽然其外周血中的促炎性细胞因子IL-1β、IL-6及TNF—d水平降低，CD4＋CD8‘T淋巴细胞亚群比例较HuN4单独感染组升高，CD8＋CD4-T细胞比例较HuN4单独感染组降低，但DEX注射组仔猪体温始终维持在40℃-42℃，肺部、胸腺和淋巴组织病变加重，死亡率达到100％（10／10），而HuN4单独感染组仔猪死亡率仅为25％（1／4）。表明DEX对HP—PRRSV感染的断奶仔猪虽具有一定的抑制炎症反应作用，但加重了HP-PRRSV感染的不利影响。本研究为全面防控HP—PRRSV提供新的实验依据。
- 佟杰王刚于颖张冲常亚飞刘永刚涂亚斌汤艳东姜成刚王淑杰蔡雪辉
- 关键词：地塞米松促炎性细胞因子
- 抗独特型抗体疫苗阻断高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒感染
- 引言/目的 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是造成养猪业经济损失的重大疾病之一,其中疫苗免疫是该病防控的主要方式,然而目前的疫苗免疫在实际生产中并不能提供长期保护,因此亟需研发一种安全有效的疫苗.本实验室制备了一株能够模拟...
- 张冲于颖肖书奇王刚孔宁王雪倪怀宝马超刘洪亮李娜高继明赵钦周恩民
- TLR2介导鸡毒支原体脂质相关膜蛋白诱导DF-1细胞表达IL-1β的研究被引量：1
- 2017年
- Toll样受体2(TLR2)在鸡毒支原体(MG)诱导天然免疫反应机制中的作用尚未明确。为鉴定TLR2在MG脂质相关膜蛋白(LAMPs)诱导细胞表达IL-1β中的作用,本研究通过RT-PCR和ELISA方法检测LAMPs刺激后DF-1细胞中IL-1β的m RNA和蛋白水平,结果显示LAMPs可以诱导DF-1细胞分泌IL-1β,并确定最佳刺激时间为6 h,最佳刺激剂量为1μg/m L。此外,通过构建TLR2重组表达质粒p CMV-HA-TLR2,并将该质粒转染DF-1细胞进行过表达及通过抗体封闭TLR2的两种处理方式,处理后采用LAMPs刺激细胞。经检测显示:TLR2过表达处理组的IL-1βm RNA和蛋白水平显著升高,而抗体处理组的IL-1βm RNA和蛋白水平下调。结果表明,LAMPs能够与DF-1细胞膜上的TLR2受体结合,有效的诱导DF-1细胞表达并分泌IL-1β,而且IL-1β的释放可能与天然免疫系统的经典通路即NF-κB信号通路调控有关。本研究为阐述MG的致病机制提供相关实验依据。
- 陈莹汪洋于颖李媛王琪邵家日王显兵周长平李继昌辛九庆
- 关键词：鸡毒支原体
- 鸡毒支原体GroEL蛋白通过NF-κB信号通路诱导DF-1细胞释放IL-1β的研究被引量：1
- 2019年
- 鸡毒支原体(MG)脂质相关膜蛋白(LAMPs)在刺激宿主细胞天然免疫中起重要作用,GroEL蛋白是本实验室前期利用质谱鉴定筛选出的LAMPS中的关键组分。为研究GroEL蛋白诱导宿主细胞炎性反应的信号通路,本研究通过原核表达系统表达出MG的GroEL蛋白,利用激光共聚焦试验、荧光定量PCR和western blot方法分别检测GroEL蛋白的粘附特性、p65入核、磷酸化水平及IL-1β分泌情况。激光共聚焦试验结果显示,GroEL蛋白能够黏附于DF-1细胞表面并刺激DF-1细胞中p65从胞浆转入细胞核;western blot检测显示GroEL蛋白能够激活NF-κB信号通路促进p65磷酸化水平提高;荧光定量PCR检测显示GroEL蛋白能够促进IL-1β释放,当NF-κB信号通路被抑制后,IL-1β的释放显著下降(p<0.01)。本研究结果表明MG GroEL蛋白能够粘附于宿主细胞表面并通过激活NF-κB信号通路诱导宿主细胞IL-1β的释放,从而在炎症反应中发挥作用。本研究为深入研究MG致病机制提供了实验依据。
- 张琳陈莹朱可蒙赵雅芝潘巧郝文君于颖辛九庆
- 关键词：鸡毒支原体IL-1ΒP65NF-ΚB
- 高致病性PRRSV HuN4株不同代次病毒对仔猪胸腺损伤的研究被引量：2
- 2014年
- 为研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)不同致弱代次病毒对断奶仔猪胸腺的损伤,本研究选用HP-PRRSV HuN4株在Marc-145细胞中传代致弱的F5、F15、F23、F30代及弱毒疫苗HuN4 F112代分别接种30日龄的PRRSV抗原及抗体阴性健康断奶仔猪。实验结果显示:HuN4 F30感染组胸腺的眼观病变、胸腺重量、病理组织学变化、病毒载量及胸腺细胞凋亡比例均与F23感染组有显著差别(p<0.05)。本实验结果表明,HuN4 F23代仍然能够引起仔猪胸腺萎缩并导致机体免疫抑制,而F30代已不能引起断奶仔猪胸腺萎缩现象。因此,HP-PRRSV HuN4 F23、F30代可以作为研究HP-PRRSV HuN4致胸腺萎缩的分子机制的关键代次。本研究为进一步研究HP-PRRSV感染诱导仔猪胸腺萎缩和胸腺细胞凋亡的分子机制奠定了基础。
- 陶冶王刚刘永刚李莉李爱东于颖涂亚斌王淑杰姜成刚蔡雪辉
- 关键词：胸腺萎缩
- 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒对仔猪骨髓感染及损伤的初步研究被引量：2
- 2014年
- 为研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)对断奶仔猪骨髓的损伤,本研究采用HP-PRRSV HuN4株接种30日龄的PRRSV抗原及抗体阴性的健康断奶仔猪,并在病毒感染后10 d检测仔猪骨髓内病毒感染及细胞凋亡情况。PCR和间接免疫荧光试验结果显示HuN4株感染仔猪骨髓内存在病毒;流式细胞计数分析和TUNEL法检测结果显示病毒感染仔猪的骨髓内出现大量的凋亡细胞。本实验结果表明,HP-PRRSV能够感染仔猪骨髓,引起仔猪骨髓损伤并导致机体免疫抑制。本研究为进一步探索HP-PRRSV感染诱导仔猪中枢免疫器官的损伤机制奠定了基础。
- 李莉王刚刘永刚李爱东陶冶佟杰于颖涂亚斌王淑杰孙明霞姜成刚蔡雪辉
- 关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒骨髓细胞凋亡
