邓彦飞
- 作品数：71 被引量：56H指数：4
- 供职机构：广西大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- STAT3基因对广西黄牛肌肉干细胞成肌诱导分化的调控研究被引量：1
- 2021年
- 研究旨在检测信号转导与转录激活因子3(STAT3)的表达规律,克隆STAT 3基因,构建真核表达载体,并探索STAT 3基因对广西黄牛肌肉干细胞(MuSCs)分化的调控作用。采集6、12、18月龄广西黄牛肌肉组织以及生长期(GM)和分化期(DM)肌肉干细胞,分别提取RNA并反转录为cDNA,通过实时荧光定量PCR检测STAT 3基因和成肌相关基因的表达规律;克隆黄牛STAT 3基因完整编码区序列,构建过表达载体pCD-STAT3并检测其对黄牛肌肉干细胞分化的影响。实时荧光定量PCR结果表明,STAT 3基因在6、12、18月龄黄牛肌肉组织中均有表达,且在18月龄中表达量最高,12月龄中表达量最低;STAT 3和成肌调节因子6(MYF 6)基因在分化期肌肉干细胞中表达量均极显著高于生长期(P<0.01)。广西黄牛STAT 3基因编码区全长2313 bp,与空载体pCDNA3.1相连成功构建过表达载体pCD-STAT3,将pCD-STAT3转入体外培养广西黄牛肌肉干细胞,肌肉干细胞中STAT 3基因及成肌决定蛋白(MyoD1)、骨骼肌肌球蛋白重链(MyHC)基因表达量极显著升高(P<0.01),肌细胞生成素(MyoG)基因表达量显著升高(P<0.05),且肌管数量、大小均显著高于pCDNA3.1组(P<0.05)。本研究检测了转录因子STAT3在广西黄牛背最长肌中的表达规律;且过表达STAT 3基因显著促进了广西黄牛肌肉干细胞的成肌分化,为深入研究STAT 3基因在肌肉生长发育中的作用及其分子调控机制奠定基础。
- 吕巧邹超霞吴永梅张瑞门郑自华石德顺韦英明邓彦飞
- 关键词：转录因子STAT3基因
- 水牛生精上皮细胞分离纯化及体外培养的初步研究
- 精原干绌胞是位于睾丸曲细精管生精上皮内的生精干细胞,是一类定向干细胞。因此,分离培养精原干绌胞将有助于人们深入了解精子发生的过程,也为转基因动物的制作提供了一种新的途径。本研究以3～5月龄本地水牛睾丸为材料,采用胶原酶、...
- 陈施蓓刘庆友邓彦飞罗婵李湘平陆风花石德顺
- 关键词：水牛精原干细胞体外培养
- 文献传递
- 水牛β-酪蛋白基因5端调控区克隆及序列分析
- 以本地水牛基因组为模板，利用PCR技术扩增获得水牛β-酪蛋白基因(CSN2)5'调控区片段。经连接克隆到pMD18-T戡体上，测序后获得长5.2kb的基因片段，与牛，山羊和绵羊相应的基因序列多重序列比较分析，同源性分别达...
- 胡天刘庆友陆凤花邓彦飞李辉石德顾
- 关键词：水牛Β-酪蛋白基因PCR技术
- 文献传递
- 浅谈大学班主任的任务和角色被引量：1
- 2014年
- 班主任是学校中全面负责一个班学生的思想、学习、健康和生活等工作的教师,是一个班的组织者、领导者和教育者,是一个班中全体任课教师教学、教育工作的协调者,是直接塑造和管理学生非常专业的工作者.在呼吁大学教育制度改革的呼声中,在大学管理制度相对宽松前提下,作为大学班主任要明白自己的任务,定位好自己的角色,既是良师,又是益友.
- 邓彦飞杨素芳蒋建荣
- 关键词：班主任角色
- 碱性成纤维细胞生长因子促进水牛类胚胎生殖干细胞形成的初步研究
- 本研究主要通过碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)特异信号阻断剂阻断下游相关的信号通路,对bFGF在水牛类胚胎生殖干细胞(EG-like)形成过程中的作用和机理进行了初步研究。首先,对bFGF在水牛PGCs重编程形成EG-...
- 汪彩珠杨素芳陈思蓓邓彦飞刘庆友罗婵石德顺
- 关键词：原始生殖细胞碱性成纤维细胞生长因子重编程
- 文献传递
- 水牛miR-302s真核表达载体的构建及生物信息学分析
- 2019年
- 试验旨在克隆并构建水牛miR-302s慢病毒真核表达载体(bbu-miR-302s),对其进行生物信息学分析,并尝试将该载体应用于水牛体细胞重编程中。以水牛基因组DNA为模板扩增得到bbu-miR-302s前体序列,测序正确后将其连入pLVX-IRES-ZsGreen1构建重组慢病毒真核表达载体。重组的慢病毒真核表达载体经过酶切鉴定正确后,采用脂质体转染方法包装慢病毒颗粒,通过感染HEK-293T细胞及猪和水牛体细胞,检测重组慢病毒载体的有效性。bbu-miR-302s有效感染水牛胎儿成纤维细胞(BFF)后,经诱导培养,检测能否产生水牛诱导多能干细胞(iPSC)。采用CoGeMiR数据库查询法和SnapGene Viewer软件进行miR-302s家族在基因组中的定位分析;利用ClustalX 1.83软件分析miR-302s序列保守性;利用TargetScan和miRWalk软件预测bbu-miR-302s主要的靶基因,并运用DAVID程序对靶基因进行信号通路富集。测序结果显示,扩增获得的序列是水牛miR-302s家族,包装的重组慢病毒滴度为7.2×10 6 TU/mL,并可以有效感染3个物种的体细胞。bbu-miR-302s病毒感染BFF后,细胞经历形态变化并发生聚集形成克隆样,碱性磷酸酶检测阳性,但多能基因及表面抗原检测结果均为阴性,说明单因子miR-302s不足以完全重编程BFF为水牛iPSC,但促进了重编程进程。CoGeMiR数据库检索发现,miR-302s家族主要位于LARP 7基因的内含子区;SnapGene Viewer软件进一步分析发现,bbu-miR-302s位于水牛7号染色体LARP 7基因的内含子区。序列同源性分析表明,miR-302s家族成员间及miR-302s簇成员在不同物种间均高度保守。水牛miR-302s主要靶基因共255个,这些靶基因主要集中在33个信号通路中,其中PGK信号通路与胰高血糖素信号转导及调控干细胞信号通路最为显著。本研究结果为后续开展miR-302s簇在体细胞重编程中的作用奠定基础。
- 乔树叶黄时海邓彦飞邓海莹罗婵石德顺李湘萍
- 关键词：生物信息学分析
- 水牛SIRT6基因克隆及其在组织中的表达分析被引量：2
- 2019年
- 本研究旨在克隆水牛SIRT 6基因,构建真核表达载体,并对该基因进行生物信息学及组织表达谱分析。以牛SIRT 6基因编码区为种子序列(GenBank登录号:NM_001098084.1),应用Oligo 7.0软件设计引物序列,用RT-PCR方法扩增水牛SIRT 6基因完整编码区序列,测序鉴定后进行生物信息学分析,构建逆转录病毒载体pMXs-SIRT6-IRES-GFP,并在HEK-293T细胞和水牛胎儿成纤维细胞上进行重组载体表达鉴定;采集水牛心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肠、脑、皮肤、生殖嵴分别提取RNA,反转录后以cDNA为模板进行实时荧光定量PCR,检测SIRT 6基因在各组织中的表达差异。结果表明,水牛SIRT 6基因编码区全长1 080 bp,编码359个氨基酸,其中亮氨酸及脯氨酸含量最高(10.3%),酪氨酸含量最低(1.1%)。水牛SIRT 6基因核苷酸序列与牛、人和小鼠的同源性分别为98.4%、86.7%和78.5%,物种间同源性较低。系统进化树结果表明,水牛与牛聚为一支,再与人、小鼠聚为一大支,亲缘关系相对较近,与果蝇亲缘关系较远。SIRT6蛋白理论分子质量为39.47 ku,分子式为C 1737 H 2783 N 509 O 516 S 13,等电点为8.48,不存在跨膜区,为膜内蛋白;含有Sirtuin家族特有的Sir2去乙酰化酶的催化结构。二级结构预测结果显示,水牛SIRT6蛋白包含13个α-螺旋、27个β-折叠、24个T-转角和20个无规则卷曲。逆转录病毒载体介导的SIRT 6基因能在HEK-293T细胞和水牛胎儿成纤维细胞中表达。实时荧光定量PCR结果显示,SIRT 6基因在水牛心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肠、脑、皮肤、生殖嵴中均有表达,其中在生殖嵴中表达量最高,在皮肤中的表达量次之,而在肝脏中表达量最低。本试验结果将为水牛SIRT 6基因的功能研究提供参考。
- 崔佳瑜程隽如黄坚强张瑞门石德顺杨素芳邓彦飞
- 关键词：水牛SIRT克隆表达谱
- 猪精子提取物对猪卵母细胞的孤雌激活效果
- 2009年
- 3个试验分别就猪精子提取物提取方法、精子蛋白质量浓度以及显微注射剂量对猪卵母细胞的孤雌激活效果进行了研究.结果表明,采用液氮反复冻融法和超声波破碎法提取的猪精子提取物对猪卵母细胞都有显著的孤雌激活效果;采用猪精子提取物显微注射孤雌激活猪卵母细胞的适宜注射剂量为2-4 pL;猪精子蛋白质量浓度在1.35 mg/mL以上,注射剂量为2-4 pL时均可有效激活猪卵母细胞.
- 谭世俭谢忠君石德顺谢体三李辉邓彦飞刘继龙
- 关键词：卵母细胞显微注射孤雌激活
- 一种水牛卵巢皮质体外培养用激活培养基及体外培养方法
- 本发明公开了一种水牛卵巢皮质体外培养用激活培养基及体外培养方法，本发明的激活培养基是在体外基础培养基中外加bpv(hopic)，其中所述bpv(hopic)的浓度为150μM。本发明的激活培养基能够显著提高原始卵泡向初级...
- 杨素芳梁菁媛朱鹏邓彦飞石德顺
- 家兔DEPTOR基因过表达和shRNA干扰慢病毒载体的构建与验证
- 2022年
- 为了构建DEPTOR基因的过表达载体和shRNA干扰慢病毒载体,并验证载体的有效性,试验采用RT-PCR方法扩增兔DEPTOR基因编码区(CDS)序列,得到DEPTOR基因片段,同时合成DEPTOR基因的shRNA干扰序列。将DEPTOR基因片段分别连接到慢病毒真核表达载体pLVX-IRES-ZsGreen1和融合表达载体pEGFP-N1上,获得过表达载体pLVX-DEPTOR-IRES-ZsGreen1和pEGFP-DEPTOR;将shRNA干扰序列连接到慢病毒干扰载体pSicoR-Ef1a-mCh上,获得shRNA干扰慢病毒载体pSicoR-shRNA-508。用过表达载体转染HEK 293T细胞,72 h后观察荧光蛋白的表达情况并收集细胞,RT-PCR检测细胞水平上DEPTOR基因的表达情况。使用多质粒共同转染法,将过表达载体pEGFP-DEPTOR与shRNA干扰慢病毒载体pSicoR-shRNA-508按照1∶1比例转染HEK 293T细胞,72 h后观察荧光蛋白的表达情况并收集细胞,采用实时荧光定量PCR方法检测shRNA干扰序列对DEPTOR基因表达的干扰效率。结果表明:用构建的过表达载体pEGFP-DEPTOR和pLVX-DEPTOR-IRES-ZsGreen1转染HEK 293T细胞后均能观察到绿色荧光蛋白的表达,RT-PCR能扩增出相应条带,即慢病毒感染法能成功将DEPTOR基因转入细胞内。构建的shRNA干扰慢病毒载体pSicoR-shRNA-508能有效降低DEPTOR基因的表达,与未干扰相比差异显著(P<0.05),干扰效率约为80%。说明试验成功构建出DEPTOR基因的过表达载体和shRNA干扰慢病毒载体。
- 邹灵秀农恬颖吴咏梅邓彦飞
- 关键词：家兔慢病毒载体
