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腺病毒载体介导的GFP基因在鸭胚成纤维细胞中的表达及RNA干扰: 2008年; 目的:建立在鸭胚成纤维细胞(DEF)中进行RNA干扰(RNAi)的技术平台,为鸭基因组功能的研究提供新的技术手段。方法:以绿色荧光蛋白(GFP)基因为报告基因,脂质体转染化学合成的GFP特异小干扰RNA(GFP-siRNA),用流式细胞仪测定GFP-siRNA对重组腺病毒(Adv-GFP)介导的GFP基因在DEF中表达的干扰效果。结果:200MOI(感染复数)Adv-GFP介导的GFP基因在DEF中表达效率最高,为31.20%±3.11%,对DEF的活力无明显影响;GFP-siRNA能有效干扰GFP基因在DEF中的表达,相对抑制率为98.56%。结论:在DEF中进行RNAi是可行的,Adv-GFP是介导外源基因在DEF中表达较为理想的载体;首次建立了在DEF中进行RNAi的技术平台,为鸭基因组的功能等研究提供了新的技术手段。; 孟宇航汤承杨发龙邓书岳华于学辉; 关键词：鸭胚成纤维细胞 RNA干扰腺病毒载体绿色荧光蛋白

腺病毒载体介导GFP基因在鸭胚和雏鸭体内的表达被引量：1: 2008年; 本试验旨在探讨腺病毒在鸭胚和雏鸭体内的感染情况,为腺病毒作为外源基因载体在活体上进行RNA干涉奠定基础.将GFP基因重组腺病毒(Adv-GFP)静脉注射15日龄鸭胚和10日龄雏鸭,在感染后不同时间采集组织器官,制作冰冻切片,荧光显微镜观察GFP基因在鸭胚和雏鸭组织器官中的表达.结果发现,GFP基因在Adv-GFP感染后24～72h能在鸭胚肝脏及心肌细胞中表达,在感染后1～5d,GFP基因可在雏鸭肝脏、脾脏、腔上囊中稳定表达.本试验首次证明腺病毒作为安全的外源载体,可介导外源基因在鸭胚和雏鸭体内的靶器官中持续稳定表达,为在鸭上进行病毒病的基因治疗提供了基础数据.; 孟宇航汤承杨发龙邓书杨帆岳华; 关键词：腺病毒鸭胚雏鸭冰冻切片

腺病毒介导的GFP在鸭胚成纤维细胞中的表达及RNA干涉: 原代细胞具备二倍体的遗传性、来源方便,可作为RNA干涉(RNAi)效果的体外评价系统,可方便地研究病毒与宿主相互作用机制及其基因功能,也可作为筛选有效的siRNA分子用于病毒感染防治的平台。本研究将不同感染复数(MOI)...; 孟宇航汤承杨发龙邓书岳华; 关键词：鸭胚成纤维细胞 RNA干涉腺病毒载体; 文献传递

副黏病毒V蛋白抗干扰素作用的研究进展被引量：5: 2008年; 副黏病毒的V蛋白是结构蛋白P基因内使用不同的阅读框编码产生的一种非结构蛋白,具有抗干扰素(IFN)的作用。副黏病毒科不同成员间V蛋白的产生机制不同,国内外利用反向遗传、RNA干扰等技术缺失或抑制V蛋白,通过检测IFN产生及作用通路上关键蛋白的变化情况研究其抗IFN作用机制,发现副黏病毒V蛋白既可直接阻止IFN产生,也可阻断IFN抗病毒JAK/STAT作用通路。文章对副黏病毒V蛋白、干扰素的产生及其抗病毒作用机制,特别是V蛋白抗IFN作用的研究进展及应用前景做一综述。; 邓书杨发龙岳华孟宇航; 关键词：副黏病毒干扰素

shRNA干涉NP基因表达对新城疫病毒增殖及其它结构基因的影响: 新城疫病毒(NDV)是副黏病毒科腮腺炎病毒属成员,病毒基因组为不分节段的单股负链RNA,约15kb,编码6种结构蛋白,分别为血凝素一神经氨酸酶(HN)、融合(F)糖蛋白,非糖基化内膜蛋白(M)、核衣壳蛋白(NP)、磷蛋白...; 岳华汤承邓书; 文献传递

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邓书