陈金军
- 作品数：33 被引量：43H指数：4
- 供职机构：湖南农业大学更多>>
- 发文基金：湖南省教育厅重点项目国家自然科学基金湖南省科技厅重点项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学轻工技术与工程更多>>
- 一种枯草芽孢杆菌
- 本发明菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)CH-001，已于2011年4月8日保藏于中国典型培养物保藏中心。保藏编号为：CCTCC NO：M 2011111。本发明菌株具有广谱降解角蛋白的特性，降解发...
- 陈金军胡能渊张铁瀚
- 一种枯草芽孢杆菌互补培养的菌种加密性菌剂生产方法
- 一种枯草芽孢杆菌互补培养的菌种加密性菌剂生产方法，包括以下步骤：基因编辑法定向突变和/或敲除生产枯草芽孢杆菌的特定营养基因，构建基因编辑载体；转化目标枯草芽孢杆菌，筛选成功基因编辑的特定营养物依赖型菌作为生产菌；筛选出上...
- 张学文陈金军赵燕罗慧敏黄丽华高晗
- 文献传递
- 生长素在烟草表皮毛中的极性运输及对细胞伸长的影响被引量：2
- 2020年
- 利用生长素极性运输转运蛋白PIN1与增强绿色荧光蛋白EGFP的融合,对PIN1进行了荧光标记,并以烟草表皮毛为模式,开展了PIN1对生长素极性运输及对细胞伸长生长影响的研究。采用DNA重组技术,将融合标记基因EGFP–PIN1置于拟南芥表皮毛特异表达基因GL2的启动子调控下,构建成含GL2pro::EGFP–PIN1的Ti质粒,以根癌农杆菌叶盘共培转化法将重组标记基因转化至烟草WS38中,筛选鉴定出多株转基因烟草。通过对这些转基因烟草表皮毛进行显微荧光观察,结果发现,标记的绿色荧光信号集中分布在表皮毛细胞的间隔区,表现为明显的极性分布现象。用生长素极性运输抑制剂三碘苯甲酸(TIBA)处理后,表皮毛的伸长生长受到抑制,细胞中荧光的分布极性减弱。说明生长素在烟草表皮毛中的极性分布对烟草表皮毛伸长起关键作用,抑制生长素的极性运输不只抑制表皮毛的细胞伸长,同时还影响到生长素极性运输蛋白PIN的极性分布。
- 潘嘉立赵燕黄丽华高晗黄妤陈金军张学文
- 关键词：烟草生长素极性运输表皮毛细胞伸长
- 大学生科创活动与创新创业能力培养研究——以湖南农业大学生物科学技术学院为例被引量：2
- 2018年
- 大学生科创活动是培养大学生创新创业能力的重要方式和手段,是极具前瞻性的举措,因此,举办科技创新创业活动对现代大学生以及国家和社会都有着重要意义。我们通过对湖南农业大学生物科学技术学院的学生进行问卷调查发现,以高校为创新创业平台存在障碍与挑战。主要原因是高校资源不够,并且宣传力度欠缺。根据调查分析,认为清除障碍、提升高校科创活动水平的策略包括加大实验室的开放度与使用度,以及重视实验教学,从而激发学生对创新创业的热情。另外,也需要加强创新创业教育的导师团队建设,整合资源,构建一体化平台。
- 陈金军周漠蔡淑娴张学文
- 关键词：大学生创业就业
- 双分子荧光增强法实时观察烟草BY2细胞内Ca^(2+)信号转导被引量：1
- 2018年
- 钙离子作为第二信使是细胞信号转导的重要成员,也是细胞信号转导研究的重要对象。为了更有效地实时观察植物细胞中的钙离子信号,将响应钙离子的水母素(aequorin, AEQ)基因转化到已由绿色荧光蛋白(GFP)标记的分泌载体膜蛋白SCMP2(secretive carrier membrane proteins2)的烟草BY2细胞(SCAMP2-GFP)。经过对转化细胞的筛选和分子检测,获得了双价转化的BY2细胞株。转化细胞经腔肠素处理并实时显微观察,能较清晰地观察到细胞中钙离子响应的荧光信号,水母素单价转化细胞则几乎观察不到荧光信号,说明水母素响应钙离子并作用于腔肠素所发弱荧光能进一步激发GFP荧光,使弱荧光有效增强。尽管响应钙离子的双价自激发荧光较利用外施激发光对GFP的激发荧光稍弱,但已能满足在显微镜下直接观察和采集信号的荧光强度,实现对细胞内钙离子的实时观察。通过拍照采集钙离子响应的荧光图像,在3倍于外激发的曝光时间条件下获得清晰的荧光图片。以上结果证明了双价标记法能有效地实时观察细胞的钙离子信号。对应于Aequorin与GFP融合表达的体系,双价转化法还能利用GFP不同亚细胞内定位的特定蛋白标记,对亚细胞水平的不同部位开展钙离子信号研究,体现出其优势。
- 翟翔赵燕曹哲高晗徐茂盛黄妤黄丽华陈金军张学文
- 关键词：钙离子信号转导
- 一种重组博落回防御素功能蛋白及其制备方法与应用
- 一种重组博落回防御素功能蛋白的制备方法，包括以下步骤：构建含博落回防御素功能蛋白编码基因的重组表达载体；将上述得到重组表达载体热击转化至酿酒酵母S78构建重组菌；重组菌在YSD液体培养基中发酵培养，表达获得博落回防御素功...
- 陈金军宋南李骞
- 文献传递
- 角蛋白降解的研究现状及应用被引量：5
- 2017年
- 角蛋白是一类有着高度稳定性的结构蛋白,在自然界中分布广泛,普遍存在于羽毛、头发、羊毛等。角蛋白的分子间存在着高度交联的盐键、氢键、二硫键和其他交联键,其结构具有高度稳定性,普通的消化酶很难有效地将其降解,导致其在自然界中长期堆积,产生环境污染,已成为各类蛋白废弃物的榜首。传统的物理化学方法降解角蛋白的效率极低,生成产物不稳定且对环境易产生污染。相比之下,生物降解角蛋白更为理想,不仅反应过程高效、节能,不易造成环境污染,而且反应条件温和,降解产物性质稳定,具有广阔的发展潜力与极高的实用性。本文着重介绍微生物角蛋白酶分子及其降解机理的研究进展,并简述角蛋白及角蛋白酶在医疗、饲料和环境治理等方面的相关应用。
- 徐子龙龙可人李祥富陈金军
- 关键词：角蛋白角蛋白酶理化性质降解机理
- 一种稳定共表达CACNA2D1、GRIN1和GRIN2B的人胚肾细胞株及其构建方法
- 本发明公开了一种稳定共表达CACNA2D1、GRIN1和GRIN2B的人胚肾细胞株及其构建方法，所述人胚肾细胞株的分类命名为人胚肾细胞系HEK293T‑NMDAR‑α2δ1，所述人胚肾细胞株能同时稳定表达CACNA2D1...
- 陈金军唐威杨圣梅潘惠麟张学文周铁安
- 文献传递
- 蜘蛛多肽毒素JZTX-51和JZTX-26的重组表达和纯化被引量：1
- 2018年
- 为建立一种简便、快速且能大量获得富含二硫键的蜘蛛多肽毒素JZTX-26 (35 aa)和JZTX-51 (27 aa)的有效方法,利用PCR的方法克隆成熟肽编码基因并插入至大肠杆菌Escherichia coli表达载体pMAL-p2x中与MBP(麦芽糖结合蛋白)标签融合,构建重组表达质粒pMAL-jz26和pMAL-jz51。在受体菌TB1和BL21(DE3)中对两个重组表达质粒分别进行IPTG诱导表达,通过Amylose亲和层析柱纯化并进行SDS-PAGE分析;采用因子X对融合蛋白进行酶切后通过分子筛以及反相高效液相色谱对两种重组蛋白进行纯化。通过MALDI-TOF-TOF质谱鉴定,表达产物的分子量与预期的多肽理论分子量一致。1L表达培养液中能获得大约5mg纯化的目的蛋白JZTX-26或JZTX-51。结果表明利用该原核表达体系可对蜘蛛毒素基因jztx-26和jztx-51进行融合表达,并对重组蛋白进行亲和层析,为采用基因工程的手段大量获得蜘蛛多肽毒素奠定了基础。
- 邵婕潘娇瞿芳刘子昊丁易颖罗莎张学文陈金军
- 关键词：蜘蛛毒素原核表达融合蛋白钠离子通道
- 黄花蒿腺毛细胞中过表达AaADS基因显著提高青蒿素含量被引量：2
- 2021年
- 为研究青蒿素合成的关键酶基因AaADS过表达对黄花蒿腺毛发育和青蒿素含量的影响,本研究根据GenBank收录的黄花蒿AaADS基因启动子和cDNA序列设计引物,采用同源克隆的方法从黄花蒿品种(428-A)中扩增出AaADS基因启动子和cDNA序列。构建GUS报告载体AaADSpro::GUS和植物表达载体AaADSpro::AaADS,利用农杆菌介导的叶盘转化法转化黄花蒿。通过对转基因植株叶片腺毛的GUS基因活性检测和不同组织器官AaADS基因RT-PCR半定量分析,以及过表达AaADS基因的植株叶片下表皮腺毛荧光显微观察、统计和植株青蒿素含量的测定,结果表明:AaADS基因能在黄花蒿腺毛细胞中高效表达;转基因植株中AaADS基因表达量明显高于对照,且在叶片组织表达量最高;转基因植株叶片腺毛细胞较对照植株明显增大,过表达AaADS基因植株中青蒿素含量达27.3 mg/g DW,比对照植株中青蒿素含量12 mg/g DW提高了2.3倍。本研究说明AaADS基因过表达能有效促进黄花蒿腺毛细胞的生长和青蒿素的生物合成,为选育高青蒿素含量的黄花蒿新品系提供可行性方法。
- 肖楠张学文龙炎杏陈金军谢心赵燕
- 关键词：黄花蒿青蒿素腺毛
