连英丽
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：华南理工大学更多>>
- 发文基金：广州市重大科技攻关项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 寄生曲霉脂肪酶的全基因合成、原核表达及其结构分析被引量：3
- 2011年
- 根据寄生曲霉脂肪酶基因序列(GenBank登录号:AF404488)及大肠杆菌密码子的偏爱性,应用重叠延伸PCR技术,人工合成了寄生曲霉脂肪酶基因lip AP。将基因克隆到pFL-B13cl载体上获得重组质粒pFL-B13cl/Lip AP,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行优化表达。融合蛋白Sumo-LipAP在0.1 mmol/L IPTG、37℃条件下诱导6 h表达量最高。SDS-PAGE分析显示融合蛋白His-Sumo-LipAP以包涵体形式表达,大小约为53 kD。复性后透析处理,大部分融合蛋白转化为正确构象且具有催化活性,经一步疏水层析其纯度可达98%。生物信息学工具预测和分析发现,LipAP空间结构保守,具有催化三联体(Ser173-Asp226-His288)、活性部位盖子(S111YSIRNWVTDAT122)及保守五肽(GHSLG)3个功能域。
- 连英丽蓝东明杨博王永华
- 关键词：密码子优化原核表达生物信息学
- 电子受体对脱色希瓦氏菌代谢的全局性调控作用
- 微生物呼吸代谢是地球生物化学过程和生物工程系统的核心驱动力。大量研究发现微生物的代谢底物类型、途径和代谢活性随着电子受体的不同而改变。理论上,微生物呼吸代谢过程中利用某种电子供体所获得的能量与所利用的电子受体氧化还原电势...
- 连英丽
- 关键词：电子受体
- 文献传递
- 寄生曲霉脂肪酶的全基因合成、表达及生物信息学分析
- 脂肪酶作为催化剂在工业上被广泛应用,也是生物催化发展过程中一个很大的限制性因素。野生菌株脂肪酶产量低,利用常规育种方法已不能满足工业化生产的需求。本论文根据寄生曲霉脂肪酶基因lipAP序列首次利用两步法合成得到全基因,并...
- 连英丽
- 关键词：密码子优化原核表达生物信息学
- 文献传递
