高艳
- 作品数：8 被引量：36H指数：4
- 供职机构：中日友好医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
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- 硅化超顺磁氧化铁纳米颗粒标记人羊膜间充质细胞的效率及其对细胞增殖的影响被引量：4
- 2010年
- 旨在探讨一种新型硅化超顺磁性氧化铁纳米颗粒标记人羊膜间充质细胞的最佳方法,并检测其对细胞增殖的影响.用不同浓度的Si-SPIO和多聚赖氨酸混合制备PLL-Si-SPIO复合物,标记体外培养的hAMCs.利用普鲁士蓝染色和透射电子显微镜等方法对Si-SPIO的标记情况进行分析鉴定.分析Si-SPIO标记后1~4周铁颗粒在细胞内的维持与稳定.应用MTS分析法探讨经Si-SPIO标记后hAMCs的增殖活性.Si-SPIO标记后的hAMCs移植到小鼠纹状体内1周,鉴定Si-SPIO阳性细胞的存活与分布.观察发现,hAMCs经Si-SPIO标记后细胞内可检测到大量铁颗粒,铁颗粒能在细胞内维持4周以上.Si-SPIO标记具有浓度依赖性,最适浓度为20μg/mL;较低浓度的Si-SPIO对细胞增殖活力没有显著影响.移植到小鼠脑内1周后可见Si-SPIO阳性细胞.结果可知,浓度为20μg/mL的Si-SPIO标记hAMCs可获得良好的标记效果,并且不影响细胞的增殖活力.
- 张可华郭丽丽蔡哲潘琳程立明舒峻李荣旗陈瀛欧华黄小杰张向利张红霞刘佳新左和鸣徐扬高艳崔晓惠
- 关键词：细胞标记
- 人羊膜上皮细胞分离的正交法研究
- 2009年
- 目的:研究人羊膜上皮细胞(hAECs)分离的适宜条件。方法:采用正交试验的方法,以L9(34)正交表安排影响hAECs分离的几个主要因素,每组实验所得细胞计数并培养24h后,收集悬浮细胞计算细胞贴壁率,培养7d计算扩增细胞数,以此为指标分析各因素对hAECs分离的影响。结果:胰蛋白酶的浓度及消化次数对细胞得量均有显著影响(P<0.05)。结论:应用正交试验法得出hAECs分离的适宜条件为:胰蛋白酶液与羊膜组织体积比为1∶1,胰蛋白酶浓度0.25%,消化时间10min/time,消化4次。
- 张岚舒峻蔡哲付桂香徐杨高艳崔晓惠
- 关键词：人羊膜上皮细胞正交试验法
- 人羊膜间充质细胞向成骨细胞诱导分化的实验研究
- 2011年
- 目的 观察人羊膜间充质细胞（humanamnionmesenchymalcells，hAMCs）体外诱导向成骨细胞分化，为骨组织工程提供种子细胞。方法从剖宫产后废弃的人羊膜组织分离培养hAMCs，经成骨细胞诱导条件培养基诱导后，对细胞形态特征、碱性磷酸酶、骨桥素、骨钙素表达以及I型胶原分泌进行观察和检测。结果原代培养的hAMCs形态呈长梭形或不规则形，呈均匀分布生长，传代后细胞体积略变大，约5～7d传代1次。经成骨细胞诱导培养15d后，hAMCs碱性磷酸酶、骨钙素、骨桥素的表达呈阳性，并且检测有I型胶原分泌。结论hAMCs易于体外分离培养及扩增，体外成骨细胞定向诱导的hAMCs具有典型的成骨细胞的形态和功能性特征，是良好的骨组织工程种子细胞。
- 舒峻郭丽丽张可华蔡哲程立明李荣旗陈瀛潘琳欧华黄小杰张向利徐扬高艳崔晓惠张红霞刘佳新
- 关键词：成骨细胞
- 体外培养人羊膜间充质细胞的神经生物学特点被引量：5
- 2009年
- 目的:探讨体外培养人羊膜间充质细胞(hAMCs)的神经生物学特征。方法:应用MTS分析法、BrdU掺人法和增殖细胞核抗原(PCNA)的免疫荧光染色.探讨体外培养hAMCs的增殖活性。利用免疫细胞化学法检测hAMCs中间充质细胞标记(STRO-1、Vimentin)、神经干细胞标记蛋白(Nestin、PSA-NCAM)、神经细胞标记蛋白(β-tubulin-Ⅲ、TH)和神经分化相关蛋白(math-1、mash-1)的表达。结果:MTS分析法显示hAMCs在接种后第6-8天增殖速度最快,第8-24天活细胞数基本保持稳定;BrdU和PCNA的免疫荧光染色结果显示体外培养hAMCs中具有大量BrdU和PCNA阳性细胞存在;体外培养的hAMCs表达间充质干细胞特异性标记物STRO-1和Vimentin,也表达神经干细胞标记物Nestin和PSA-NCAM,同时还可见神经元特异性标记物β-tubulin-Ⅲ和TH,以及神经元分化相关蛋白math-1和mash-1的表达;体外培养hAMCs中存在有TH/BrdU和β-tubulin-Ⅲ/BrdU双阳性细胞。结论:体外培养的hAMCs表达间充质干细胞、神经干细胞、神经元的特异性标记蛋白,同时具有增殖活性:hAMCs表达神经元分化相关蛋白。
- 胡景伟蔡哲周忠蜀张岚舒峻潘琳黄小杰徐波向青贺春徐杨高艳崔晓慧
- 关键词：神经细胞增殖
- 妊娠中期妇女生活方式及体质量管理现状调查被引量：3
- 2015年
- 目的：调查妊娠中期孕妇的膳食及生活方式现状,以及对孕期体质量增长相关知识的了解程度.方法：采用横断面调查法,对在北京某三级甲等医院产检的308例妊娠中期孕妇进行问卷调查.结果：被调查者普遍表现为膳食结构不均衡,约一半被调查者单种类食物摄入量高于或低于参考量.79.2％的孕妇怀孕后继续工作,52.9％劳动强度为轻度,47.1％从不进行体育锻炼,仅有12.7％每天参加体育锻炼,平均锻炼时间达到每天1.0小时的仅占参加体育锻炼孕妇的12.9％.孕期体质量控制相关知识单项错答率在42.5％ ～ 59.1％.45.5％孕妇在孕早期体质量增长超标.结论：孕中期妇女普遍存在生活方式误区和缺乏体质量管理知识,健康教育应着眼于提高依从性,制定具体化、可操作性强的孕期体质量干预方案,从而有效控制孕期体质量.
- 徐杨陈静高艳郭淑华魏红丽渠玉梅
- 关键词：膳食调查体质量
- 人羊膜组织细胞的神经干细胞特性形态学研究被引量：5
- 2008年
- 目的:利用形态学研究方法,探讨神经干细胞特异性标志蛋白的表达和增殖分化特性,鉴定人类羊膜组织中神经干/前体细胞的存在。方法:利用免疫组织化学法,检测人类羊膜组织和培养人类羊膜细胞中nestin、musashi-1、vimentin和PSA-NCAM等神经干细胞特异性标志蛋白的表达,利用BrdU掺入实验鉴定羊膜组织来源神经干/前体细胞的增殖分化能力。结果:免疫组织化学检测证实人羊膜组织表达nestin、musashi-1、CD133和vimentin等神经干细胞特异性标志蛋白,主要分布于羊膜组织的间质层。培养羊膜细胞的免疫荧光化学染色显示nestin、musashi-1、vimentin和PSA-NCAM阳性细胞的存在。BrdU掺入的组织形态学实验显示培养羊膜细胞中存在BrdU标记阳性细胞,其中具有BrdU与nestin、musashi-1、vimentin双标阳性细胞,显示羊膜细胞中存在具有增殖活性神经干细胞标记蛋白表达阳性细胞;而BrdU与β-tubullinIII、TH和GFAP双标阳性细胞的存在,表明神经元和胶质细胞是由培养羊膜细胞增殖分化的。结论:羊膜组织中存在神经干细胞特异性标记蛋白Nestin、Musashi-1、CD133、PSA-NCAM和Vimentin表达阳性细胞,BrdU掺入的组织形态学结果不仅证实羊膜细胞中Nestin、Musashi-1、Vimentin阳性细胞具有增殖活性,而且其中存在已分化的神经元和胶质细胞,提示羊膜组织细胞内存在神经干/前体细胞。
- 蔡哲舒峻潘琳张岚徐波郭艳如黄小杰向青耿同超胡景伟周忠蜀徐杨高艳崔晓惠
- 关键词：羊膜细胞巢蛋白
- 人羊膜间充质细胞的神经生物学特性及其治疗帕金森模型小鼠的实验研究被引量：7
- 2010年
- 目的评价人羊膜组织来源间充质细胞(hAMCs)的神经生物学特性及其脑移植对帕金森病(PD)小鼠的治疗观察。方法应用免疫细胞化学染色,通过间充质干细胞、神经干细胞、多巴胺能神经元和神经发生相关标记物Vimentin、STRO-1、nestin、CD133、β-tubulin、TH、DAT、Ngn2和mash-1抗体,鉴定在hAMCs中的表达;RT-PCR检测神经干细胞标记物Vimentin及nestin mRNA在hAMCs的表达。C57BL/6小鼠MPTP(i.p.)建立PD模型,将hAMCs移植到右侧纹状体内。通过自发运动和转杆实验以及抗人线粒体和TH抗体在脑纹状体免疫组织化学形态学,评价hAMCs对PD小鼠的治疗作用。结果经神经细胞培养基诱导培养后的hAMCs表达间充质干细胞、神经干细胞、多巴胺能神经元和上述所有与神经发生相关的特异性标记物。hAMCs移植后的PD小鼠自发运动次数增加(P<0.05),转杆时间延长(P<0.05)。结论hAMCs经体外诱导培养后具有神经细胞特性,移植到PD模型小鼠纹状体内能够改善MPTP所致的运动功能损伤。
- 蔡哲周忠蜀向青胡景伟潘琳张岚舒峻徐波梁妍左萍萍贺春徐杨高艳崔晓慧
- 关键词：脑移植帕金森病多巴胺
- CCK-8和MTS法检测人羊膜上皮细胞增殖的比较被引量：15
- 2012年
- 目的探讨CCK-8、MTS两种不同的四唑盐试剂在羊膜上皮细胞增殖检测中的最适实验条件,并比较两者细胞毒性。方法取体外培养对数生长期羊膜上皮细胞,用完全培养基（DMEM/F12＋10%胎牛血清）配制成不同浓度的细胞悬液加入96孔板中培养24 h,分别加入CCK-8、MTS后于450 nm、492 nm波长处测定光密度（OD）。在同一细胞浓度下,根据同一波长不同时间检测的OD确定CCK-8的最佳孵育时间。取体外培养的对数生长期羊膜上皮细胞分别用DMSO、CCK-8、MTS处理1 h、2 h、3 h和4 h后,继续培养24 h,在450 nm处以CCK-8检测细胞增殖,并通过台盼蓝染色计数活细胞数。结果 CCK-8法的最佳波长为450 nm,MTS法的最佳波长为492 nm。CCK-8法灵敏度稍低于MTS法。1~4 h内,CCK-8试剂与待检测细胞最佳孵育时间为4 h。CCK-8法对细胞增殖影响及细胞毒性均小于MTS法。结论 CCK-8法是一种更为方便、细胞毒性作用较小的试剂。
- 刘艳秋张可华王运良舒峻来薛吴立群曹善霞李鸿徐扬高艳崔晓惠左和鸣蔡哲
- 关键词：MTSCCK-8羊膜上皮细胞细胞增殖细胞毒性
