黄永东
- 作品数：58 被引量：52H指数：5
- 供职机构：中国科学院过程工程研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学理学医药卫生化学工程更多>>
- 一种分离纯化汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原的方法
- 本发明涉及一种分离纯化汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原的方法，其集成了细胞破碎、层析和膜分离等技术，具体包括：将常规工艺发酵培养得到的汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原培养液破碎至细胞破碎率达到50～90%；离心除去细胞碎片，...
- 闭静秀周卫斌苏志国李岩黄永东赵岚张焱
- 文献传递
- 新型耐碱蛋白A介质的制备与性能
- 2019年
- 以蛋白A结构中耐碱性更好的C区为基础,构建一种新型耐碱蛋白A,并偶联至琼脂糖基质,获得新型耐碱蛋白A亲和层析介质,分别用激光共聚焦显微镜和石英晶体微天平研究了人免疫球蛋白(h Ig G)与蛋白A介质的结合过程。结果表明,该介质具有较商品配基更高的结合力和稳定的再生性能,hIgG动态载量达62.0 mg/mL,40次再生操作后载量为初始载量的84%。该介质在抗体纯化领域具有较好的应用前景。
- 韦巍黄永东赵岚吴学星朱天孝李冬雪靳海波张荣月苏志国马光辉
- 关键词：层析介质
- 一种IgG抗体亲和的小分子肽及其应用
- 本发明涉及一种IgG抗体亲和的小分子肽，所述肽的通式为：FYX<Sub>1</Sub>X<Sub>2</Sub>X<Sub>3</Sub>X<Sub>4</Sub>其中，F为苯丙氨酸，Y为酪氨酸，X<Sub>1</Sub...
- 马光辉郝冬霞黄永东赵岚王伟颖葛佳苏志国周炜清
- 文献传递
- 快速膜乳化技术制备均一小粒径复合多糖微球及其色谱性能评价被引量：2
- 2019年
- 采用快速膜乳化技术制备均一小粒径复合多糖微球,重点探究膜乳化工艺关键参数和微球固化冷却工艺等对微球形貌、粒径及其分布的影响,以及制备工艺对微球耐压性能的影响,在此基础上制备粒径均一、耐压性能良好的小粒径复合多糖微球。色谱研究表明,该均一小粒径复合多糖微球具有较高的色谱分离度,在高分辨率色谱领域具有良好的应用前景。
- 张洪武赵岚赵岚黄永东朱天孝李冬雪张荣月苏志国苏志国马光辉
- 关键词：分离纯化
- 高流速琼脂糖层析介质的制备与应用研究
- 本研究集中于高流速琼脂糖层析介质的制备与应用。本研究的思路是先对琼脂糖溶液进行双键活化剂改性，再进行乳化成球，最后再对制得的改性型白球进行交联得到比常规琼脂糖介质更高强度的高流速琼脂糖层析介质。并对改高流速琼脂糖层析介质...
- 吴学星黄永东赵岚苏志国马光辉
- 席夫碱法制备大孔聚合物肝素亲和层析介质
- 2024年
- 肝素亲和层析介质因其专一性好、操作条件温和等特点,广泛应用于蛋白分离纯化,本工作以大孔聚丙烯酸酯微球为基质,肝素为配基,利用席夫碱法制备了肝素亲和层析介质。配基偶联经过三步完成,首先将大孔聚丙烯酸酯微球表面环氧基团通过0.5 mol/L H_(2)SO_(4)水解为邻羟基,然后将邻羟基氧化为醛基,最后利用醛基与肝素分子的胺基反应将肝素分子固定于微球表面。以溶菌酶为模型蛋白,主要考察了肝素偶联反应的各因素对蛋白结合容量的影响规律,包括肝素浓度、缓冲液pH及浓度、反应时间等,建立了最优偶联肝素配基的方法。所得亲和介质静态结合容量可达40.3 mg/mL,比商品GP-肝素介质高约36%,经1.0 mol/L的氯化钠洗脱,其蛋白回收率达到95%。通过扫描电子显微镜表征微球表面形貌,观察到偶联肝素后的微球仍能保持其大孔结构。考察了该类亲和介质在不同操作流速(31.8~318 cm/h)下的动态结合容量,发现操作流速提高10倍后介质结合容量仅下降12%。经10次重复使用后,动态结合容量仍可保持初始容量的81%。用于混合蛋白模型中分离乳铁蛋白,结果表明具有良好的分离效果。
- 古嘉如王楠马磊乔娟靳海波何广湘赵岚黄永东张荣月
- 关键词：肝素
- 多级逆流固液提取技术提取大豆分离蛋白被引量：3
- 2011年
- 采用液相色谱和生物质谱技术对豆粕中不同蛋白质在提取过程中的释放行为进行了研究,并将多级逆流固液提取技术用于大豆分离蛋白提取.结果表明,豆粕中的2S组分由于分子量低和高水溶性在提取过程中释放速率较快,提取2次总释放量超过80%,3次提取7S和11S组分总释放量约为69%,提高固相和液相间7S和11S的浓度梯度或延长提取时间有助于7S和11S组分释放.采用该提取技术可提高提取液中的总蛋白浓度,在相同蛋白质收率下可节水11%,同时较高的蛋白质浓度可增加酸沉过程中蛋白质收率.
- 高建萍刘琳张贵锋王明林黄永东刘永东苏志国
- 关键词：大豆分离蛋白
- 一种聚苯乙烯类材料的亲水改性方法及其产品
- 本发明提供了一种聚苯乙烯类材料的亲水改性方法及其产品，所述方法为：对交联度在20％以上的聚苯乙烯类材料所含的芳香环和残留乙烯基双键进行亲水改性，得到亲水改性的苯乙烯类材料。该方法可以实现对聚苯乙烯类材料内部和表面的疏水芳...
- 马光辉李强巩方玲黄永东赵岚
- 文献传递
- 聚甲基丙烯酸缩水甘油酯类或其共聚物的亲水改性方法及改性所得材料
- 一种交联聚甲基丙烯酸缩水甘油酯类或其共聚物的亲水改性方法及材料，所述方法为：利用交联聚甲基丙烯酸缩水甘油酯类或其共聚物表面的活性环氧基团多次共价交联天然多糖分子进行亲水改性，得到聚甲基丙烯酸缩水甘油酯类或其共聚物的亲水改...
- 马光辉李强张坤赵岚黄永东周炜清吴学星朱凯
- 文献传递
- 基于疫苗颗粒完整性的硅胶吸附/解吸附纯化重组乙肝表面抗原工艺研究
- 2020年
- 针对重组汉逊酵母乙肝表面抗原(HBsAg)在传统纯化过程中稳定性差的问题,采用静态光散射、荧光光谱和动态光散射等分析手段,从颗粒完整性角度研究其在不同pH条件下的稳定性变化。以其为指导,采用硅胶吸附/解吸附纯化HBsAg,建立该过程中关键因素的响应面模型,并与疏水层析联用,进一步纯化HBsAg,分析纯化效果以及纯化后疫苗颗粒完整性。采用透射电镜观察纯化后疫苗形貌,用高效分子排阻色谱法(HPSEC)分析颗粒稳定性。结果表明在酸性溶液下,pH接近HBsAg等电点时,抗原颗粒间静电斥力减小,颗粒容易聚集;碱性条件下,抗原颗粒内部疏水基团暴露,造成颗粒解聚。建立响应面模型,以活性收率为响应值时,最佳纯化工艺为吸附pH=7.43,洗脱pH=10.48,洗脱温度55.4℃,此时活性收率最高为39.1%;以纯化倍数为响应值时,吸附pH=7.16,洗脱pH=10.52,洗脱温度55.1℃,此时纯化倍数最高为1.90。进一步对洗脱液进行疏水层析纯化,活性收率为49.73%,颗粒完整性为85.79%,透射电镜观察到抗原颗粒粒径为20~40 nm。与传统疏水层析方法相比,采用硅胶吸附/解吸附与疏水层析联用的纯化方法,疫苗活性收率提高31.99个百分点,颗粒完整性提高20.90个百分点,颗粒稳定性提高22.93个百分点。该研究为高效纯化重组HBsAg及提高疫苗纯化过程的颗粒完整程度等提供新思路。
- 胡胜杰黄永东赵岚朱凯苗壮王飞晋洪超李建杨珺汪和睦马光辉袁洪水
- 关键词：乙肝表面抗原响应面法疏水层析
