罗进
- 作品数：11 被引量：33H指数：4
- 供职机构：第四军医大学药学系药物基因组学教研室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生电子电信更多>>
- 宫颈癌与HLA等位基因DQB1＊03、DR15的相关性研究被引量：9
- 2004年
- 目的 :探讨我国陕西地区宫颈癌的发生与人类白细胞抗原 (HLA) DQB1 0 3、DR15等位基因的相关性 .方法 :采用序列特异性引物的聚合酶链式反应 (PCR SSP)方法 ,扩增HLA等位基因DQB1 0 3、DR15的目的DNA片段 (分别为 79、197bp) ,分析两对等位基因在陕西地区宫颈癌患者和正常人中分布频率的差异 .结果 :4 5名宫颈癌患者组中DQB1 0 3等位基因频率显著高于 5 0名健康对照组 ,DR15等位基因频率在两组中的分布无显著差异 .结论 :HLA等位基因DQB1 0 3可能与宫颈癌的发生具有相关性 ,DR15可能与宫颈癌的发生不存在关联 .
- 夏琳张菊陈中灿白玉杰罗进杨浩阎小君
- 关键词：宫颈肿瘤HLA抗原
- 主动式生物芯片系统的设计和仿真
- 2005年
- 为了克服现有被动式生物芯片的不足,本文设计了一种新型的主动式芯片系统,在该系统中引入负压发生装置及控制装置,对NC膜上发生的抗原抗体反应进行控制。对该系统进行仿真,结果表明它具有快速、稳定、鲁棒性好等优点,能满足实际要求。该系统将有助于提高抗原抗体反应的效率,改善芯片检测结果的重复性和准确性。
- 朱文伟张文红朱文焕李丁罗进夏琳杨浩韩锋产董秀珍阎小君
- 关键词：蛋白芯片抗原抗体反应压力控制
- 淋球菌基因诊断新进展被引量：2
- 2005年
- 淋球菌是一类寄生于人体尿道黏膜,导致人类泌尿生殖系感染的的细菌。及时、准确地诊断淋球菌感染是控制淋病传染的关键。基因检测技术在淋球菌临床诊断中的应用将使淋球菌的检测更加灵敏、准确。本文就近年来应用于淋球菌临床诊断的目的基因和新的检测技术以及它们在临床诊断中的特异性和敏感性综述如下。
- 罗进王琰张菊阎小君
- 关键词：奈瑟球菌淋病基因
- 荧光PCR检测乙型肝炎病毒cccDNA方法的建立被引量：9
- 2008年
- 目的:建立特异、灵敏的荧光PCR检测乙型肝炎病毒cccDNA的方法。方法:首先用煮沸法提取血清中的HBVDNA,然后用绿豆核酸酶(Mung Bean Nuclease)消化松弛环状HBVDNA(rcDNA),保留共价闭合环状DNA(cccDNA)。设计一条嵌合引物,该引物分为两部分序列,近5′部分为人为设定的序列,近3′部分是与正链缺口下游互补序列。先用该嵌合引物以正链为模板,自HBV cccDNA1590nt开始向上游延伸,然后以嵌合引物中人为设定的序列为下游引物、与负链互补的上游引物以及一条在两引物之间与正链互补的Taqman探针,扩增检测嵌合引物延伸的产物。由于带有缺口的HBV rcDNA无法被嵌合引物延伸,因此最终只能扩增检测到cccDNA。结果:用含有相应HBV DNA片端的PUC19质粒模拟HBV cccDNA,该检测方法的检测灵敏度为1×103拷贝/ml;以模拟松弛环状DNA(rcDNA)与模拟HBV cccDNA按不同比例混合,在rcDNA与cccDNA的比为1×109拷贝/ml:1×103拷贝/ml时,该方法仍可检测到模拟cccDNA;单独检测模拟rcDNA浓度为1×109拷贝/ml时,该方法检测未出现假阳性。结论:该检测乙型肝炎病毒cccDNA的方法操作简单、灵敏、特异,适用于检测血清中HBV cccDNA。
- 罗进郭晏海
- 关键词：聚合酶链反应乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA
- 基于蛋白芯片模式的TORCH感染检测系统的构建及优化研究
- TORCH是一类引起新生儿出生缺陷的微生物的总称,分别代表弓形虫、风疹病毒、巨细胞病毒和单纯疱疹病毒Ⅱ型和其他一些感染因素。这五种微生物在孕期感染妇女可以引起流产、早产及胎儿生长迟缓和发育畸形。由TORCH感染引起的孕期...
- 罗进
- 关键词：风疹单纯疱疹病毒II型
- 文献传递
- 基于斑点免疫金渗滤法的蛋白微矩阵被引量：2
- 2005年
- 目的 :开发一种低成本、简单易用的基于免疫金渗滤法的蛋白微矩阵用于平行检测分析血清中多种靶分子 .方法 :用点样仪将人IgG和多种抗原点到硝酸素纤维膜上 ,经小牛血清白蛋白封闭后垫以高分子吸水材料 ,随后滴加血清样本 ,免疫金显色 ,CCD阅读仪分析相对灰度值 ,并与ELISA法的检测结果进行对比 .结果 :微矩阵的IgG检测范围在 1～5 0ng之间 ;按照 4 0 0份阴性血清相对灰度值的均数加上 3倍标准差制定临界值 .在 186份随机血清试验中 ,与ELISA试剂盒比较 ,检测结果无显著性差异 ,总体灵敏度和特异度均大于90 % .结论 :蛋白微矩阵与ELISA方法相比 ,检测效果相当 ,且具有操作步骤简单 ,易于使用 ,检测成本低 ,耗时少的优点 ,适合于在临床检验上的应用 .
- 杨浩李丁韩锋产罗进夏琳王小明阎小君
- 关键词：斑点免疫金渗滤法蛋白质类
- 多聚抗原肽微阵列分析平台的建立与初步应用被引量：1
- 2006年
- 基于多肽设计合成技术建立了一个快速、高通量、自动化的多聚抗原肽微阵列分析平台.选取人巨细胞病毒(HCMV)的包膜糖蛋白B和被膜碱性磷酸蛋白PP150,幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)尿素酶(Ure)β亚基为靶蛋白,分析筛选出优势线性表位序列,Fmoc法固相合成上述线形表位的多聚抗原肽(MAPs),高效液相色谱仪(HPLC)纯化后,用机器人点样仪按一定的矩阵排列形式点印至硝酸纤维素膜上,2%的小牛血清封闭,塑料壳体封装制备成MAPs微阵列成品.随机抽样经质控血清鉴定后用于随机人群血清试验并与ELISA检测结果进行比较.筛选、合成并鉴定出4条MAPs.用该MAPs微阵列检测的Hp和HCMV阳性及阴性质控血清结果均与质控血清情况相符,120份随机血清检测结果与用重组抗原和病原微生物裂解物抗原包被的ELISA法检测结果相比具有较好的一致性,Ure-1、Ure-2和PP150三种MAPs的灵敏度和特异性均大于90%.MAPs微阵列片间质控试验结果变异系数小于7%,示重复性良好.MAPs微阵列是一种快速、高通量、自动化的分析平台,该平台在预防性疫苗的开发和蛋白质组学的研究中具有较大的前景.
- 徐小洁张虎明李丁韩锋产张文红郭慧芳温冬青罗进阎小君康磊
- 关键词：多肽合成微阵列
- 蛋白质芯片定量检测乙肝表面抗原系统的建立被引量：1
- 2008年
- 目的：建立以蛋白质芯片检测乙肝表面抗原的方法,以期对乙肝患者血清中HBsAg进行定量检测,帮助动态分析病情和评估疗效。方法：用点样仪将一种抗-HBsAg单抗点到硝酸纤维素膜（NC膜）上制成芯片,HRP标记另一种抗-HBsAg单抗,以双抗夹心法捕获血清中HBsAg,建立HBsAg浓度与检测点灰度间关系的标准曲线并通过芯片阅读仪进行定量分析。结果：建立的蛋白质芯片检测系统能快速准确地对血清中HBsAg进行定性和定量检测,系统的定量检测范围是1-10000 ng/ml。结论：蛋白质芯片检测系统具有微型化和自动化的优点,与PCR HBV-DNA相比其操作更简便,所需时间更短,可以代替传统的ELISA方法,是更为科学的疗效评估方法。
- 吴昊罗进郭晏海王小明闫小君李丁
- 关键词：蛋白质芯片硝酸纤维素膜
- 反向荧光偏振(FP)检测血清中HBV多聚酶基因突变
- 2008年
- 目的:建立简便的HBV多聚酶基因序列中拉米呋啶耐药性相关的基因突变的检测方法。方法:利用pfu酶的3′-5′外切校正功能和荧光偏振光检测技术进行点突变的检测。首先PCR扩增HBV多聚酶基因,然后用3′标记荧光分子FAM的探针与扩增产物中待测核苷酸的下游序列杂交,使探针3′第一个碱基与靶序列中待测点的碱基配对。若碱基配对正确,pfu酶可以沿探针的3′端延伸;若碱基配对错误,pfu酶须将探针3′标有荧光分子的核苷酸切掉,然后再沿探针3′端延伸。由于第一种情况,荧光分子与DNA链相连,分子量增加,则荧光偏振光值增大;而第二种情况,荧光分子与探针分离,荧光分子的整体分子量减小,则荧光的偏振光值减小,这样可以通过荧光偏振光值的大小判断待测点核苷酸的改变。结果:该方法可以检测出HBV多聚酶基因序列中特定位置的核苷酸类型,可以检测1×101个拷贝的模板量。对30例经过6个月以上拉米呋啶治疗的患者血清进行检测,检测出其中有3例是甲硫氨酸(M)密码子ATG中的A→G变异;2例是ATG中的G→C变异;1例是ATG中的G→T。结论:该技术可以对血清中HBV多聚酶基因序列中点突变以及其他基因突变进行检测。
- 罗进郭晏海
- 关键词：荧光偏振HBVDNA
- UreB蛋白B细胞抗原表位快速筛选与鉴定被引量：5
- 2006年
- 以幽门螺旋杆菌(Helicobacterpylori,Hp)主要抗原蛋白尿素酶B(ureaseB,UreB)为靶蛋白,建立一种新的B细胞抗原表位筛选与鉴定方法.运用Fmoc固相肽合成法合成11条HpUreB蛋白的单表位抗原肽片段,在其氨基端标记FITC荧光素,应用荧光偏振方法(fluorescencepolarization,FP)快速鉴定这些肽片段的抗原性,并通过FP法在大规模样品中快速筛选相应抗体滴度高、分布人群广的优势抗原表位肽.结果表明,合成的11条UreB蛋白线性抗原肽中,10条具有较强的抗原性,其中No.2、No.5和No.11抗原肽相应的特异性抗体在感染Hp的人群中分布较广,抗体滴度较高,为UreB的优势抗原表位肽.对抗原表位进行多参数综合分析与设计,通过FP技术快速鉴定抗原肽,并筛选优势抗原表位肽,对于疾病的抗原表位谱研究具有重要的意义,同时在疾病的诊断、分型及治疗中具有重要的应用前景.
- 郭慧芳张文红温冬青韩锋产张虎明罗进阎小君
- 关键词：抗原表位尿素酶B抗原性荧光偏振
