黄芳芳
- 作品数：20 被引量：232H指数：9
- 供职机构：中国农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 用单克隆抗体鉴定猪繁殖与呼吸综合征病毒分离株被引量：19
- 1998年
- 应用ＰＲＲＳＶ单克隆抗体，采用直接与间接免疫荧光抗体试验对分离获得的ＰＲＲＳＶ６个毒株进行了鉴定，结果所有分离毒株均能被单克隆抗体（ＳＤＯＷ１７、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ）所识别，呈现特异荧光，６个分离毒株均能与仅识别美洲型ＰＲＲＳＶ的单克隆抗体Ｆ反应，结果表明６个分离毒株均属于美洲型ＰＲＲＳＶ。利用微量细胞培养对分离毒株ＴＣＩＤ５０测定结果表明，６个分离毒株的ＴＣＩＤ５０分别为１０－７．５／０．１ｍｌ、１０－７．５／０．１ｍｌ、１０－７．５／０．１ｍｌ、１０－７．７５／０．１ｍｌ、１０－７．２５／０．１ｍｌ、１０－６．２５／０．１ｍｌ。病毒感染细胞的超薄切片电镜观察表明，在感染细胞浆内可见典型的ＰＲＲＳＶ病毒粒子，呈球形或椭圆形，直径约为６０ｎｍ左右，可见囊膜。
- 杨汉春黄芳芳张旭田海燕查振林
- 关键词：繁殖呼吸综合征病毒单克隆抗体猪病
- 核酸探针检测人工感染猪及死胎的猪繁殖与呼吸综合症病毒
- 任慧英杨汉春张晓梅李华黄芳芳陈艳红
- 利用反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）技术扩增出猪繁殖与呼吸综合症病毒（PRRSV）美洲株ATCC VR-2332 ORF6及部分ORF7 586 bp的cDNA。将PCR产物连接进线状克隆载体 pGEM-T eas...
- 关键词：
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合症病毒病毒检测核酸探针地高辛标记探针
- PRRSV BJ-4株全基因组序列测定与分析
- 以美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ARCC VR-2332株基因组序列为参照,利用Oligo4.0软件设计21对特异引物,用于分段扩增PRRSV BJ-4株基因组cDNA.采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR...
- 黄芳芳
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组序列RT-PCR序列测定与分析
- 文献传递
- PRRS病毒核衣壳蛋白在大肠杆菌中的高效表达被引量：18
- 2001年
- 用表达非融合蛋白的原核表达载体 p BV2 2 0 ,通过 PCR技术的引物设计对猪繁殖与呼吸综合征( PRRS)病毒 BJ-4株核衣壳蛋白 ( N)基因起始密码子上游进行了改造和修饰 ,成功地构建了含有 PRRS病毒 N基因的原核重组表达载体 p BV-N。 p BV-N转化大肠杆菌 DH5α,温度诱导后菌体裂解物经 SDS-PAGE分析发现 ,在约 1 5 0 0 0处出现 1条诱导前后的 p BV2 2 0载体对照和诱导前的 p BV-N中均缺少的特异性的蛋白条带 ,分子量大小与 PRRS病毒 N蛋白相符 ,并随着诱导时间的延长而变化 ,在诱导后 4 h达到高峰。薄层扫描结果显示 ,重组 N蛋白表达量最多可占菌体总蛋白的 2 7.4 %。 Western-blotting检测 ,此 1 5 0 0 0的蛋白带可为 PRRS病毒 N蛋白的单克隆抗体所识别 ,表明该重组
- 高云杨汉春刘平黄陈声郭鑫韩军黄芳芳
- 关键词：PRRS病毒核衣壳蛋白原核表达PBV220猪繁殖与呼吸综合征PRRS
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒感染抑制猪瘟疫苗的免疫应答被引量：60
- 2001年
- 对 2 0日龄 SPF猪和 2 0日龄猪繁殖与呼吸综合征 ( PRRS)血清阳性猪 ,人工感染猪繁殖与呼吸综合征病毒 ( PRRSV)北京分离株 ( BJ-4 )后 4 8h接种猪瘟疫苗 ,利用 ELISA方法检测仔猪针对 PRRSV和猪瘟疫苗的体液免疫 ,利用 MTS法检测仔猪外周血单核细胞对有丝分裂原 Con A的刺激反应。结果表明 ,不论是SPF仔猪还是带有 PRRSV抗体的仔猪 ,在鼻内接种 PRRSV后 4 8h接种猪瘟疫苗 ,其对猪瘟疫苗的抗体反应显著低于对照组 ,对有丝分裂原 Con A的刺激反应也下降。由此说明 。
- 李华杨汉春黄芳芳刘平黄高云陈艳红
- 关键词：繁殖呼吸综合征病毒猪瘟疫苗免疫抑制
- PRRS病毒M蛋白在大肠埃希氏菌中的高效表达被引量：10
- 2001年
- 将猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV )ORF6基因从 pGEM T ORF6重组质粒中亚克隆到pET 5а原核表达载体上 ,成功构建重组表达质粒pET5 ORF6。将其转化大肠埃希氏菌BL2 1(DE3 )感受态细胞 ,重组菌经IPTG诱导表达 ,其细菌裂解物经SDS PAGE可检测到分子质量约为 19ku的目的蛋白带 ,经薄层扫描分析 ,目的蛋白占菌体总蛋白的2 6.8% ,采用重组菌裂解物作为包被抗原进行ELISA检测 ,结果表明表达的蛋白显示特异性。
- 陈声杨汉春黄芳芳郭鑫陈艳红
- 关键词：繁殖呼吸综合征病毒M蛋白免疫原性
- PRRSV感染SPF仔猪血液中细胞因子和一氧化氮的动态被引量：5
- 2001年
- 利用生物学和免疫学方法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV) BJ- 4株感染仔猪血清中 TNF-α的变化 ,结果显示 ,感染后 TNF- α水平明显上升 ,外周血单核细胞产生 Th1型细胞因子 IL- 2的能力增强。比色法检测仔猪感染后血浆中 NO的变化 ,发现 NO在病毒感染后略有增高。TNF- α升高可能使内皮细胞受到损伤 ,导致机体对其他病原体的易感性增强。 NO可反馈性地抑制巨噬细胞的功能和 T细胞增殖 ,使
- 李华杨汉春郑洁王彬刘平黄黄芳芳高云
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞因子TNF-ΑIL-2
- 表达PRRSVE基因重组质粒在小鼠诱导的体液免疫应答被引量：2
- 2004年
- 利用 PCR技术对猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV) BJ- 4株的 E基因进行修饰和改造 ,在 E基因上游加入 Kozak序列 ,扩增并克隆 E基因。将 E基因 c DNA亚克隆至真核表达载体 pc DNA3.1(+)中 ,构建了真核重组表达质粒 pc DNA- E。用pc DNA- E免疫小鼠 ,经免疫荧光抗体试验检测结果表明 ,重组质粒 pc DNA- E经 3次免疫后 ,所有小鼠血清抗体均为阳性 ,说明pc DNA- E在小鼠体内可诱导特异性的体液免疫应答反应。
- 高云杨汉春刘平黄陈声郭鑫韩军黄芳芳
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒E基因重组质粒体液免疫应答
- 猪血液和淋巴组织中淋巴细胞亚群表型分布
- 李华杨汉春张晓梅黄芳芳陈艳红郭玉璞
- 该研究利用CD3、CD4及CD8单克隆抗体对猪外周血淋巴细胞、胸腺细胞、扁桃体和肠系膜淋巴结淋巴细胞的组成进行了流式细胞仪分析。结果表明，胸腺中大胸腺细胞和小胸腺细胞的CD3、CD4及CD8的表达不同，在大胸腺细胞中，C...
- 关键词：
- 关键词：胸腺细胞淋巴细胞
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒感染抑制猪瘟疫苗的免疫应答
- 2005年
- 对20日龄SPF猪和20日龄猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)血清阳性猪，人工感染猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)北京分离株(BJ-4)后48小时接种猪瘟疫苗，利用ELISA方法检测仔猪针对PRRSV和猪瘟疫苗的体液免疫，利用MTS法检铡仔猪外周血单核细胞对有丝分裂原ConA的刺激反应。结果表明，不论是SPF仔猪还是带有PRRSV抗体的仔猪，在鼻内接种PRRSV后48小时接种猪瘟疫苗，其对猪瘟疫苗的抗体反应显著低于对照组，对有丝分裂原ConA的刺激反应也下降。由此说明，PRRSV感染使仔猪对猪瘟疫苗的免疫应答受到抑制。
- 李华杨汉春黄芳芳刘平黄高云陈艳红
- 关键词：繁殖呼吸综合征病毒猪瘟疫苗免疫应答免疫抑制作用
