苏伟 作品数:12 被引量:7 H指数:1 供职机构: 复旦大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市科技人才计划项目 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 生物学 轻工技术与工程 农业科学 文化科学 更多>>
水稻中一个LRR-RLK基因OsInlk2的克隆与表达分析 被引量:1 2006年 富含亮氨酸重复序列的类受体蛋白激酶(LRR-RLKs)在植物的生长发育过程中起到非常重要的作用,如细胞识别,抵抗病原体的入侵以及自交不亲和反应.现已克隆了一个水稻LRR-RLK基因OsInlk2,并对它进行了序列和表达分析,结果表明OsInlk2由三个部分组成,即胞外LRR结构域,跨膜区域和蛋白激酶区域.种内变异分析表明OsInlk2在籼稻中表达,而在粳稻中却不表达.另外组织表达分析表明OsInlk2在茎和幼穗中的表达量很高,而在叶片和根中的表达量较低.对珍汕97B三叶期幼苗进行盐胁迫和冷胁迫,结果表明随着NaCl浓度的提高,OsInlk2的表达呈先减后增的趋势;4℃低温处理8 h,该基因的表达量比对照降低,但随着处理时间的延长,表达量却急剧上升. 张青华 李克贵 何光明 卫春 钱晓茵 苏伟 洪芳 杨金水关键词:种内变异 组织特异表达 盐胁迫 冷胁迫 水稻 LRR受体蛋白基因HSL2存在自然反义转录本的初步分析 2015年 自然反义转录本(Natural Antisense Transcripts,NAT)是一类与编码蛋白的mRNA互补的转录本.基于生物信息学,Tilling arrays和高通量测序等方法发现在人类、小鼠和植物基因组中NAT存在广泛的表达.本实验发现在拟南芥基因组中富亮氨酸重复类受体蛋白激酶(LRR-RLK)和富亮氨酸重复类受体蛋白(LRRRLP)家族基因中分别有22和14个基因存在NAT的表达.通过半定量RT-PCR和荧光定量PCR(Real-time PCR)等技术验证了NAT的存在.通过快速扩增cDNA末端(3’RACE)方法进一步确认了NAT的存在并且获得了这些NAT的3’末端序列.过表达LRR-RLK家族调控拟南芥花瓣脱落HSL2基因位点的NAT能够降低HSL2和它的同源基因HAE的表达. 胡成国 苏伟 王学路关键词:半定量RT-PCR 荧光定量PCR 水稻成花素基因Hd3a在ABA调控种子萌发中的功能研究 2023年 Hd3a(Heading date 3a)是拟南芥成花素基因FT(Flowering Locus T)的同源基因,作为水稻开花的强诱导因子,对短日照条件下水稻的开花具有重要的促进作用。Hd3a在水稻发育中是否具有其他功能,目前的认识仍非常有限。在我们的研究中,通过对Hd3a基因组序列进行生物信息学分析,发现Hd3a的启动子序列包含响应脱落酸(Abscisic Acid,ABA)信号的ABRE(ABA-Responsive Element)元件。荧光素酶发光反应和RT-qPCR分析都证实了Hd3a的转录表达随外源ABA增加而减少。通过不同浓度的ABA处理水稻野生型和hd3a缺失突变体种子,结果表明hd3a缺失突变体种子萌发明显被抑制,暗示了Hd3a缺失导致种子萌发中对ABA敏感性增强,同时hd3a突变体中ABA信号途径响应基因ABI5(ABA Insensitive 5)、ABL1(ABI5-Like1)的表达量升高,表明Hd3a可负调控ABA信号。综上所述,Hd3a可以响应ABA信号调控水稻种子萌发,这些研究结果对于深入理解水稻Hd3a基因的生物学功能具有重要意义。 魏会哲 李成章 王帆 王帆 苏伟关键词:水稻 脱落酸 成花素 种子萌发 水稻程序性细胞苏伟相关基因的克隆和功能分析 苏伟关键词:甘氨酸 水稻 程序性细胞死亡 自噬 拟南芥RabA2b互作蛋白的筛选与鉴定 被引量:1 2016年 Rab蛋白家族在调控细胞囊泡的运输过程中发挥着重要作用.拟南芥中存在数量庞大的RabA亚族成员,它们参与调控植物不同阶段的生长发育过程.为了寻找拟南芥RabA亚族下游的调节蛋白或效应蛋白,进而阐明RabA在细胞活动中的角色,本研究选取RabA2b蛋白进行了深入研究.本研究首先构建过表达RabA2b的拟南芥植株,同时结合免疫共沉淀方法和液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)检测到多个Hsp70蛋白家族成员与RabA2b蛋白共沉淀.为了进一步研究Hsp70成员与RabA2b的相互关系,将5个细胞质和细胞核定位的Hsp70s蛋白分别构建于植物表达载体,通过在烟草叶表皮细胞中瞬时表达Hsp70s和RabA2b发现它们共定位于细胞质膜、细胞质以及细胞核周围的丝状结构.同时,体外pull-down实验证明了5个Hsp70s蛋白都能与RabA2b蛋白直接相互作用.此外,双分子荧光互补实验(BiFC)进一步证实了Hsp70s与RabA2b在烟草叶表皮细胞中的相互作用,说明拟南芥中细胞质和细胞核定位的Hsp70s可以作为RabA2b的调节蛋白或效应蛋白一同调控植物的生长发育过程. 冷琳娜 蒋建军 张弛 王学路 苏伟关键词:HSP70 相互作用 拟南芥Patellin2相互作用蛋白的筛选及鉴定 被引量:1 2016年 Patellin 2(PATL2)蛋白是具有SEC14蛋白结构域的脂质转移蛋白,定位于细胞分裂后期的细胞板上,在细胞分裂过程中发挥重要的作用.同时,PATL2蛋白还受到植物激素和环境变化的调控,说明PATL2可能在植物激素和环境变化的调控下参与细胞分裂过程.为了深入了解PATL2蛋白的生物学功能,研究PATL2蛋白发挥作用的分子生物学机制,我们分析了它在植物体内的表达特点和与之相互作用的蛋白.我们通过免疫共沉淀与液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)分析了过表达PATL2的转基因植株,并获得了多个可能与PATL2相互作用的蛋白,其中一个是细胞周期蛋白依赖性激酶CDKB2;2.通过观察PATL2启动子驱动的GUS报告基因在植物中的表达,发现PATL2基因在叶片、花瓣、花粉中广泛表达,但在角果中的表达非常有限,仅存在于角果的两端,这与已报道的CDKB2;2的组织分布部分相同.同时,烟草叶表皮细胞瞬时表达结果表明PATL2和CDKB2;2能够共定位于烟草叶表皮细胞的细胞膜和细胞质中.体外pull-down实验和双分子荧光互补实验(BiFC)实验分别确定了PATL2和CDKB2;2在植物体外和植物体内的相互作用. 李琼 王学路 苏伟关键词:蛋白质相互作用 拟南芥组蛋白分子伴侣AtHIRA参与体细胞同源重组及盐胁迫响应 被引量:2 2018年 HIRA是组蛋白H3.3的特异分子伴侣,在组蛋白H3.3掺入染色质的过程中发挥重要作用。研究表明,HIRA在哺乳动物胚胎发育和DNA损伤修复过程中不可或缺。而目前人们对于植物中HIRA同源基因功能的研究相对较少。该研究主要关注拟南芥(Arabidopsis thaliana)AtHIRA基因在植物体细胞同源重组以及减数分裂同源重组过程中的功能。将体细胞同源重组和减数分裂同源重组报告系统分别导入野生型和hira-1突变体后统计同源重组频率,结果表明在正常生长条件下及在伯莱霉素(bleomycin)或UV-C处理条件下,hira-1突变体体细胞的分子内和分子间同源重组频率均低于野生型。而在正常生长条件下,野生型与hira-1突变体花粉母细胞间的减数分裂同源重组频率没有明显差异,hira-1突变体的DNA损伤水平与野生型接近。qRT-PCR结果表明,DNA损伤修复相关基因RAD51和RAD54在hira-1突变体中的表达水平均高于野生型。此外,盐胁迫处理实验表明,hira-1突变体对于高盐胁迫更加敏感。综上,At HIRA在拟南芥体细胞同源重组及盐胁迫响应过程中发挥了一定作用。 陈成 董爱武 苏伟关键词:同源重组 DNA损伤修复 减数分裂 盐胁迫 水稻程序性细胞死亡相关基因的克隆和功能分析 程序性细胞死亡(PCD)是生物体内高度协调的生理过程,在植物发育、分化和压力诱导下都发挥着重要作用。在哺乳动物中很多抑制或诱导PCD的基因已经被克隆和分析,但是却很少在植物中发现它们的同源基因。
我们先前在水稻... 苏伟关键词:甘氨酸 程序性细胞死亡 自噬 基因克隆 “服装CAD”推档系统的数学模型 被引量:1 1992年 研究了“服装CAD”推挡系统中的数学模型.以Bezier曲线和重节点的B样条曲线作为推档曲线,引进一种变换模拟推档过程,证明其变换的某些不变性,经上海第一服装厂的实践,表明此方法是可靠的. 曹沅 徐惠平 苏伟 张静华 刘鼎元关键词:推档 服装 CAD 数学模型 油菜素甾醇信号通路中BKI1互作蛋白ERD7的筛选与鉴定 被引量:1 2014年 油菜素甾醇(Brassinosteroid,BR)是一类重要的调控植物生长发育的激素,BKI1在BR信号转导通路中具有正负调控的双重功能.为了深入研究BK11正/负调控BR信号通路的分子机制,本研究使用BKI1作为诱饵蛋白对拟南芥cDNA文库进行酵母双杂交筛选,获得了一段新的与BR信号通路组分BKI1相互作用的肽段,BLAST搜索显示该肽段与拟南芥ERD7的N端序列一致.生物信息学分析表明ERD7是一个植物特异表达基因,在单子叶、双子叶、以及低等植物中保持很高的一致性.酵母双杂交方法证实全长ERD7与BKI1能够相互作用,Pull-down分析证实这两个基因在植物体内直接相互作用,烟草细胞瞬时表达显示ERD7和BKI1能够共定位于细胞质和细胞膜.BKI1和ERD7相互作用的发现为进一步研究BKI1的调控机制奠定了基础. 程鳞 张弛 蒋建军 苏伟 王学路关键词:酵母双杂交