闵捷 作品数:8 被引量:13 H指数:2 供职机构: 重庆医科大学附属第一医院 更多>> 发文基金: 重庆市教委科研基金 重庆市教育委员会科学技术研究项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
Rabex-5基因RNAi慢病毒表达载体的构建及其在MCF-7中对Rabex-5表达的影响 2012年 目的:构建Rabex-5 RNAi慢病毒表达载体,并转染人乳腺癌细胞株MCF-7,观察其对Rabex-5基因的沉默效应。方法:将设计合成的单链引物退火成双链oligo序列,连接入经AgeⅠ和EcoRⅠ双酶切线性化的pMAGic慢病毒质粒载体中,经转化DH5α感受态细胞并筛选出阳性克隆,测序鉴定。用293FT细胞包装产生慢病毒,感染MCF-7细胞,利用Real-time PCR和Western blot鉴定抑制Rabex-5表达的效果。结果:PCR与测序鉴定证实成功构建了Rabex-5 RNAi的慢病毒载体,转染MCF-7细胞后,与未干扰组和阴性对照组相比,Rabex-5的mRNA和蛋白表达下调,以RNAi3的沉默效应最佳。结论:成功构建了Rabex-5 RNAi慢病毒表达载体,其可使MCF-7细胞株Rabex-5表达下调,为进一步研究靶向Rabex-5 RNAi对乳腺癌细胞恶性生物学行为变化及基因治疗研究奠定了实验基础。 闵捷 厉红元 潘雪 李焰 王颖建 张翔 梁欣洁关键词:RNA干扰 慢病毒载体 循环雌二醇及代谢物与绝经后乳腺癌的相关性 2012年 目的探讨循环雌二醇(E2)、4-羟雌二醇(4-OHE2)、2-甲氧雌二醇(2-MOE2)水平及4-羟雌二醇:2-甲氧雌二醇(4-OHE2:2-MOE2)比值与绝经后乳腺癌危险性的相关性。方法采用ELISA法检测绝经后34例乳腺癌、40例乳腺良性(乳腺纤维腺瘤与乳腺囊性增生病)疾病患者和20例正常对照循环雌二醇、4-羟雌二醇、2-甲氧雌二醇水平并计算4-羟雌二醇:2-甲氧雌二醇比值。结果乳腺癌组及乳腺良性疾病组循环2-甲氧雌二醇水平差异无统计学意义(P>0.05),但均较正常对照组低(P<0.05);乳腺癌组及乳腺良性疾病组4-羟雌二醇:2-甲氧雌二醇比值差异无统计学意义(P>0.05),但均较正常对照组升高(P<0.05)。乳腺癌Ⅰ期~Ⅲ期各期循环雌二醇、4-羟雌二醇、2-甲氧雌二醇、4-羟雌二醇:2-甲氧雌二醇比值差异无统计学意义(P>0.05)。4-羟雌二醇、2-甲氧雌二醇、4-羟雌二醇:2-甲氧雌二醇比值在乳腺癌ER(-)组与ER(+)组间差异无统计学意义(P>0.05),但ER(+)组雌二醇水平较ER(-)组明显升高(P<0.05)。结论2-甲氧雌二醇与绝经后乳腺疾病负相关;4-羟雌二醇:2-甲氧雌二醇比值可能预示绝经后乳腺疾病危险。 李焰 厉红元 闵捷 王颖建关键词:乳腺癌 雌激素 2-甲氧雌二醇 绝经后患者雌酮及其代谢物与乳腺癌的相关性 被引量:2 2012年 目的:探讨循环雌酮(Estrone,E1)、2-羟雌酮(2-hydroxyestrone,2-OHE1)、16α-羟雌酮(16α-hydroxyestrone,16α-OHE1)水平及2-OHE1∶16α-OHE1比值与绝经后乳腺癌的相关性。方法:采用ELISA法检测绝经后40例乳腺癌、21例乳腺纤维腺瘤和19例乳腺病患者循环E1、2-OHE1和16α-OHE1水平并计算2-OHE1∶16α-OHE1比值。结果:3组患者循环E1、16α-OHE1水平和2-OHE1∶16α-OHE1比值差异无统计学意义(P>0.05),3组患者2-OHE1水平差异有统计学意义(P<0.05),乳腺癌组较乳腺病组低,差异有统计学意义(P<0.05)。循环E1、2-OHE1、16α-OHE1水平和2-OHE1∶16α-OHE比值与雌激素受体(Estrogen receptor,ER)、人表皮生长因子受体2(HER2)情况、腋窝淋巴结转移情况以及肿瘤大小无关(P>0.05)。乳腺癌危险性与2-OHE1∶16α-OHE1比值无相关性[OR,0.828;95%CI for exp(B),0.425~1.611;P=0.578],与2-OHE1呈负相关性[OR,0.418;95%CI for exp(B),0.180~0.971;P=0.043]。结论:实验结果提示2-OHE1水平与乳腺癌危险性呈负相关,未发现2-OHE1∶16α-OHE1比值预示乳腺癌危险性。 李焰 厉红元 闵捷 王颖建关键词:乳腺癌 绝经后 雌激素 乳腺癌细胞中下调RABEX-5对其化疗敏感性的影响 被引量:1 2013年 目的探讨RABEX-5下调表达后,乳腺癌细胞对蒽环类药物和紫杉类药物的敏感性变化。方法构建RABEX-5RNAi慢病毒表达载体,并感染人乳腺癌细胞株MCF-7,使细胞内RABEX-5基因表达沉默,Realtime PCR、Western blot方法检测沉默效应。应用CCK-8方法检测RABEX-5沉默后(MCF-7/RNAi),与其阴性对照人乳腺癌细胞株(MCF-7/vector)相比对化疗药物敏感性的变化情况。结果 RABEX-5RNAi慢病毒表达载体感染MCF-7后,与未干扰组(MCF-7)及阴性对照组(MCF-7/vector)相比,RABEX-5的mRNA和蛋白水平表达下调。与阴性对照组相比,RABEX-5下调表达后,对蒽环类药物表柔比星的化疗敏感性降低,半数致死浓度(IC50)分别为(3.590 0±0.228 69)μg/mL、(1.193 3±0.187 71)μg/mL,差异有统计学意义(P<0.05);而对紫杉类药物多西他赛的敏感性不变,半数致死浓度(IC50)分别为(11.162 7±0.210 26)μg/mL、(10.536 7±0.430 97)μg/mL,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 RABEX-5下调表达使人乳腺癌细胞MCF-7对蒽环类药物表柔比星产生耐药,而对紫杉类药物多西他赛敏感,为进一步研究RABEX-5在乳腺癌个体化治疗中的作用提供理论基础。 张翔 厉红元 闵捷 李焰 刘强 梁欣洁关键词:人乳腺癌细胞MCF-7 表柔比星 多西他赛 化疗敏感性 雌激素代谢物与绝经后乳腺癌 被引量:1 2011年 雌激素具有配体和底物的双重作用,它通过雌激素受体刺激细胞增殖、基因表达;同时通过形成氧化产物引起DNA损伤^[1],从而参与肿瘤的起始、发展进程。雌激素水平升高的绝经后妇女患乳腺癌的危险也相应增加^[2]。然而绝经后妇女与绝经前妇女在雌激素很多方面有着根本区别,为此,本文拟对绝经后妇女雌激素代谢物及其与乳腺癌危险性的作用进行综述。 李焰 厉红元 王颖建 闵捷关键词:绝经后妇女 乳腺癌 代谢物 DNA损伤 雌激素水平 绝经前妇女 RABEX-5和RAB5在乳腺癌中的表达及意义 被引量:4 2011年 目的初步探讨RABEX-5和RAB5与乳腺癌的关系。方法采用免疫组织化学法、RT-PCR和Western blot法检测RABEX-5及RAB5 mRNA和蛋白在60例乳腺癌、15例乳腺纤维腺瘤和15例乳腺正常组织中的表达,并检测相关临床病理指标与RABEX-5及RAB5表达的关系。结果 RABEX-5和RAB5 mRNA及蛋白在乳腺癌组织中的表达高于乳腺正常组织及乳腺纤维腺瘤(P<0.05)。在乳腺癌患者中,肿瘤直径(T)>5 cm组中的表达高于T≤2 cm组和2 cm0.05)。RABEX-5和RAB5 mRNA及蛋白表达呈正相关(P<0.05)。结论 RABEX-5可能与RAB5共同参与了乳腺癌的发生及发展。 王颖建 厉红元 李焰 闵捷关键词:乳腺癌 乳腺癌相关淋巴水肿的综合回顾 被引量:4 2014年 乳腺癌相关淋巴水肿(简称淋巴水肿)是常见和令人烦恼的乳腺癌并发症.基于诊断标准、治疗方式和随访时间的不同,淋巴水肿的发生率为5%-65%[1].组织间隙高蛋白淋巴液潴留是淋巴水肿发生的病理生理原因.肢体水肿段微血管滤过明显增加,是水肿加重的原因之一[2].淋巴水肿不仅会导致肢体功能障碍,还会导致社会功能障碍,是乳腺癌术后生活质量下降的主要因素[3],而只有不到44%的医务人员曾了解过淋巴水肿[4].因此本文对最近的文献进行综述,对淋巴水肿的预防和治疗有一个全面的认识. 彭建珩 闵捷 刘强 厉红元关键词:淋巴水肿 乳腺癌 肢体功能障碍 社会功能障碍 术后生活质量 随访时间 紫杉类药物用于可手术乳腺癌的辅助化疗 被引量:1 2012年 目的:蒽环类药物化疗方案中加入紫杉类药物能否提高可手术乳腺癌患者的生存获益。方法:选择2006年1月至2009年1月的初治乳腺癌患者391例,分为不含紫杉类药物组(CEF组138例,CTF组97例),含紫杉类药物组(TEC组98例,TTC组58例)。以无病生存作为第一观察终点,以死亡作为第二观察终点。结果:中位随访47个月,不含紫杉类药物组患者中无病生存(DFS)占90.1%,总生存(OS)为97.7%,含紫杉类药物化疗组患者中DFS为90.0%,OS为97.6%,均无明显统计学意义。含紫杉类药物组有较高的Ⅲ度以上白细胞下降率和心脏损害发生率(P<0.01)。结论:蒽环类方案中加入紫杉类药物未显著改善患者DFS和OS。 牟鹏 厉红元 李焰 闵捷 张翔 梁欣洁 刘强关键词:乳腺肿瘤 化疗 蒽环类药物 紫杉类药物