马晓辉
- 作品数：3 被引量：6H指数：1
- 供职机构：同济大学附属同济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 内皮抑素基因重组腺病毒载体的构建及其对新生血管的影响被引量：1
- 2008年
- 目的构建腺病毒介导的小鼠内皮抑素并观察其在体内、外的表达及对血管的抑制作用。方法以mEndostatin质粒为模板通过PCR方法扩增回收mEndostatin基因,将mEndostatin基因连接到腺病毒载体DC315中,构建PDC315-mEndo表达质粒。将此表达质粒与腺病毒重组质粒pBGHE3通过lipofectamine 2000共同转染293细胞,经同源重组产生重组腺病毒Ad-mEndo,用氯化铯密度梯度超速离心法纯化。用50%组织培养感染剂量法测定病毒滴度。体外转染骨肉瘤细胞株MG-63,用western印迹检测感染的骨肉瘤细胞上清夜mEndostatin的表达并通过鸡胚绒毛尿囊膜实验(chorioallantoic membrane,CAM)观察其抑制血管生成的活性。结果酶切、PCR及DNA测序鉴定表明成功构建了携带内皮抑素(Endostatin,ES)融合基因的重组腺病毒载体,而在鸡胚绒毛尿囊膜血管生成实验中加入培养物上清的实验组与对照组相比鸡胚尿囊膜血管密度稀疏,平均血管数差异明显(P<0.01)。结论腺病毒介导的小鼠内皮抑素基因在体外获得高效表达,并可显著抑制血管生成。
- 窦帮马晓辉梅炯童天朗蔡宣松
- 关键词：腺病毒载体内皮抑素抗血管生成
- 腺病毒介导小鼠内皮抑素对荷骨肉瘤裸鼠肺转移抑制的研究
- 通过抗肿瘤血管生成治疗肿瘤远处转移有正相调控和反相调控两种方式，正相调控简单易行，效率较高，但反相调控更为直接，鉴于骨肉瘤原发灶，转移灶及内皮抑素(endostatin,ES)可能有密切的关系。本文通过构建腺病毒介导的小...
- 窦帮马晓辉梅炯童天朗蔡宣松
- 关键词：骨肉瘤内皮抑素抗肿瘤血管生成细胞病理学
- 文献传递
- 重组腺病毒介导小鼠内皮抑素对荷骨肉瘤MG-63细胞裸鼠肺转移的抑制被引量：5
- 2008年
- 目的:构建携小鼠内皮抑素(endostatin,ES)基因的重组腺病毒载体,观察其对荷骨肉瘤裸鼠肺转移的抑制,探讨内皮抑素表达水平与骨肉瘤肺转移的关系。方法:构建pDC315-mEndo表达质粒,同源重组产生重组腺病毒Ad-mEndo。裸鼠右前肢皮下注射骨肉瘤MG-63细胞建立移植瘤裸鼠模型;随机分为4组:小鼠内皮抑素腺病毒(Ad-mEndo)组,携带EGFP基因腺病毒(Ad-EGFP)组,PBS组,未接种肿瘤细胞裸鼠空白对照组。各组裸鼠每周分别注射相应药物200μl,连续5次,观察各组动物移植瘤体积、瘤组织病理,ELISA法检测各组裸鼠血ES水平;7周后处死动物,观察有无肺转移及肺转移灶病理。结果:Ad-EGFP组肿瘤体积为(1.53±0.05)cm3,PBS组为(1.56±0.07)cm3,Ad-mEndo组为(0.91±0.03)cm3,Ad-mEndo治疗的抑瘤率达40.7%。Ad-mEndo组裸鼠血内皮抑素表达水平明显高于Ad-EGFP组和PBS组(P<0.05)。Ad-mEndo组裸鼠肺部未发现肿瘤转移灶,其他两组肺部见大量散在转移灶,肺转移率分别为80%和90%。未发生肺转移裸鼠的ES水平显著高于发生肺转移的裸鼠(P<0.05)。结论:腺病毒介导的小鼠内皮抑素显著抑制了荷骨肉瘤裸鼠肺转移,内皮抑素表达水平与肺转移有着直接的关系。
- 梅炯窦帮马晓辉童天朗蔡宣松
- 关键词：骨肉瘤内皮抑素肺转移抗血管生成
