丁骅孙 作品数:41 被引量:239 H指数:9 供职机构: 云南大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 云南省应用基础研究基金 国家科技重大专项 中央级科研院所科技基础性工作专项 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 轻工技术与工程 化学工程 更多>>
松茸菌丝体分离的初步研究 被引量:13 2000年 本文应用改良的滨田氏松茸菌培养法对珍稀濒危的食用菌松茸进行了菌丝体的组织分离及孢子分离 ,获得了松茸组织分离纯培养菌丝体。比较了几种不同成分的培养基的分离效果 ,并对所获菌丝体的形态特征进行了初步研究 ,经 2 6代移种驯化 ,其中 2支松茸组织分离菌丝体性状稳定 。 沙涛 丁骅孙关键词:松茸 孢子分离 出芽短梗霉原生质体再生变异菌株的同工酶及可溶性蛋白的研究 被引量:3 2000年 用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对出芽短梗霉的亲本菌株及其 4株原生质体再生菌株的脂酶、谷氨酸脱氢酶、细胞色素氧化酶和可溶性蛋白进行了比较。发现各变异菌株之间 ,变异菌株与亲本菌株之间的谱带均有差异 ,原生质体再生菌株的变异涉及酶蛋白的改变。 张汉波 沙涛 程立忠 丁骅孙关键词:出芽短梗霉 再生菌株 同工酶 可溶性蛋白 丙酮沉淀法提取中性β-甘露聚糖酶的条件研究 被引量:12 2000年 利用丙酮沉淀提取枯草芽孢杆菌 (Bacillussubtilis)K3- 14发酵产生的中性 β -甘露聚糖酶 ,- 2 0℃时V(发酵液 )∶V(丙酮 )用量为 1∶1.0时 ,提取率为 82 .5 7% ,固体酶制剂酶活力为 19.43万U/g ,1∶2 .0时提取率为 95 .40 % ,所得固体酶净重增加 ,酶活力下降为 8.6 2万U/g ;在 - 2 0℃低温下丙酮对酶的提取影响较小 ,12h内提取率从 97.34 %下降到 87.89% ,下降 9.71% ,而 30℃丙酮对 β -甘露聚糖酶提取影响大 ,从 90 .31%下降到 41.89% ,下降 5 3.6 2 % ,但在 4h以内酶提取率仍能保持在 78.93%以上 ,此工艺在工业上是可行的 . 程立忠 张理珉 丁骅孙 沙涛 张汉波关键词:Β-甘露聚糖酶 丙酮 出芽短梗霉原生质体再生变异菌株和亲本菌株的比较研究 被引量:3 1996年 从出芽短梗霉(Aureobasidiumpullulans)原生质体再生菌株中获得了4个变异菌株,它们在碳源同化、生长速度、呼吸强度、菌落及细胞形态等特征上均有差异,与亲本菌株也互不相同.在不同的液体培养基中摇瓶培养,多糖产量和产色素变化较大。 张汉波 丁骅孙 程立忠 赵之伟 沙涛关键词:原生质体 再生菌株 出芽短梗霉 利用松茸ITS特异性引物对松茸分离物进行鉴定 被引量:16 2004年 利用一对ITS通用引物 (ITS4 ITS5 )和一对松茸物ITS特异性引物 (TMF TMR)对来源于云南省不同地区的 6个松茸 (Tricholomamatsutake)子实体及其 6株分离物 ,3个假松茸(Tricholomabakamatsutake)子实体及其 3株分离物、侧耳 (Pleurotusostreatus)、金针菇 (Flam mulinavelutipes)和双孢蘑菇 (Agaricusbisporus)的子实体进行了PCR扩增 ,琼脂糖凝胶电泳分析 ,结果表明ITS4 ITS5能将所有的样品扩增 ,并得到 6 0 0bp左右的DNA扩增条带 ,TMF TMR扩增时 ,只有松茸子实体及其对应分离物有扩增条带 ,DNA片段大小在 5 0 0bp左右。进一步对松茸子实体 (TG2 5 )及其分离物 (TM2 5 112 2 )进行ITS序列测定表明两者的DNA同源性为 10 0 % ,从而证明所分离到的 6个菌株确为松茸的纯培养物。 沙涛 丁骅孙 张汉波 王敏艳 程立忠 赵之伟关键词:松茸 子实体 分离物 ITS DNA片段 松茸菌丝原生质体形成与再生条件的研究 被引量:4 2001年 采用多因素实验正交优选法比较不同酶、渗透压稳定剂、菌丝生理状况、菌丝培养基、预处理液和酶解时间等因素对松茸原生质体形成的影响和再生培养基、明胶、酪蛋白对松茸原生质体再生的影响。以 0 6MMgSO4 作为渗透压稳定剂 ,2 -硫基苏糖醇为预处理液 ,用 2 %蜗牛酶在 30℃酶解 6h ,每克菌丝可以得到 1× 10 6 个原生质体。再生最优条件 :0 6MMgSO4 ,PDY再生培养基 ,2 5%明胶 ,松茸菌丝再生率最高 4 97%。 沙涛 张汉波 丁骅孙 程立忠 周帼萍 陈虹颖 朱宏关键词:松茸 原生质体 菌丝 云南松蠹害枝梢虫坑真菌类群初步研究 被引量:3 1998年 对滇中地区受纵坑切梢小蠹危害的云南松枝梢,分别于不同蠹害期进行抽样调查,从枝梢虫坑中分离到33属真菌,分属14科.其中,腐生真菌为15属,寄生或腐生真菌10属,寄生真菌8属.发现不同样点、不同蛀梢时期和不同危害程度样区虫坑优势菌群表现出明显的一致性,它们主要是德巴利氏酵母属、盘多毛孢属、团丝核菌属及芽枝霉属,揭示了优势菌群与蠹害之间存在某种内在联系. 周旭东 叶辉 丁骅孙 沙涛关键词:纵坑切梢小蠹 云南松 真菌 枯草芽孢杆菌β-甘露聚糖酶的三种纯化方法研究 被引量:19 1998年 分别采用硫酸铵盐析法,丙酮沉淀法,聚乙二醇沉淀法对枯草芽孢杆菌(Bacilussubtilis)K3-14菌株发酵产生的β-甘露聚糖酶(β-mannanase)进行提纯.其中硫酸铵盐析法在60%饱和度时提纯9.18倍,比活力为169.20U/mg;丙酮沉淀法在用量体积分数1.0∶1时提纯10.43倍,比活力为192.31U/mg;聚乙二醇沉淀法在0.35g/ml浓度时提纯14.68倍,比活力为270.69U/mg.提纯后的β-甘露聚糖酶制品经电泳鉴定呈四条蛋白带. 蒋燕军 程立忠 丁骅孙关键词:Β-甘露聚糖酶 枯草芽孢杆菌 纯化 切梢小蠹伴生真菌发生及病害特征的初步研究 被引量:6 2000年 Information of Ophiostoma minus in Yunnan of China was provided, which includes the geographical distribution, pine tree hosts, relatedness with bark beetles and temperatures, and the pathogenicity features. O. minus was proved to be a fungus associated with Tomicus piniperda and T. minor , exhibiting the positive correlation between beetle damage level and the fungal occurrence. The blue stain fungus in Yunnan was mainly isolated from Pinus yunnanensis , with a few isolations from P. densata and P. kesiya . 叶辉 周旭东 吕军 杨丽源 丁骅孙关键词:云南松 切梢小蠹 病害特征 一种简易的松茸担孢子收集方法 被引量:3 2003年 取松茸子实体的子实层制成粗松茸担孢子悬液 ,采用脱脂棉过滤粗松茸担孢子悬液 ,经 40 0 0r/min3次离心沉淀微生物菌体、 80 μg/mL链霉素对细菌的杀菌作用 ,10 0 0 0r/min离心 ,收集得到纯松茸担孢子。此方法简单、杂菌污染率低、担孢子收集效果明显。 沙涛 程立忠 张汉波 丁骅孙