范时洋
- 作品数：6 被引量：9H指数：2
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- siRNA转染BMSCsβ2微球蛋白的实验研究
- 目的:MHCⅠ类分子对移植免疫排斥反应承担主要作用，β2m是MHCⅠ的一个重要组成部分，在组装、维持MHC1分子功能方面有极其重要的作用。siRNA可用来转染目标mRNA，调节特殊的靶基因。那么，我们设计通过siRNA转...
- 范时洋
- 关键词：骨髓基质干细胞软骨细胞分化SIRNA转染激光共聚焦显微镜
- 文献传递
- β2微球蛋白在骨髓基质干细胞的表达
- 2013年
- 通过流式细胞技术和激光共聚焦显微镜探索骨髓基质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)β2微球蛋白(beta 2 microglobulin,β2M)的表达情况。取第3代相同状态的SD大鼠骨髓基质干细胞,分为A、B两组,A组为未分化的BMSCs,B组为软骨诱导分化1周的BMSCs,两组均采用流式细胞技术和激光共聚焦显微镜分别从数量和细胞轮廓上检测β2M的表达。流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测结果均表明,未分化BMSCs的β2M表达明显低于软骨诱导分化的BMSCs。结果表明,未分化的BMSCs免疫原性较低,处于软骨分化的BMSCs免疫原性明显增强。
- 范时洋金海东戴兵潘骏
- 关键词：骨髓基质干细胞Β2微球蛋白免疫原性
- 低氧对脂肪干细胞和关节软骨细胞三维共培养成软骨能力的影响被引量：4
- 2014年
- 背景:多项体内外研究表明低氧和共培养均促进干细胞向软骨细胞方向分化。目的:观察低氧对脂肪干细胞和关节软骨细胞三维共培养成软骨能力的影响。方法:脂肪干细胞和关节软骨细胞二者按3∶1比例混合,以5×1010 L-1接种于聚乳酸-羟基乙酸共聚物/明胶支架上,分别在常氧(体积分数为20%O2)、低氧(体积分数为5%O2)环境下培养6周。苏木精-伊红染色进行组织学分析,阿尔新蓝染色鉴定糖胺多糖的合成,免疫组化鉴定Ⅱ型胶原的表达,并测定各组支架-细胞复合物的DNA、糖胺聚糖、羟脯氨酸含量。结果与结论:低氧组苏木精-伊红染色显示大量细胞及细胞外基质生成,阿尔新蓝染色显示有大量糖胺多糖生成,免疫组化显示Ⅱ型胶原表达强阳性,且DNA、糖胺聚糖、羟脯氨酸等各项指标均高于常氧组。表明低氧促进脂肪干细胞和关节软骨细胞共培养成软骨分化。
- 戴兵徐海艇金海东陈辉蔡建武范时洋潘骏
- 关键词：干细胞共同培养技术细胞低氧低氧脂肪干细胞聚乳酸-羟基乙酸共聚物
- 白藜芦醇通过PI3K/Akt通路及线粒体途径抑制软骨肉瘤被引量：5
- 2014年
- 目的:探讨白藜芦醇抑制软骨肉瘤的机制及对线粒体途径和PI3K/Akt通路的影响。方法:SW1353软骨肉瘤细胞培养至对数生长期后设对照组和白藜芦醇处理组,药物处理组用25、50和100μmol/L白藜芦醇处理24 h、48 h或72 h。采用CCK8法检测SW1353软骨肉瘤细胞的活力,Hoechst 33258荧光染色观察细胞凋亡,Western blotting检测activated caspase-3、Bcl-2、Bax、Akt和p-Akt蛋白在细胞中表达情况,细胞划痕实验观察细胞迁移情况。结果:白藜芦醇处理后细胞活力下降,呈时间-剂量依赖性(P<0.01)。Hoechst 33258染色检测可见药物处理组有明显的细胞凋亡核象。Western blotting检测显示药物处理组activated caspase-3和Bax蛋白表达上调,Bcl-2蛋白和p-Akt蛋白表达下调,总Akt改变不显著。细胞划痕试验显示,白藜芦醇能显著抑制SW1353细胞的迁移。结论:白藜芦醇能够诱导软骨肉瘤凋亡,部分是通过线粒体途径及PI3K/Akt信号通路发挥作用。
- 金海东戴兵蔡建武陈辉范时洋潘骏
- 关键词：软骨肉瘤白藜芦醇PI3K/AKT通路细胞凋亡
- siRNA对预分化骨髓间充质干细胞β_2M表达的影响
- 2014年
- 目的:研究小干扰RNA(siRNA)对预分化骨髓间充质干细胞(BMSCs)β2-微球蛋白(β2M)基因表达的影响。方法:BMSCs成软骨诱导液预分化21 d后,将β2M siRNA用Lipofectamine 2000转染BMSCs、分为转染组、空白对照组和阴性对照组,应用实时定量PCR、Western blotting、激光共聚焦显微观察等方法检测siRNA对预分化BMSCs的β2M mRNA和蛋白的表达情况,甲苯胺蓝和Ⅱ型胶原免疫荧光检测预分化BMSC的蛋白聚糖多聚体和Ⅱ型胶原分泌情况。结果:实时定量PCR、Western blotting和激光共聚焦显微观察结果显示siRNA成功抑制β2M mRNA和蛋白的表达,甲苯胺蓝和Ⅱ型胶原免疫荧光结果显示siRNA不影响预分化BMSCs蛋白聚糖多聚体和Ⅱ型胶原蛋白的分泌。结论:RNAi干扰β2M可降低BMSCs中β2M mRNA和蛋白的表达,但不影响预分化BMSCs的软骨细胞特性。
- 戴兵范时洋陈龙金海东蔡建武潘骏
- 关键词：Β2-微球蛋白骨髓间充质干细胞
- 成人多能祖细胞的研究进程
- 2013年
- 成人多能祖细胞(multipotent adult progenitor cells,MAPC)最初是从骨髓中分离出来的一种稀有的类似于胚胎外内皮细胞的细胞,与骨髓基质干细胞相比,其生物学性状更加稳定,扩增120代不衰老,分化能力更强,因此受到越来越多的干细胞研究者的青睐。该文将就MAPC的发现、发展过程及前景作一综述。
- 范时洋易先宏薛向阳潘骏
- 关键词：间充质干细胞骨髓
