蔡加昌
- 作品数：47 被引量：276H指数：10
- 供职机构：浙江大学医学院附属第二医院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金浙江省医药卫生科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学农业科学化学工程更多>>
- KPC-2型碳青霉烯酶合并外膜蛋白缺失引起阴沟肠杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药
- 阴沟肠杆菌是存在于人和动物肠道的正常菌群,近年已成为重要的医院感染病原体。由于头孢菌素等广谱抗菌药的广泛使用,阴沟肠杆菌的耐药菌株不断增多,耐药水平不断增加。然而,临床上对碳青霉烯类抗生素耐药的阴沟肠杆菌非常少见。阴沟肠...
- 蔡加昌周宏伟陈功祥张嵘
- 文献传递
- 一株耐碳青霉烯类的阴沟肠杆菌的KPC酶检测被引量：18
- 2008年
- 目的研究阴沟肠杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制。方法临床分离到1株碳青霉烯耐药的阴沟肠杆菌ZY1465。对该菌株进行药物最低抑菌浓度（MIC）测定、接合试验、质粒图谱分析、等电聚焦电泳、特异性PCR扩增和DNA序列分析以及外膜蛋白分析等。结果阴沟肠杆菌ZY1465对亚胺培南和美罗培南的MIC均为32μg／ml，对青霉素类、头孢菌素类、头孢西丁、氨曲南、喹诺酮类和氨基糖苷类等多种抗生素呈高水平耐药。接合试验使受体菌大肠埃希菌对亚胺培南和美罗培南的敏感性明显降低（MIC由接合前的≤0．125μg／ml变为接合后的2μg／ml）。质粒酶切图谱分析表明转移接合子的质粒与编码blaKPC-2基因的质粒完全相同。等电聚焦显示阴沟肠杆菌ZY1465产等电点（pI）分别为5．4、6．7、7．3、7．8、7．9和8．6共6种β-内酰胺酶，转移接合子只产等电点6．7的1种β-内酰胺酶。特异性PCR扩增和测序证实该菌中存在TEM-1、肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶2（KPC-2）、DHA-1、CTX—M-14、CTX—M-3和染色体AmpC（等电聚焦电泳中未检测到）等耐药基因。外膜蛋白的尿素-十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析显示阴沟肠杆菌ZY1465有38000蛋白条带的缺失。结论首次在国内分离到产KPC-2型碳青霉烯酶的阴沟肠杆菌，多种β-内酰胺酶尤其是KPC-2的产生合并外膜蛋白缺失引起阴沟肠杆菌ZY1465对碳青霉烯类抗生素耐药。
- 蔡加昌周宏伟陈功祥张嵘
- 关键词：碳青霉烯外膜蛋白
- 碳青霉烯不敏感的阴沟肠杆菌中质粒介导的IMP-1型金属β-内酰胺酶和喹诺酮耐药基因的检测
- 碳青霉烯类抗生素对大多数β-内酰胺酶包括超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶都很稳定,具有抗菌谱广、杀菌活性强的特点,被认为是目前临床上控制革兰阴性菌感染最有效的抗生素。碳青霉烯酶的出现则是一个挑战。
- 蔡加昌周宏伟张嵘陈功祥
- 文献传递
- MALDI—TOF MS在细菌耐药性检测中的应用被引量：5
- 2013年
- 质谱是测量离子质荷比的一种分析技术，其基本原理是样品中各组分在离子源中发生电离，产生不同荷质比的带正电荷的离子，阳离子经电场加速形成离子束，进人质量分析器，阳离子在电场和磁场的作用下发生偏转而被分开形成质谱图，从而确定离子的质量。质谱仪种类非常多，工作原理和应用范围也有很大的不同。
- 蔡加昌张嵘
- 关键词：细菌耐药性检测MALDI离子束质谱仪正电荷
- IMP-4型金属β内酰胺酶合并膜孔蛋白OmpK36缺失引起肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素高水平耐药被引量：25
- 2010年
- 目的 研究临床分离的肺炎克雷伯菌Z4和Z5对碳青霉烯类抗生素耐药的分子机制.方法 2008年从卫生部北京医院的急诊室和神经内科患者的痰标本分别分离到2株对碳青霉烯类抗生素不敏感的肺炎克雷伯菌Z4和Z5.测定菌株MIC,对菌株进行质粒接合试验、质粒消除试验、β内酰胺酶IEF分析、PCR扩增和DNA序列分析以及外膜蛋白分析.结果 亚胺培南、美罗培南和厄他培南对Z4和Z5的MIC分别为32、32和256μg/ml以及1、1和2μg/ml.接合试验可使受体菌大肠埃希菌对碳青霉烯的MIC值从≤0.062 5或0.125μg/ml上升到1或2μg/ml.PCR扩增和序列分析发现Z4产IMP-4型金属β内酰胺酶、TEM-1型和SHV-1型广谱β内酰胺酶 Z5产IMP-4、TEM-1和SHV-12型超广谱β内酰胺酶 2株细菌的转移接合子均只产IMP-4.质粒消除试验发现Z5的IMP-4质粒消除株（TEM-1和SHV-12阳性）对碳青霉烯类抗生素敏感,而Z4的IMP-4质粒消除株（SHV-1阳性）对碳青霉烯类抗生素敏感性降低（亚胺培南、美罗培南和厄他培南MIC分别为0.25、0.5和4μg/ml）.Z4和Z5的blaIMP-4基因均位于大小约55 000 bp质粒的I类整合子上.外膜蛋白的SDS-PAGE和ompK35/36基因序列分析发现Z4由于ompK36基因中存在点突变（CAG突变为TAG）造成基因表达提前终止而导致OmpK36膜孔蛋白缺失.结论 质粒介导的IMP-4型金属β内酰胺酶的产生或β内酰胺酶的产生合并OmpK36膜孔蛋白缺失均可引起肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素敏感性降低,IMP-4合并OmpK36膜孔蛋白缺失则可导致肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素高水平耐药.
- 张嵘蔡加昌胡云建周宏伟陈功祥
- 关键词：Β内酰胺酶类
- 四种碳青霉烯类抗生素筛选金属酶方法的比较被引量：7
- 2011年
- 目的 以EDTA为金属酶抑制剂,比较4种碳青霉烯类抗生素对金属酶筛选的效果.方法 从浙江大学附属第二医院收集产金属β内酰胺酶革兰阴性杆菌30株（16株肠杆菌科细菌和14株非发酵菌）、产KPC肠杆菌科9株和产OXA鲍曼不动杆菌10株,用双纸片金属酶筛查试验分析IPM、MEM、PAN和ETP在加入EDTA前后抑菌环直径的变化.结果 当以抑菌环直径差值≥5 mm为假定判读标准时,PAN组的敏感度相对较高[66.7％ （20/30）],其次为MEM组[63.3％ （19/30）]和IPM组[60.0％ （18/30）],ETP组最差[43.3％ （13/30）]；当以抑菌环直径差值≥4 mm为假定判读标准时,MEM组和PAN组的敏感度达到80.0％ （24/30）.以抑菌环直径差值≥3 mm为假定判读标准时,IPM组和MEM组的敏感度达到90.0％ （27/30）,而PAN组和ETP组的敏感度为83.3％ （25/30）；在这3类假定判读标准下,4种抗生素的特异度均达到100％.用金属酶筛查试验筛选16株产金属酶的肠杆菌科细菌,当以5 mm为假定判读标准时,PAN组的敏感度最高[75.0％ （12/16）]；以4mm为假定判读标准时,PAN组的敏感度高达93.8％ （15/16）,远高于IPM组[75.0％ （12/16）]、MEM组[68.8％ （11/16）]和ETP组[68.8％ （11/16）].结论 以EDTA为抑制剂的金属酶筛查试验,操作简便快捷,特异性高.不推荐使用ETP来筛查金属酶,对于革兰阴性杆菌的金属酶筛选可选择以≥4 mm为判读标准的MEM或PAN纸片；对于肠杆菌科细菌的金属酶筛选试验可选择以≥4 mm为判读标准的PAN纸片；而对于非发酵菌的金属酶筛查试验,不推荐使用PAN.
- 胡燕燕周宏伟孙谦蔡加昌陈功祥张嵘
- 关键词：细菌蛋白质类Β内酰胺酶类依地酸微生物敏感性试验
- 多学科交叉教学模式在临床微生物检验诊断学研究生培养中的探讨被引量：1
- 2022年
- 目的探讨多学科交叉教学模式在临床微生物检验诊断学研究生培养中的应用效果。方法阐述了目前临床微生物检验诊断学专业研究生的培养教学现状,列举了三种不同的多学科交叉教学模式方法,包括“微生物交叉学科论坛”公众号的建立,研究生自主解读前沿文献,独特的宣传输出方式如撰写科普书籍对研究生教育的作用。结果多学科交叉教学模式能激发研究生的主观能动性,培养其主动学习主动思考的习惯。同时,交叉学科的学习,有助于研究生对研究课题的深入全面认知,提高课题研究成果质量,发表高质量研究论文。结论多学科的交叉融合是未来大趋势,该教学模式以期能给临床检验诊断专业研究生培养工作起到一定的借鉴作用。
- 张嵘周宏伟胡燕燕蔡加昌陈功祥沈张奇
- 关键词：教学模式
- 一株弗劳地枸橼酸杆菌中发现KPC-2型碳青霉烯酶被引量：6
- 2007年
- 张嵘蔡加昌周宏伟陈功祥
- 关键词：枸橼酸杆菌碳青霉烯细菌鉴定仪受体菌青霉素类
- 肠杆菌科细菌中质粒介导的KPC-2型碳青霉烯酶的检测被引量：39
- 2008年
- 目的研究重症监护病房（ICU）出现的碳青霉烯耐药的黏质沙雷菌、肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌等肠杆菌科细菌的分子流行病学及耐药机制。方法2006年4月-2007年2月，从我院2个ICU病房分离到对碳青霉烯耐药或敏感性降低的21株黏质沙雷菌、10株肺炎克雷伯菌和1株大肠埃希菌。用脉冲场凝胶电泳（PFGE）和肠杆菌基因间重复性一致序列-PCR（ERIC-PCR）分析这些菌株的分子流行病学。用接合试验、质粒消除试验、质粒图谱分析、等电聚焦电泳（IEF）、特异性PCR扩增和序列分析以及外膜蛋白分析等技术研究细菌对碳青霉烯耐药的分子机制。结果21株黏质沙雷菌为同一克隆株；10株肺炎克雷伯菌亲缘关系相近。亚胺培南和美罗培南对黏质沙雷菌、肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的MIC为2-8μg／ml，肺炎克雷伯菌K10为128和256μg／ml。所有菌株接合试验均获得成功，亚胺培南和美罗培南对接合子的MIC由原来的≤0．125μg／ml上升到1-2μg／ml。IEF、PCR扩增和序列分析证实黏质沙雷菌产KPC-2型碳青霉烯酶[等电点（pI）为6．7]和pI为6．5的β内酰胺酶；肺炎克雷伯菌产TEM-1（p15．4）、KPC-2、CTX-M-14（p17．9）和p1为7．3的β内酰胺酶；大肠埃希菌产KPC-2、CTX-M-15（pI9．0）和pI为7．3的β内酰胺酶；所有接合子均只产KPC-2一种β内酰胺酶。所有接合子质粒DNA的EcoRⅠ、HindⅢ和BcuⅠ限制性酶切图谱完全相同。外膜蛋白的十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺电泳和基因序列分析发现肺炎克雷伯菌K10由于OmpK36基因中存在插入序列ISEcp1而导致OmpK36膜孔蛋白的缺失。结论我院ICU病房出现大量碳青霉烯耐药的黏质沙雷菌、肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌；KPC-2是引起这些细菌对碳青霉烯耐药或敏感性降低的主要原因；KPC-2合并膜孔蛋白缺失可导致肺炎克雷伯菌对碳青霉烯高水平耐药；同一种编码blaKPC-2的质
- 张嵘蔡加昌周宏伟陈功祥
- 关键词：肠杆菌科细菌蛋白质类Β内酰胺酶类
- 弗劳地枸橼酸杆菌中质粒介导的KPC-2型碳青霉烯酶和CTX-M-14型超广谱β-内酰胺酶的检出
- 枸橼酸杆菌为条件致病菌,当机体抵抗力下降时可引起腹泻和肠道外感染如败血症、脑膜炎、泌尿道、呼吸道及创伤感染等。根据中国医院内病原菌耐药监测网(NPRS)数据,1994-2001年分离到的革兰阴性致病菌中,枸橼酸杆菌属占第...
- 蔡加昌张嵘周宏伟陈功祥
- 文献传递
