谭维军
- 作品数：6 被引量：13H指数：2
- 供职机构：武汉大学中南医院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- bFGF反义寡核苷酸对大鼠肺成纤维细胞增殖信号通路的影响
- 2015年
- 目的:观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)反义寡核苷酸(AODN)对大鼠肺成纤维细胞增殖、转化信号通路的影响。方法:分离成年大鼠肺成纤维细胞,分为4组:对照组(未转染肺成纤维细胞);TGF-β1组(未转染肺成纤维细胞+5ng/ml TGF-β1刺激);TGF-β1+AODN组(转染AODN肺成纤维细胞+5ng/ml TGF-β1刺激);TGF-β1+RODN(正义寡核苷酸)组(转染RODN肺成纤维细胞+5ng/ml TGF-β1刺激)。每组设3复孔,并作细胞爬片,镜下计数肺成纤维细胞数量,绘制生长曲线。MTT比色法测定肺成纤维细胞增殖率。免疫细胞化学方法检测肌成纤维细胞特异性标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)。通过ELISA法检测培养液中bFGF、CTGF及Ⅰ型胶原蛋白含量。用RT-PCR法分析肺成纤维细胞Smad3 mRNA、Smad7 mRNA、Ⅰ型胶原mRNA表达水平。结果:1细胞计数显示:TGF-β1+RODN组各时段成纤维细胞的数目均较对照组、TGF-β1组、TGF-β1+AODN组明显增多(P<0.05);TGF-β1+AODN组中成纤维细胞增殖数比TGF-β1组明显减低(P<0.05)。2MTT结果显示:TGF-β1+RODN组肺成纤维细胞光密度值明显高于对照组、TGF-β1组、TGF-β1+AODN组(P<0.05);TGF-β1+AODN组中肺成纤维细胞光密度值明显比TGF-β1组减低(P<0.05)。3免疫细胞化学染色结果显示:TGF-β1+RODN组肺成纤维细胞与对照组、TGF-β1组、TGF-β1+AODN组比较,α-SMA染色的平均光密度值(IOD)明显增加(P<0.05);TGF-β1+AODN组中肺成纤维细胞α-SMA染色的平均光密度值(IOD)比TGF-β1组明显减低(P<0.05)。4 ELISA法检测结果显示:在TGF-β1+RODN组肺成纤维细胞培养液中bFGF、CTGF及Ⅰ型胶原蛋白含量明显高于对照组、TGF-β1组、TGF-β1+AODN组(P<0.05);TGF-β1+AODN组肺成纤维细胞培养液中bFGF、CTGF及Ⅰ型胶原蛋白含量比TGF-β1组明显减低(P<0.05)。5RT-PCR法检测结果显示:在TGF-β1+RODN组肺成纤维细胞Smad3mRNA及Ⅰ型胶原蛋白mRNA表达明显高于对照组、TGF-β1组、TGF-β1+AODN组(P<0.05);TGF-β1+
- 谭秋月程真顺谭维军叶燕青张莉
- 关键词：肺成纤维细胞增殖分化
- 丹参酮ⅡA磺酸钠对大鼠肺成纤维细胞转化生长因子β_1信号通路的作用被引量：6
- 2013年
- 目的:研究丹参酮ⅡA磺酸钠注射液(STS)对大鼠肺成纤维细胞转化生长因子β1(TGF-β1)Smad信号通路的影响,探讨STS抑制肺成纤维细胞(LFB)增殖、转化的可能机制。方法:体外分离培养大鼠肺成纤维细胞,实验分为3组:①空白对照组;②TGF-β1刺激组;③联合处理组:STS+TGF-β1刺激组,培养48h,待细胞生长同步化后,用MTT法检测丹参酮ⅡA对肺成纤维细胞增殖的影响,用RT-PCR法分析丹参酮ⅡA磺酸钠和TGF-β1作用后肺成纤维细胞Smad3、Smad7 mRNA表达水平的变化,以及对Ⅰ型胶原mRNA的影响。结果:丹参酮ⅡA磺酸钠在80-640mg/L浓度范围对5μg/L TGF-β1刺激的肺成纤维细胞增殖均具有明显的抑制作用,并呈剂量依赖性(P<0.05);丹参酮ⅡA磺酸钠在浓度160mg/L时能明显下调TGF-β1刺激的肺成纤维细胞内Smad3 mRNA、Smad3/Smad7 mRNA及Ⅰ型胶原mRNA的表达(P<0.05),并能上调Smad7 mRNA表达(P<0.05)。结论:丹参酮ⅡA磺酸钠能抑制LFB的增殖、转化及胶原的合成,机制可能是丹参酮ⅡA磺酸钠下调了大鼠TGF-β1 Smad信号通道的Smad3/Smad7水平,从而抑制LFB的增殖、转化。
- 殷静程真顺谭维军张莉谭秋月
- 关键词：成纤维细胞转化生长因子Β1
- 碱性成纤维细胞生长因子反义寡核苷酸对大鼠肺纤维化的影响
- 2014年
- 目的 观察碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）反义寡核苷酸对大鼠肺纤维化的影响.方法 将30只大鼠随机分为正常对照组、肺纤维化组、空载体转染组、反义bFGF转染组、正义bFGF转染组,每组6只.造模处理后,计算各组大鼠肺系数,比较肺组织纤维化程度,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清和肺泡灌洗液bFGF含量及肺匀浆羟脯氨酸含量,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测肺匀浆中bFGF、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅰ型胶原（Collagen Ⅰ）、转化生长因子-β1（TGF-β1）、结缔组织生长因子（CTGF）、Smad3和Smad7的mRNA表达.结果 对照组、肺纤维化组、空载体转染组、反义bFGF组、正义bFGF组大鼠肺系数值分别为：（7.5±1.5）％、（1O.8±1.4）％、（11.0±1.4）％、（8.8±1.7）％、（12.5±1.6）％;肺间质纤维化分级为：0、2.38±0.52、2.41±0.48、1.62±0.45、2.82±0.54;反义bFGF转染组肺系数明显降低（P＜0.05）,正义bFGF转染组肺系数明显增高（P＜0.05）;反义bFGF转染组肺间质纤维化明显减轻（P＜0.05）,正义bFGF转染组明显加重（P＜0.05）;反义bFGF转染组血清、肺泡灌洗液中bFGF含量及肺匀浆中羟脯氨酸含量明显降低（P＜0.05）,正义bFGF转染组含量明显增高（P＜0.05）;反义bFGF转染组肺匀浆中α-SMA、Collagen Ⅰ、TGF-β1、CTGF及Smad3 mRNA的表达水平明显降低（P＜0.05）,正义bFGF转染组表达明显增高（P＜0.05）,Smad7 mRNA的表达刚好相反.结论 bFGF反义寡核苷酸可以减轻博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化,可能机制是bFGF反义寡核苷酸下调了TGF-β1 Smad信号通路.
- 谭维军程真顺谭秋月叶燕青江平
- 关键词：碱性成纤维细胞生长因子反义寡核苷酸肺间质纤维化
- 碱性成纤维细胞生长因子反义寡核苷酸对肺成纤维细胞增殖及转化的影响
- 2014年
- 特发性肺纤维化（idiopathic pulmonary fibrosis,IPF）是一种不断进展而且致命的肺部疾病,发病机制不清,缺乏有效的药物阻止疾病的发展,病理改变表现为普通型间质性肺炎.成纤维细胞的增殖转化在肺纤维化的发展过程中起着重要的作用.文献报道,在肺纤维化患者的BALF和肺组织中碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）水平较高,可检测到大量表达bFGF蛋白和mRNA的肥大细胞,这些细胞主要分布在肺成纤维细胞和肌成纤维细胞大量增殖的成纤维灶区域.提示bFGF可能参与了肺成纤维细胞的增殖、转化,本研究通过体外培养肺成纤维细胞,观察bFGF反义寡核苷酸对转化生长因子（TGF）-β1诱导的肺成纤维细胞增殖、转化的影响及可能机制.
- 程真顺谭秋月谭维军叶燕青张莉
- 关键词：肺成纤维细胞增殖碱性成纤维细胞生长因子反义寡核苷酸PULMONARYBFGF蛋白普通型间质性肺炎
- 转化生长因子β1诱导A549细胞上皮-间质转化及其与钙蛋白酶的关系被引量：5
- 2015年
- 目的 探讨转化生长因子β1（TGF-β1）对肺泡上皮细胞上皮-间质转化的影响及与钙蛋白酶的关系.方法 体外培养人Ⅱ型肺泡上皮细胞来源的A549细胞株,将传代培养的细胞分为空白对照组、TGF-β1处理组、TGF-β1＋钙蛋白酶抑制剂处理组、钙蛋白酶抑制剂组,给予相应处理后Western-blot和RT-PCR分别检测上皮细胞标志物E钙黏素和间质细胞标志物α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）及钙蛋白酶-1（Calpain-1）的表达.结果 与空白对照组对比,TGF-β1组钙蛋白酶-1的mRNA表达及蛋白表达明显增高（P＜0.01）,E钙黏素的mRNA表达及蛋白表达均明显降低（P＜0.01）,α-SMA的mRNA表达及蛋白表达明显增高（P＜0.01）;加入钙蛋白酶抑制剂后再加入TGF-β1刺激,相对于TGF-β1处理组,钙蛋白酶-1的mRNA表达及蛋白表达明显降低（P＜0.01）,E钙黏素的mRNA表达及蛋白表达明显升高（P＜0.05）,α-SMA的mRNA表达水平及蛋白表达水平明显降低（P＜0.01）,而与对照组比较,钙蛋白酶-1、E钙黏素、α-SMA表达无明显差异（P＞0.05）;单加入钙蛋白酶抑制剂后,与空白对照组比较,钙蛋白酶-1、E钙黏素、α-SMA的mRNA表达及蛋白表达无明显差异（P＞0.05）.结论 TGF-β1可以通上调钙蛋白酶的表达诱导A549细胞发生上皮-间质转化.
- 谭维军程真顺谭秋月汪婷连敏张莉
- 关键词：上皮-间质转化转化生长因子Β1钙蛋白酶
- 肥大细胞通过细胞紧密接触对肺成纤维细胞的增殖、转化及功能的影响被引量：2
- 2013年
- 目的通过肥大细胞与肺成纤维细胞接触和非接触共体培养，观察肥大细胞对肺成纤维细胞增殖、转化及功能的影响。方法分离大鼠肺成纤维细胞和腹腔肥大细胞，实验分为3组：接触共育组、非接触共育组、对照组。计数各组肺成纤维细胞数量，通过免疫细胞化学方法检测肌成纤维细胞特异性标志物α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA），噻唑蓝（MTT）比色法测定肺成纤维细胞增殖率，通过酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测培养液中I型胶原蛋白含量。结果各组肺成纤维细胞数目在培养的第5天均达峰值，分别为接触共育组（3．70±0．83）×10^6个／孔；非接触共育组（1．40±0．32）×10^6个／孔；对照组（1．10±0．23）×10^6个／孔，接触共育组与非接触共育组和对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；MTT检测各组肺成纤维细胞吸光度（A）值：接触共育组为0．2520±0．0318，非接触共育组为0．1250±0．0212，对照组为0．1210±0．0124，接触共育组与非接触共育组和对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；各组α-SMA染色的平均吸光度（IA）值分别为0．3190±0．0436、0．1840±0．0190、0．1730±0．0226，接触共育组与非接触共育组和对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；接触共育组，培养液中Ⅰ型胶原蛋白含量明显高于非接触共育组和对照组[（192．56±2．37）、（143．58±2．07）、（121．43±1．98）μg／L，P〈0．05）。结论肥大细胞可能通过紧密接触来促进肺成纤维细胞的增殖、转化及胶原合成。
- 程真顺谭维军杨炯叶燕青江平
- 关键词：肥大细胞肺成纤维细胞增殖
