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分子伴侣共表达对核糖核酸酶R可溶性表达的影响被引量：2: 2019年; 核糖核酸外切酶R(RNase R)可降解几乎所有的线性RNA分子和Y结构RNA,但不易降解环形RNA(circ RNA)、套索结构(lariatRNA)和3’突出末端少于7个核苷酸的双链RNA分子,因此可以构建内含子c DNA文库用于可变剪切研究。本研究构建了含rnr基因的重组表达质粒pET-22b(+)-rnr,并将其表达产物纯化后通过SDS-PAGE分析和酶活性评价,确认rnr基因在大肠杆菌中已实现表达。之后构建4种分子伴侣共表达系统(pGro7、pKJE7、pTf16和pG-Tf2)。4种分子伴侣质粒分别与重组表达质粒pET-22b(+)-rnr共表达,筛选最适分子伴侣质粒,并优化共表达条件,提高目的蛋白可溶性表达。实验表明,分子伴侣质粒pGro7使蛋白表达量提高了43.80%,效果最为显著;20℃诱导时目的蛋白的可溶性表达最高;当L-阿拉伯糖浓度为0.50 mg/mL时,分子伴侣质粒pGro7使蛋白表达量提高了54.50%。通过使用分子伴侣共表达系统及优化表达条件提高了RNase R的可溶性表达,为该酶进一步研究奠定了基础。; 李轲李站胜韩双艳; 关键词：RNASE 可溶性表达分子伴侣

一种镰刀菌木聚糖酶在改善面粉加工品质中的应用: 本发明公开一种镰刀菌木聚糖酶在改善面粉加工品质中的应用，属于基因工程和谷物科学领域。本发明采用真核表达的方法，获得了具有生物活性的重组镰刀菌木聚糖酶，具有表达量高，纯化简便，易于放大，适合工业化应用等特点。本发明提供了一...; 韩双艳张亚萍赵风光林影郑穗平; 文献传递

脂酶创制及产业化应用关键技术: 林影汪勇潘力韩双艳王斌李小林王小宁詹志春徐怀义周樱张宁郑穗平梁书利; 酶制剂产业具有技术密度高、产业链长、服务行业广等特征。该技术发明通过酶分子改造与催化耦联化快速筛选、表达体系从头构建及发酵产业化共性关键技术突破，及下游应用技术协同创新，解决脂酶在油脂加工、芳香酯合成、白酒生产综合利用及...; 关键词：; 关键词：发酵生产

组成型表达黑曲霉表面展示脂肪酶的重组质粒及其应用: 本发明公开了组成型表达黑曲霉表面展示脂肪酶的重组质粒及其应用。本发明重组质粒是以黑曲霉表面展示载体pCALB‑C为出发质粒，将诱导型启动子葡糖淀粉酶启动子Pgla替换为组成型启动子PgpdA；得到重组质粒pGpdA‐CA...; 林影韩双艳靳坤潘志友郑穗平梁书利; 文献传递

新型DNA疫苗的构建及其对小鼠保护作用的研究被引量：2: 2004年; 目的 :构建新型单纯疱疹病毒Ⅱ型DNA疫苗 ,检测其激发小鼠产生免疫反应的能力。方法 :RT PCR鉴定单纯疱疹病毒Ⅱ型DNA疫苗在COS 7细胞中的表达 ,ELISA检测血清中中和抗体水平 ,病毒攻击检测其保护效应。结果 :DNA疫苗候选株pVAX gD能在COS 7细胞中表达 ,激发小鼠产生高滴度中和抗体 ,有效保护小鼠免受致死量病毒的攻击。结论; 韩双艳郭勇杨慧兰王捷杨太成冼江; 关键词：DNA疫苗 RT-PCR IGG

一种连续合成低聚异麦芽寡糖的方法: 本发明公开一种连续合成低聚异麦芽寡糖的方法。本发明采用醛基修饰壳聚糖磁性载体进一步固定化表面展示有α‑葡萄糖苷酶的重组毕赤酵母。利用载体表面修饰的醛基与酵母表面的糖蛋白共价结合，同时，利用壳聚糖对酵母的吸附作用，达到固定...; 郑穗平林影韩双艳赵难难王框; 文献传递

毕赤酵母壁蛋白Gcw51及其表面展示系统和构建方法: 本发明公开了一种毕赤酵母壁蛋白及其构建的表面展示系统和构建方法。所述巴斯德毕赤酵母壁蛋白的氨基酸序列为SEQNO：1；所述巴斯德毕赤酵母细胞表面展示系统是以所述的巴斯德毕赤酵母壁蛋白Gcw51为锚定蛋白，将靶蛋白固定在巴...; 林影张莉周新莹叶燕锐韩双艳郑穗平

表面展示CALB的毕赤酵母工程菌及催化合成短链芳香酯的方法: 本发明公开了表面展示CALB的毕赤酵母工程菌及催化合成短链芳香酯的方法。该方法将表面展示CALB的毕赤酵母工程菌菌株摇瓶发酵，收获菌体，真空冷冻干燥24h以上，制成全细胞酶制剂；采用短链酸和短链醇为原料，以全细胞酶制剂为...; 林影韩双艳金子黄登峰郑穗平

DNA疫苗经基因枪介导的免疫研究被引量：5: 2004年; 将基因枪介导的DNA疫苗用于小鼠腹部免疫 ,并用免疫组化法检测 gD抗原在接种部位的表达 ,利用ELISA检测血清中的抗 gD抗体 ,并采用病毒攻击检测DNA疫苗对动物的保护效果 .结果表明 ,基因枪可有效地将DNA质粒运送至小鼠皮肤组织 ,DNA疫苗携带的抗原保护基因 gD2糖蛋白能在真皮和肌肉组织中高效表达 .同时 ,免疫小鼠体内产生高滴度的中和抗体 ,能有效抵抗HSV 2病毒的攻击 .; 韩双艳李杰生郭勇杨慧兰王捷杨传红詹纯列; 关键词：基因枪基因表达抗体 DNA疫苗

一种热稳定的果胶裂解酶突变体及其制备方法: 本发明公开了一种热稳定的果胶裂解酶突变体及其制备方法，属于酶工程领域。其中，本发明获得的组合突变体P36、P47和P48，与野生型相比，在75℃下的半衰期由原来的10.48 min分别提高至779.05 min、613....; 韩双艳张智慧杨曼丽李治萱

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