陈少波
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
- 供职机构：中山大学中山医学院更多>>
- 发文基金：广东省医学科学技术研究基金国家教育部博士点基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一种高选择性、高效的牛视网膜微血管内皮细胞培养方法被引量：5
- 2012年
- 目的建立一种高效、可行、特异性高的牛视网膜微血管内皮细胞(BREC)培养方法。方法取新鲜牛眼,分离视网膜并用DMEM进行冲洗、匀浆剪碎,过75μm筛,将滤网上滤渣转移至50ml离心管,用Ⅰ型胶原酶、DNaseⅠ及蛋白酶等多种酶混合液消化20min,人血清中和后,过46μm网筛并冲洗,离心5min,将组织扣在培养皿中,转入15ml离心管,用10%人血清含生长因子ECGS的DMEM培养液培养于25cm2,选择性培养视网膜血管内皮细胞,接种于明胶包被培养瓶中,采用ECGS配合肝素培养液促进内皮细胞生长,观察细胞形状生长特性,并用免疫化学荧光方法进行鉴定。结果选择性培养视网膜微血管内皮细胞成单层、镶嵌铺路石状生长,Ⅷ因子相关抗原免疫荧光检测为阳性纯度均大于95%以上,将细胞种在凝固的基质胶表面,12～18h形成官腔结构。结论本方法过程简单、可靠,培养的内皮细胞纯度高,生长状态良好,稳定传代,为视网膜血管生成疾病研究建立了模型。
- 王征齐炜炜陈少波戴智育陈大伟程锐高国全杨霞
- 关键词：视网膜微血管内皮细胞细胞培养
- 核因子-κB抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸对百草枯中毒后早期肺损伤的影响被引量：1
- 2012年
- 目的观察核因子（NF）-KB抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸（PDTC）对百草枯（PQ）中毒后早期肺损伤的影响。方法64只成年雄性sD大鼠建立PQ肺损伤模型，数字随机法分为PQ＋PDTC和PQ＋PBS组，每组32只。PQ＋PDTC组给予PDTC100mg／kg腹腔内注射，PQ＋PBS组给予PBS腹腔内注射。24、48和72h后观察两组动物存活率，应用苏木精-伊红（HE）染色观察急性肺损伤（AIL）情况并评分；免疫组化检测肺组织炎性细胞浸润；ELISA法检测肺组织内TNF—Ot、IL-6含量和免疫印迹法检测肺内NF．KB激活情况。结果与PQ＋PBS组相比，PDTC提高大鼠PQ中毒后的72h内存活率[24／32（75％）比13，32（40．6％），P=0．015]。PDTC改善大鼠PQ中毒后24、48h和72h的肺损伤评分（7．5±1．0比9．8±1．5，9．7±0．8比12．0±0．9，11．5±1．0比14．5±1．0，均P〈0．05）。PDTC降低大鼠PQ中毒后24、48h和72h的肺内髓过氧化物酶（MP0）阳性细胞数、肺组织内TNF-α、IL-6蛋白水平和胞核、胞质NF．KBP65蛋白浓度（均P〈0．05）。结论PDTC可减少大鼠PQ中毒后早期炎性细胞的浸润并抑制NF—KB的激活，使致炎因子TNF-α、IL-6表达下降，减轻肺损伤，降低早期病死率。
- 史晶高渝峰陈少波潘启豪廖晓星胡春林
- 关键词：百草枯NF-KB吡咯烷二硫代氨基甲酸
- 吡咯烷二硫代氨基甲酸对百草枯肺损伤Nrf2激活的影响被引量：4
- 2012年
- 目的观察吡咯烷二硫代氨基甲酸（PDTC）对百草枯（PQ）中毒后sD大鼠肺损伤和Nrf2通路激活的影响。方法48只成年雄性sD大鼠建立PQ肺损伤模型后随机（随机数字法）分为对照组（Contrik）和PDTC组。中毒后1、2、3周各处死3只动物取肺组织，HE染色行急性肺损伤（ALI）评分，Masson染色鉴定肺纤维化（LF）程度，组织匀浆测定MDA、GSH含量，Westonblot检测磷酸化Nrf2水平。两样本均数的比较用成组t检验，生存曲线用Wilcoxon（Gehan）检验。结果大鼠中毒后出现了明显的中毒症状，Control组和PDTC组各有4只和9只动物存活到实验结束，PDTC明显延长动物的存活时间，Wilcoxon（Gehan）=10．17023，P=0．001。Control组肺内MDA水平都高于PDTC组，而GSH水平均低于PDTC组，差异有统计学意义。PQ中毒后PDTC组肺内p-Nrf2水高于Control组，1周：（0．32±0．04）vs．（0．23±0．05），P=0．003；2周：（0．62±0．06）vs．（0．33±0．03），P〈0．001；3周：（0．61±0．04）vs．（0．33±0．05），P〈0．001。PDTC组AIL评分低于Control组，ALl分别为1周：（5±0．95）vs．（8±1．23），P=0．002；2周：（9±1．18）vs．（11±1．02），P=0．019；3周：（11±1．33）vs．（12±1．42），P=0．002。Control组动物中毒后1至3周肺纤维化程度分别为（40．87±7．25）％、（43．38±5．71）％和（45．91±3．97）％，明显高于PDTC组的（32．92±2．34）％、（33．45±3．04）％和（35．27±3．81）％，P值分别为0．017、0．001和0．001。结论PDTC减轻PQ中毒后肺损伤、肺纤维化，延长动物的存活时间与激活Nrf2通路及增强抗氧化能力有关。
- 史晶高渝峰陈少波潘启豪廖晓星胡春林
- 关键词：百草枯氧化应激肺损伤吡咯烷二硫代氨基甲酸
