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利用RNAi技术分析VP16对HSV-1增殖过程的影响: 2006年; 目的:探讨在RNAi技术条件下,HSV-1感染Vero细胞过程中,病毒间层蛋白VP16的生物学功能。方法:用T7RNA聚合酶体外合成针对VP16 mRNA的3种T7siRNAs。用Lipofectamine 2000脂质体转染Vero细胞后接种HSV-1,感染后12、24、36、48、60和72h,分别收取实验组和对照组标本,Karber法计算病毒滴度值,绘制子代病毒一步生长曲线。结果:病毒子代一步生长曲线显示,转染siRNAs的实验组Vero细胞接种HSV-1后24h(24h pi),病毒滴度明显低于对照组;12h pi也观察到病毒滴度低于对照组的现象;siRNAs具有协同作用,三种siRNAs同时作用时干扰效果最为明显;实验组病毒滴度高峰出现时间后移12h左右。结论:HSV-1间层蛋白VP16对病毒复制、成熟起重要的生物学作用。; 夏春祥寸韡郭宏雄刘龙丁罗杰李琦涵; 关键词：IRNA 蛋白质P16 病毒复制

HSV1 ICP22对HCMV主要即刻早期启动子结构的效应分析被引量：1: 2007年; 人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)主要即刻早期(major immediate-early,MIE)启动子具有很强的转录启动能力,其顺式调控元件在这一区域形成多次重复的特殊结构,而这些元件及其组合方式在转录启动过程中的生物学意义尚不清楚.实验发现HSV1即刻早期蛋白ICP22能对多种病毒及细胞启动子及增强子发挥极强的转录抑制作用,利用CAT(氯霉素乙酰转移酶)报道基因系统检测ICP22对各种不同的HCMV即刻早期基因启动子结构元件及突变体转录活性的影响显示:尽管各种元件在ICP22存在的情况下表现出了各自独特的转录效应,但它们组合后形成的不同突变体以及完整的HCMV启动子所表现的转录效率又不是这些元件功能的简单叠加,并且其特定的组合方式能够拮抗ICP22的作用.因此,可以认为,HCMV主要即刻早期基因启动子能以特别的方式与细胞和病毒的转录因子共同调控其下游基因的表达.; 罗杰寸韡车艳春王丽春李卫中刘龙丁李琦涵; 关键词：人巨细胞病毒 ICP22 启动子

利用HSV1α-基因启动子构建真核表达载体phIE被引量：1: 2006年; 以pcDNA3质粒为骨架,构建由1型单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus I,HSVI)立即早期基因启动子指导外源蛋白转录的phIE真核表达载体,该质粒为外源蛋白的表达提供了更为广泛的选择,通过插入us1编码序列,phIE-Us1被用于分析ICP22蛋白在病毒感染早期的功能;在多克隆位点插入氯霉素乙酰转移酶编码基因构建phIE-CAT检测载体,应用于检测HSVI病毒蛋白Vp16及ICP22的功能,明确显示该质粒对于研究单纯疱疹病毒的基因转录调控具有重要的应用价值。; 寸韡刘龙丁张莹罗杰吴文娟张雪梅廖芸李琦涵; 关键词：单纯疱疹病毒立即早期基因启动子

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罗杰