赵建华 作品数:5 被引量:56 H指数:3 供职机构: 华中科技大学同济医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 湖北省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
荧光定量PCR对微小RNA的检测及应用 被引量:1 2011年 目的:建立一种定量、简单、快速、敏感的微小RNA(miRNA,miR)检测方法,并用其观察一些病理状态下有关miRNA的变化.方法:通过特殊设计的茎环结构的反转录引物,对miRNA进行反转录,然后用相应miRNA的正反向引物对该miRNA进行定量检测,观察重复性和特异性.用此法检测了人巨细胞病毒(HCMV)对滋养细胞(HPT-8)细胞内miR-513表达水平的影响,也检测了结直肠癌组织miR-145水平.结果:用该法扩增miRNA特异性强,结果重复性好,该法检测到HCMV感染对miR-513表达的梯度效应.也发现癌组织和正常组织间miR-145的表达有明显的差异.结论:用荧光定量PCR可以对微小RNA快速有效的检测,在临床工作中可得到很好的应用. 龚文容 赵建华 程正江关键词:荧光定量PCR MIRNA 人巨细胞病毒 滋养细胞 结肠癌 miR一145在结直肠癌组织的表达及临床意义 被引量:19 2011年 目的探讨结直肠癌组织microRNA-145(miR-145)的表达与患者临床症状,尤其是肿瘤远处转移或浸润生长的关系。方法收集88例手术切除的结直肠癌组织,42例远离癌组织的正常结直肠组织。提取这些标本的总RNA,在使用微小RNA的引物反转录后,用miR-145特异性引物做荧光定量聚合酶链反应(PCR)。结果荧光定量PCR显示:结直肠癌组织miR-145的表达量明显降低,癌组织和正常组织的miR-145相对水平分别为31.65±27.97和189.39±159.30,两者比较差异有统计学意义(P〈0.01)。miR-145的低表达,与年龄,性别,肿瘤原发病灶的大小,有无淋巴转移明显相关(P〉0.05),但与细胞分化程度,远处转移或浸润其他器官是否发生密切相关。高分化(n=25)、中分化(n=34)和低分化(n=29)的癌组织miR-145均值分别为41.96±38.58、29.69±20.43和26.12±23.13,组间差异有统计学意义(P〈0.01)。有远处转移或浸润其他器官的19个病例miR-145均值仅为14.45±9.98,远低于癌症患者的均值(P〈0.01)。结论结直肠癌组织中miR-145的表达低于正常组织,这与癌细胞的分化程度,远处转移或浸润生长密切相关。 龚文容 卢晓明 陈志松 赵建华 周李娜关键词:结肠癌 分化 MIR-145 齐墩果酸抗豚鼠巨细胞病毒作用体外实验研究 被引量:4 2011年 目的研究齐墩果酸体外抗GPCMV作用。方法用细胞病变法和MTT法,检测齐墩果酸抗GPCMV的半数细胞毒性浓度和半数有效浓度,并与更昔洛韦和金叶败毒进行比较。结果更昔洛韦、金叶败毒、齐墩果酸的半数毒性浓度分别为333.8,3 015.6,70.8μg.ml-1,半数有效浓度分别为48.1,325.5,6.4μg.ml-1,治疗指数分别为7,9,11。结论齐墩果酸具有体外抗GPCMV作用,且高于更昔洛韦和金叶败毒;细胞毒性也略高于更昔洛韦和金叶败毒;抗GPCMV治疗指数最高。 赵晶晶 陈素华 方建国 万进 刘涛 李伟 陈娟娟 赵建华 刘静关键词:齐墩果酸 豚鼠巨细胞病毒 绿原酸体外抗人巨细胞病毒的实验研究 被引量:30 2009年 目的观察金银花主要有效成分绿原酸体外抗人巨细胞病毒(HCMV)的效果和安全性。方法用细胞病变法和噻唑蓝(MTT)法检测绿原酸抗HCMV的最大无毒浓度、最小有效浓度和治疗指数,并与更昔洛韦、金叶败毒及其君药金银花进行比较。结果更昔洛韦、金叶败毒、金银花及绿原酸的最大无毒浓度分别为10,3 000,3 000及100μg.mL-1,最小有效浓度分别为10,300,3 000及1μg.mL-1,治疗指数分别为1,10,1及100。结论绿原酸细胞毒性略高于金叶败毒和金银花,但抗HCMV效果明显高于金叶败毒和金银花,治疗指数最高,具有抗HCMV的潜在优越性。 陈娟娟 方建国 万进 冯玲 张亚伟 赵建华 赵晶晶 王楠 陈素华关键词:绿原酸 金银花 巨细胞病毒 人巨细胞病毒影响绒毛外细胞滋养细胞增殖功能的体外研究 被引量:2 2011年 目的:探讨人巨细胞病毒(HCMV)对绒毛外细胞滋养细胞增殖功能的影响。方法:选择绒毛外细胞滋养细胞株HPT-8进行研究,体外培养时加入HCMV,免疫荧光法检测HCMV PP65,MTT法检测不同浓度HCMV、不同作用时间对HPT-8增殖的影响。结果:病毒感染组HPT-8细胞内可见大量红色HCMV PP65抗原信号;与正常对照组比较,10~100μl病毒液作用12 h HPT-8增殖均无异常(P>0.05),70μl和100μl病毒液作用24 h HPT-8增殖明显抑制(P<0.05),20、30、40、50μl病毒液作用48 h HPT-8增殖均明显抑制(P<0.05),10μl病毒液作用72 h HPT-8增殖明显抑制(P<0.05);其中,48 h和72 h时间点,20μl、30μl、40μl病毒液导致的细胞增殖异常差异无统计学意义(P>0.05)。结论:HCMV可感染HPT-8并在细胞内复制,抑制细胞增殖。 刘涛 陈娟娟 尹宗智 赵晶晶 赵建华 肖娟 张丹丹 陈素华关键词:人巨细胞病毒 增殖