郝维 作品数:30 被引量:116 H指数:5 供职机构: 中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
维生素C对小鼠日节律的影响 目的:研究维生素C对小鼠日节律的影响以及在改善时差综合症中的应用。方法:试验用18只6周龄C57BL/6J小鼠,在全黑暗(DD)条件下适应14天,待出现稳定的自主节律后进行实验。实验分为三部分。(1)维生素C对转轮日节律... 张鹏 周岚 郝维 曹济民关键词:维生素C 生物钟 谷氨酸 SCN 文献传递 胞内cAMP在促胰液素和生长抑素引起胃平滑肌细胞舒张中的作用 被引量:6 1996年 用大鼠游离平滑肌细胞,观察促胰液素和生长抑素对胃平滑肌细胞的舒张效应及胞内cAMP的作用。结果表明:(1)促胰液素对胃体和胃窦平滑肌细胞的作用均为舒张反应。这一作用只引起环肌舒张,而对纵肌细胞无直接作用。促胰液素抗血清可阻断促胰液素对胃环肌细胞的舒张反应。Forskolin可加强促胰液素对胃环肌细胞的舒张作用,而cAMP抑制剂则减弱其舒张作用。促胰液素作用于胃环肌细胞后胞内cAMP含量显著升高。(2)生长抑素对胃体和胃窦平滑肌细胞无直接的舒张作用,但可以抑制由五肽胃泌素引起的胃平滑肌细胞的收缩作用,这一作用可被生长抑素抗血清所阻断。生长抑素作用下的胃平滑肌细胞内cAMP无显著变化。上述结果提示:促胰液素通过特异受体引起胃平滑肌细胞舒张,其收缩作用通过胞内cAMP介导。生长抑素对五肽胃泌素所致胃平滑肌细胞收缩的抑制作用不通过cAMP途径。 王文颖 周吕 郝维 罗洁新关键词:促胰液素 生长抑素 胃平滑肌细胞 CAMP 舒张 Jurkat细胞Kv1.3钾通道的基本电生理学特性及动力学特征 2012年 目的采用膜片钳技术记录Jurkat细胞膜的Kv1.3通道电流,分析通道的动力学特征,并体会成功记录的要领。方法选择T淋巴细胞性白血病Jurkat E6-1细胞系为研究对象,采用全细胞膜片钳记录方式记录Kv1.3电流,选择合适的刺激方案,分析通道的激活、失活和复活动力学特性。结果 Jurkat细胞的Kv1.3电流具有电压门控特性,并能被ShK(100pmol/L)选择性阻断。Kv1.3通道的激活时间常数(τact)、失活时间常数(τin)和复活时间常数(τrec)分别为τact=6.47±2.44ms,τin=622.49±93.90ms,τrec=6.141s。在胞内钙没有被螯合的条件下,Kv1.3通道电流常掺杂有中等电导钙激活钾通道KCa3.1电流。玻璃微电极的口径和电极内液是否含EGTA是能否记录到纯净Kv1.3电流的关键。结论 Jurkat细胞表达功能性Kv1.3通道,该通道呈现快速激活、缓慢失活和缓慢复活的动力学特征。记录Kv1.3通道须注意剔除KCa3.1电流的掺杂。该工作对研究T淋巴细胞Kv1.3通道的功能具有一定的借鉴意义。 代中华 谭晓秋 闫莉 程秀丽 祝红 郝维 曹济民关键词:JURKAT细胞 电压门控钾通道 失活 Necl1促进原代培养大鼠神经元间神经突触形成 2008年 目的研究神经黏附分子Necl1在神经突触形成过程中的功能。方法采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测在体外神经分化细胞模型(SH-SY5Y,P19)中Necl1表达量的变化;Western blot方法检测原代培养的大鼠海马和皮层神经元在体外培养条件下Necl1的表达量变化和在突触小体中Necl1的表达;细胞免疫荧光法检测神经元和293细胞共培养后293细胞表面突触形成情况,并检测在神经元内过表达Necl1后神经元表面突触密度变化。结果Necl1的表达量可随神经细胞的分化或原代神经元体外培养时间的延长而升高。纯化后的突触小体中存在Necl1的表达。过表达Necl1的293细胞在与原代神经元共培养的情况下可产生突触样结构。直接在原代培养神经元内过表达Necl1可提高神经元间突触密度。结论Necl1可能在中枢神经系统的神经突触形成中发挥功能。 陈涛 吴旭东 高静 郝维 阴彬 强伯勤 袁建刚 龚燕华 彭小忠关键词:突触形成 超顺磁性Fe_2O_3纳米粒子对RAW264.7细胞吞噬功能的影响 被引量:1 2012年 目的观察磁性纳米粒子对巨噬细胞的吞噬功能有无抑制作用。方法利用透射电子显微镜观察RAW264.7细胞对磁性纳米粒子(二巯基丁二酸修饰的γ-三氧化二铁纳米粒子,DMSA-γ-Fe_2O_3)的摄入情况,流式细胞术检测磁性纳米粒子预处理的RAW264.7细胞吞噬大肠杆菌(E.coli)的吞噬能力。结果 Fe_2O_3磁性纳米粒子能够被RAW264.7细胞摄入,并且随孵育时间延长进入细胞内的磁性纳米粒子增多;与正常RAW264.7细胞相比,磁性纳米粒子预处理的RAW264.7细胞参与吞噬活动的细胞百分比差异无统计学意义(P>0.05)(均约为80%细胞有吞噬活动),但磁性纳米粒子预处理的RAW264.7细胞吞噬荧光标记的E.coli的数量显著减少(P<0.05),而磁性纳米粒子预处理不同时间的RAW264.7细胞其吞噬功能差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Fe_2O_3磁性纳米粒子抑制了RAW264.7细胞的吞噬能力。 曹晓娥 徐海飞 韩烨华 戴威 曹济民 郝维关键词:吞噬细胞 大肠杆菌 慢性给予GHRP-6对小鼠跑轮运动日节律的影响 被引量:1 2015年 目的本研究探讨慢性给予GHRP-6对小鼠日运动节律的影响。方法利用Mini Mitter鼠类跑轮活动监测系统实时记录C57BL6/J小鼠在全黑暗条件下跑轮运动的昼夜节律;在不同时间点(CT6、CT12、CT14、CT18、CT22和CT24)每日腹腔注射GHRP-6(100μg/kg),观察GHRP-6对小鼠跑轮运动昼夜节律和运动活性的影响。结果在CT12给予GHRP-6引起明显的跑轮运动日节律时相延迟,而在其他时间点不引起明显的时相位移。GHRP-6同时引起一定程度的运动活性降低,但该效应与给药时间没有明显关系。结论 GHRP-6可引起C57BL6/J小鼠的跑轮运动日节律时相的时间依赖性延迟和时间非依赖性运动活性降低,该研究提示GHSR信号通路对生物钟有调节作用。 郝维 周岚 谷婧丽 曹济民关键词:生长激素释放肽 相移 生物钟 5-羟色胺和胃动素在狗小肠移行性复合运动调控中的作用 被引量:39 1998年 应用慢性植入小肠腔外应力传感器记录清醒狗小肠移行性复合运动(MMC)。在颈外静脉和支配10-15cm肠段的空肠动脉内分别放置一硅胶管以备灌流药物和取血样品用。本研究观察了静脉和动脉注射药物对小肠MMC的影响及MMC不同时相血浆5-羟色胺(5-HT)和胃动素的浓度变化。结果表明:(1)MMC不同时相血浆5-HT和胃动素浓度呈周期性变化,5-HT峰值在胃动素峰值之前出现。血浆5-HT浓度在MMCⅡ相后期达高峰(41.2±1.3)ng/ml,明显高于MMCI相(22.4±1.1)ng/ml(P<0.01);而血浆胃动素浓度在MMCⅢ相时达峰值(580.0±30.2)pg/ml,明显高于MMCI相时的水平(140.0±21.0)pg/ml(P<0.01)。(2)静脉注射胃动素和空肠肠段动脉局部注射5-HT、胃动素分别引起近端小肠和空肠肠段MMCⅢ相收缩。胃动素在空肠肠段引发的收缩振幅高于5-HT。(3)空肠肠段动脉局部灌流5-HT受体拮抗剂、抗胃动素血清、5,6-双羟色胺和河豚毒素(TTX)均可阻断MMCⅢ相在灌流肠段出现和向远端传播。结论:血浆5-HT和胃动素可能是狗小肠MMC的主要启动因素,5-HT释放高峰先于胃动素峰在MMCⅢ相前出现。肠神经系统的5-HT神经元和胃动素神经元在狗小肠MMC调控中起重要作用。 杨春敏 周吕 张航 郝维关键词:移行性复合运动 5-羟色胺 胃动素 多壁碳纳米管抑制RAW264.7巨噬细胞的吞噬功能 2014年 目的观察多壁碳纳米管(MWCNT)对巨噬细胞吞噬功能的影响。方法采用常规细胞培养技术培养RAW264.7巨噬细胞;用流式细胞术定量检测RAW264.7巨噬细胞吞噬异硫氰酸荧光素标记的大肠杆菌(FITC-tagged E.coli k-12)的情况。结果 MWCNT剂量依赖性地抑制RAW264.7细胞吞噬大肠杆菌,随着MWCNT浓度的增加,RAW264.7细胞吞噬大肠杆菌的量(用平均荧光强度表示)降低。此外,MWCNT抑制RAW264.7细胞吞噬大肠杆菌亦呈时间依赖性:用MWCNT(75μg/ml)孵育RAW264.7细胞12h后,RAW264.7细胞吞噬大肠杆菌的量与对照组相比降低了约70.4%(P<0.01),同时参与吞噬活动的RAW264.7细胞的百分比也从对照组的98.6%降低到了92.4%(P<0.05)。即使用低剂量的MWCNT(25μg/ml)孵育RAW264.7细胞较长时间(24h)后,RAW264.7细胞吞噬大肠杆菌的量与对照组相比仍降低了约77.1%(P<0.01),同时参与吞噬活动的RAW264.7细胞的百分比也从71.2%降低到了43.4%(P<0.01)。用脂多糖(LPS,10μg/ml)激活RAW264.7细胞后,其吞噬能力明显增强,而MWCNT仍可剂量依赖性地抑制LPS激活的RAW264.7细胞的吞噬能力,与LPS组相比,MWCNT(75μg/ml)和LPS共孵育组吞噬大肠杆菌的量降低了70.9%(P<0.01)。结论 MWCNT可明显抑制RAW264.7巨噬细胞的吞噬功能。 李慧 祝红 闫莉 谷婧丽 郝维 曹济民关键词:多壁碳纳米管 巨噬细胞 大肠杆菌 流式细胞术 hexarelin的细胞保护作用研究 被引量:3 2012年 目的研究生长素释放肽hexarelin是否具有细胞保护作用。方法利用H2O2作用于RAW264.7巨噬细胞作为细胞氧化应激性损伤模型,以细胞活性(MTT法检测)、热休克蛋白70(HSP70)表达水平(Western blotting法检测)等指标判断细胞损伤及修复情况,观察不同浓度hexarelin预处理不同时间对上述细胞氧化应激性损伤的保护作用。结果与对照组相比,H2O2造成了明显的细胞氧化应激性损伤,细胞活性明显下降,HSP70蛋白表达水平似有升高,但与对照组相比无统计学差异;hexarelin预处理可剂量依赖性地减轻由H2O2所致的细胞活性下降,且这种作用在hexarelin 10-5mol/L、预处理2h对细胞的保护作用最强。单独用hexarelin预处理细胞后,HSP70的表达即明显升高。给予hexarelin预处理,再用H2O2刺激细胞,HSP70的水平进一步升高。结论 Hexarelin具有抗氧化应激和细胞保护作用,这种作用与其诱导HSP70的表达有关。 丁帆 程秀丽 郝维 高雪 曹济民关键词:生长素释放肽 细胞保护 氧化应激 人源DTD蛋白激活人神经母细胞瘤细胞非选择性阳离子通道 2009年 目的探讨人源D-酪氨酰tRNA脱酰基酶(h-DTD)对人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y的非选择性阳离子通道通透性的影响。方法利用毛细管电泳法检测原核表达纯化的h-DTD的体外脱酰酶活性;用W estern b lot法分析h-DTD在各组织和细胞中的表达谱;用膜片钳技术检测SH-SY5Y细胞全细胞电位。结果h-DTD具有体外脱酰酶活性,并在脑组织中高表达。在h-DTD蛋白存在的情况下,游离的D-氨基酸及L谷-氨酸能激活谷氨酸敏感的非选择性阳离子通道,导致细胞膜通透性增加。结论在神经系统,h-DTD蛋白可能通过维持游离D-氨基酸的浓度来影响非选择性阳离子通道的功能。 朱镜羲 阳洪波 于晓霞 郝维 鲍光宏 曹济民 龚燕华关键词:表达谱