闫芳
- 作品数：80 被引量：277H指数：9
- 供职机构：山西农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山西省自然科学基金山西省科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- B型流感疫苗候选株在MDCK悬浮细胞上培养工艺优化研究
- 2024年
- 为了大规模生产重组B型流感疫苗候选株rIBV,本研究探索了rIBV在无血清MDCKs细胞上的最佳培养条件,再扩大到生物反应器中优化工艺参数,经过连续传代15代后测定了MDCKs细胞源毒种rIBV的遗传稳定性和病毒滴度。通过对病毒培养条件进行优化,我们确定了rIBV在MDCKs细胞上增殖的最佳培养条件是TOI为72h、MOI=0.001、CCI为4.0×10^(6)细胞、TPCK胰酶浓度为2μg/m L、50%DO和pH=7.2±0.5。rIBV在MDCKs细胞上连续传代15代后仍然具有高度遗传稳定性。相比于鸡胚源rIBV株,适应MDCKs细胞生长15代后rIBV株的EID_(50)由10^(6.25)/mL提高至10^(9.5)/mL,TCID_(50)由10^(4.5)/mL提高至10^(8.25)/mL。本研究对重组B型流感疫苗候选株r IBV在MDCKs细胞上的培养工艺进行了优化,获得一株具有高感染力和高病毒滴度的MDCKs细胞源疫苗候选株r IBV,为下游流感疫苗生产及纯化工艺奠定了基础。
- 武毓姝孙伟洋赵梦琳夏叶婷冯越罗敏任娟高鸿博王铁成夏咸柱高玉伟闫芳
- 关键词：流感病毒生物反应器
- GSH对四甲基秋兰姆二硫化物诱导肉鸡TD的预防与治疗效果
- 引言胫骨软骨发育不良（Tibial dyschondroplasia,TD）是肉鸡最常见的腿病之一,以软骨内骨化受阻和胫骨干骺端的软骨细胞增生形成无血管的玉白色的'软骨楔'为特征[1]。其发病机理的研究仍是目前研究的热点...
- 张晨亮李娜娜卢晓晓宁官保李宏全马海利赵宇军高文伟李绪英任家琰闫芳高诗敏陈书明田文霞
- 表达犬瘟热病毒H基因的重组犬2型腺病毒构建与鉴定
- 将CDV H基因表达盒克隆入转移质粒pVAXΔE3,构建含CDV H基因表达盒的转移质粒pVAXΔE3LPH,用Nru I和Sal I分别酶切转移质粒pVAXΔE3LPH和犬2型腺病毒全基因组质粒pPoly2-CAV-2...
- 闫芳夏咸柱扈荣良谢之景赵忠鹏黄耕
- 关键词：犬瘟热病毒犬2型腺病毒基因表达
- 文献传递
- 运用免疫蛋白质组学方法筛选羊种布鲁氏菌免疫反应性蛋白被引量：2
- 2011年
- 布鲁氏菌是布鲁氏菌病的病原体,能引起人类慢性感染,造成家畜流产和不孕.在不同种布鲁氏菌中,羊种布鲁氏菌毒力最强,在中国布鲁氏菌病流行中占主导地位.目前,还没有安全的用于预防人类布鲁氏菌感染的疫苗.用于预防家畜布鲁氏菌感染的弱毒活疫苗产生的抗体能够干扰对免疫动物感染布鲁氏菌野毒的诊断,从而对根除布鲁氏菌病的计划实施有负面影响.然而,羊种布鲁氏菌免疫蛋白质谱目前还不完善.为了研制更安全、有效且能区分野毒感染的疫苗,本研究应用免疫蛋白质组学技术筛选羊种布鲁氏菌疫苗株M5的免疫反应性蛋白.经二维电泳结合免疫杂交技术筛选到88个具有免疫反应性的蛋白质点,后经质谱鉴定其归属于61个蛋白,包括许多新的免疫反应性蛋白,如延伸因子G,F0F1ATP合成酶亚单位??,OMP1.本研究为布鲁氏菌病疫苗研制提供了许多免疫反应性候选蛋白.
- 赵忠鹏闫芳吉文汇罗德炎刘鑫邢丽段跃强杨鹏辉师秀敏李仲王希良
- 关键词：布鲁氏菌
- 鸡Ⅱ型抗菌肽LEAP-2的原核表达及抑菌研究被引量：1
- 2017年
- 为了研究鸡Ⅱ型抗菌肽LEAP-2的体外表达产物的活性,试验进行了肝脏样品无菌采集,基因的克隆及密码子优化和表达,以表达产物对致病菌做纸片法药敏试验,判断其抑菌作用。结果表明,试验经低温处理获得了较好的肝脏总RNA,克隆并优化了鸡LEAP-2基因;经诱导得到了表达产物,形式为包涵体;抑菌试验表明,表达产物对16株分离致病菌具有抑制作用。
- 许冬梅武晋孝田文霞闫芳高文伟马海利郑明学程志学赵宇军
- 关键词：抗菌肽原核表达抑菌试验
- 鸡传染性支气管炎研究进展被引量：11
- 2007年
- 鸡传染性支气管炎(Avian Infectious Bronchitis,简称IB)是由鸡传染性支气管炎病毒(Avian Infectious Bronchitis Virus,IBV)引起鸡的一种急性高度接触性传染病,主要侵害鸡的呼吸、泌尿生殖和消化系统。IBV往往引起混合感染,并可继发细菌性疾病,从而加重了对鸡群的危害。目前,IBV的血清型至少有29种之多,并且新的血清型和变异株不断出现。在实际生产中,免疫失败的现象时有发生,传染性支气管炎成为禽病防治中难于控制的“顽症”。
- 刘娟吉文汇闫芳
- 关键词：传染性支气管炎IBV
- 鸡源大肠杆菌耐药性分析及中药对大肠杆菌耐药性消除作用的研究被引量：57
- 2015年
- 研究鸡源大肠杆菌耐药性及中药对大肠杆菌耐药性消除作用。选择22种抗生素采用Kirby-Bauer法对山西省部分地区分离的20株致病性鸡源大肠杆菌进行耐药性检测,对分离菌株进行质粒分析和耐药质粒转化试验,并分析多种中药对大肠杆菌耐药性的消除作用。结果显示,20株试验菌对测试抗生素均存在不同程度的耐药性,其中5耐及5耐以上的菌株占分离菌株的90%,试验菌对青霉素耐药率最高(90%),其次为恩诺沙星(85%),而对黏杆菌素和呋喃妥因的耐药性最低;分离出12种质粒谱型,同一地区、同一鸡场菌株的质粒图谱相同或相似,不同地区菌株的质粒图谱不同,仅有部分相同或相近的流行质粒共存;对其中5株菌株进行耐药质粒的转化试验,发现同一质粒可编码1个至数个耐药性基因,不同质粒可以携带相同的耐药性基因;中药单剂或合剂对大肠杆菌的耐药性有一定的消除作用,其中黄芩的消除效果最好,中药处理后部分菌株质粒图谱无变化,只有黄连和双黄连造成2条质粒带丢失;对中药提取物作用后的消除子进行药敏试验,结果发现大肠杆菌对环丙沙星等多种抗生素恢复了敏感性。研究结果提示联合使用中药治疗鸡源大肠杆菌病有显著效果。
- 宁官保牛艺儒张鼎李宏全马海利高荣琨郝卫芳高文伟赵宇军高诗敏李桂兰李建慧闫芳田文霞
- 关键词：大肠杆菌耐药质粒中药
- 福美双诱导的肉鸡胫骨软骨发育不良软骨细胞凋亡被引量：9
- 2017年
- 为研究肉鸡胫骨软骨发育不良(TD)软骨细胞的凋亡分布及凋亡相关基因的表达水平,将80羽1日龄健康AA肉鸡基础日粮饲养1周后,随机分为对照组和处理组,处理组饲喂添加100mg·kg-1福美双的日粮,采用HE染色和TUNEL法分别对肉鸡胫骨生长板软骨细胞的形态学和凋亡情况进行观察,同时采用Real-time PCR方法和免疫组化技术分别对软骨细胞中凋亡相关基因的mRNA转录水平及蛋白质表达水平进行检测。结果显示,福美双诱发TD后第1、2、4和6天,肉鸡生长板软骨栓形成逐渐增大,异常软骨细胞增加,TD病变区软骨细胞,尤其是肥大区软骨细胞凋亡程度明显增加。Real-time PCR检测结果显示,与对照组比较,TD生长板促凋亡基因Bax在试验第1、2、4和6天表达量极显著上调(P<0.01);Caspase-3在第1、2和4天表达量极显著增加(P<0.01);抗凋亡基因BAG-1表达下调,在试验第1和2天差异极显著(P<0.01)。免疫组化结果显示,第1和4天处理组Bax的蛋白表达量明显高于对照组。本研究提示肉鸡TD生长板软骨细胞凋亡与促凋亡基因的表达增强和抗凋亡基因的表达下降有关。
- 张宁李欣宁官保张鼎Ali Raza Jahejo李宏全马海利郝卫芳高文伟赵宇军高诗敏李桂兰李建慧闫芳高荣琨田文霞
- 关键词：福美双胫骨软骨发育不良软骨细胞细胞凋亡肉鸡
- 鸭源、鸡源NDV对DF-1细胞的致病性特征被引量：1
- 2016年
- 新城疫（ND）是由新城疫病毒（NDV）引起多种家禽发病的急性高度接触性疾病、为了研究鸡源和鸭源NDV体外致病特点，本研究选取鸡源GM和鸭源YC两株强毒接种于DF-1细胞，通过测定TCID50、细胞病变的程度及最大病变时细胞上清液的浓度，结果显示鸡源NDV—GM株最早于22h检测到HA阳性，先于鸭源NDV-YC株2个小时，2株病毒接种后70h左右HA均达到峰值，其中NDV-GM株HA峰值为5log2，低于NDV-YC株6log2，实验表明鸭源病毒对鸡源细胞有致病性，为研究鸭源病毒体外致病性差异研究奠定基础.
- 高诗敏马海利邓瑞林化丽珍闫芳田文霞高文伟
- 鸡毒支原体胶体金免疫层析试纸条的研制和初步应用被引量：5
- 2015年
- 为研制一种用于快速检测鸡毒支原体(MG)的胶体金免疫层析试纸条,采用直径20nm的胶体金颗粒标记纯化的MG多克隆抗体,硝酸纤维素膜检测线和质检线分别喷加纯化的MG多克隆抗体和兔抗鸡IgG抗体,制作胶体金试纸条。试纸条检测MG阳性显示两条红色反应条带;阴性为一条红色反应带。本试纸条可检测到1∶1 280倍稀释的MG抗原,即颜色变化单位为8×104 CCU/mL,具有高度的灵敏性。用试纸条检测衣原体、滑液支原体、猪肺炎支原体、鸡大肠埃希菌和鸡白痢沙门菌等均呈阴性,表明该试纸条具有较好的特异性。对试纸条检测呈MG阳性的38只病鸡进行MG培养验证,所得结果一致;同时对MG培养检测的另外95份病鸡样品进行试纸条测试比对,符合率为96.84%,证明该试纸条具有很高的准确性。该胶体金免疫层析试纸条检测MG操作简单,灵敏度、准确度、特异性等均符合要求,可以用于养殖场批量MG的检测。
- 宁官保刘国莉张鼎李宏全马海利高荣琨郝卫芳高文伟赵宇军高诗敏李建慧李桂兰闫芳田文霞
- 关键词：鸡毒支原体胶体金免疫层析试纸条
