田芳
- 作品数：9 被引量：41H指数：4
- 供职机构：中南大学湘雅医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金卫生部科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生经济管理更多>>
- STGC3新基因的克隆及功能初步分析被引量：14
- 2004年
- 背景与目的:研究显示,染色体3p21是鼻咽癌高频率杂合性丢失位点,本研究在对3p21区域与鼻咽癌相关的表达序列标签(expressedsequencetag,EST)筛选的基础之上,进行鼻咽癌相关新基因的克隆和功能研究。方法:采用cDNA克隆质粒测序及RACE方法,获取新基因全长cDNA。利用因特网上核酸、蛋白质数据库及蛋白质分析软件进行生物信息学分析。通过构建pEGFP-C2/STGC3绿色荧光表达载体,与脂质体共转染COS7、CNE2细胞,进行基因表达蛋白质定位分析。用Northernblot法检测STGC3在人其他正常组织及肿瘤细胞系表达状况。结果:在3p21区域获得一个全长为1271bp的cDNA新序列,生物信息学分析与已知基因无明显同源性,属于一个新基因,编码146个氨基酸,定位于染色体3p21,被命名为STGC3(GenBank登录号:AY078383)。蛋白质定位分析显示,STGC3融合蛋白存在于细胞浆及细胞核内;MTETMArray2多组织膜Northernblot显示该基因在人正常组织及肿瘤细胞均有表达,并在淋巴瘤等多种肿瘤细胞株中阳性杂交信号弱。结论:STGC3属于一个新基因,其表达的蛋白质存在于细胞浆及细胞核内。在鼻咽癌及多种肿瘤细胞株表达下调。
- 贺修胜肖志强陈主初赵素萍朱建华贺智敏李友军田芳余艳辉
- 关键词：鼻咽癌新基因胞浆肿瘤细胞株生物信息学分析细胞核
- 免疫磁珠分离淋巴细胞在流式交叉配型试验中的应用及研究被引量：2
- 2017年
- 目的探讨免疫磁珠快速分离法及密度梯度离心(Ficoll)分离法分离外周血单个核细胞(PBMC)在流式细胞交叉配型中的应用比较。方法取10例交叉配型供体外周抗凝血各10 ml,受体非抗凝血5 ml,分别采用密度梯度离心与免疫磁珠阴性选择试剂盒从相同体积的抗凝血中分离PBMC。用血细胞计数比较两种方法分离的WBC、PLT、RBC粒度分布和PBMC中淋巴细胞的纯度;用细胞流式和淋巴细胞表面标记荧光抗体检测两种方法分离得到的PBMC中T、B和NK细胞的数量质量;将免疫磁珠阴性分离和密度梯度离心法分离的供者PBMC与受者血清共孵育,加入羊抗人IgG-FITC,洗涤后加入抗人CD3-PE、抗人CD19-APC单克隆抗体,再用流式细胞仪检测细胞表面荧光强度。采用方差分析和t检验进行统计学分析。结果免疫磁珠阴性分离的PBMC数量是Ficoll分离PBMC的0.42倍,但淋巴细胞的比例[(99.2±0.08)﹪]高于PBMC分离的淋巴细胞比例[(82.5±5.27)﹪(t=9.91,P<0.01)],且两种方法分离的PBMC中RBC分别为(0.001±0.001)×10~6/μl和(0.02±0.009)×10~6/μl(t=6.64,P<0.001);血小板的数量分别为(1.00±0.05)×10~3/μl和(196.00±4.21)×10~3/μl差异均有统计学意义(t=146.46,P<0.01)。流式细胞检测免疫磁珠分离的PBMC中CD3^+T细胞为(81.33±4.60)﹪,CD19^+B细胞为(8.41±0.87)﹪,CD3-CD56^+NK细胞为(9.35±0.67)﹪和CD3^+CD56^+NKT细胞为(2.47±0.07)﹪。而Ficoll分离的PBMC中CD3^+T细胞为(37.36±3.27)﹪,CD19^+B细胞为(5.79±0.94)﹪,CD56^+NK细胞为(6.60±0.91)﹪,且差异均有统计学意义(t=24.64、6.470、7.70、51.31,P均<0.01)。T和B淋巴细胞流式交叉配型试验中,设门定量读取T和B淋巴细胞与受者血清中抗体结合情况,密度梯度离心获得的淋巴细胞中混有血小板等,使流式检测结果中会混有假阴性,而免疫磁珠分离法没有出现假阴性结果。证明免疫磁珠分离的PBMC可应用于临床交叉配型试验。结论免疫磁珠阴性选择分�
- 郭靖罗奇志田芳郭旭丽罗伟光邹义洲
- 关键词：单核细胞免疫磁珠分离组织相容性试验
- 外周血T细胞抗原刺激试验(T-SPOT)在结核病检测中的应用被引量：9
- 2017年
- 目的通过分析T细胞抗原刺激试验(T-SPOT)在结核感染临床检测中的特异性和敏感性,探讨T-SPOT法在普通人群、高危人群和疑似人群中结核病筛检的准确性和适应范围。方法研究对象为湖南省湘西自治州人民医院2016年5-9月期间确诊的结核病和非结核病患者。取研究对象外周血并分离出外周血单个核细胞(PBMC),应用T-SPOT法、抗酸杆菌染色、PPD试验、结核抗体检测四种方法对两组病人的感染情况进行检测,对四种方法的敏感性和特异性进行统计学分析。对T-SPOT法在不同人群中检测结核感染中的阳性率进行预测。结果 T-SPOT法检测结核感染的敏感性和特异性分别为93.4%和77.3%。T-SPOT在结核病组的阳性率为93.3%,高于非结核病组的阳性率22.6%(χ~2=152.81,P<0.01)。在结核病组内和非结核病组内不同病症比较,结果提示T-SPOT方法应用于对结核病的辅助诊断具有医学意义。T-SPOT法、抗酸杆菌染色、PPD试验、结核抗体检测的Kappa值分别为0.691、0.183、0.525、0.185,从Kappa值上看,只有T-SPOT法的值大于0.6,说明此诊断方法与真实情况一致性比较高,准确性更好。预测T-SPOT法在普通人群、高危人群和疑似人群中的阳性率分别为23.03%、31.07%和67.75%,但是其中真正有结核感染比率分别为1.87%、34.85%和43.60%。结论 T-SPOT法对结核病的诊断准确性优于抗酸杆菌染色、PPD试验和结核抗体检测三种方法,但T-SPOT法不适用于对普通人群结核病的筛检,仅适合于对高危人群的筛检和对疑似结核病的辅助诊断。
- 易平田芳郭旭丽罗伟光郭靖邹义洲
- 关键词：结核感染敏感性特异性
- 鼻咽癌相关新基因的克隆及其功能研究
- 鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma,NPC)是中国南方常见的恶性肿瘤,类似其它许多肿瘤,鼻咽癌是一种多基因多阶段侵袭性疾病,与多种瘤在因、抑瘤基因的改变相关,但目前其确切的分子机制仍未清晰阐明.高频...
- 田芳
- 关键词：鼻咽癌基因克隆
- 文献传递
- 鼻咽癌FRA3B脆性部位的微卫星不稳定性分析被引量：4
- 2001年
- 目的 探讨鼻咽癌染色体脆性部位FRA3B区域的微卫星不稳定性 (MicrosatelliteInstability ,MSI)。方法 选择FRA3B区域附近的 6个微卫星多态标记对 30例鼻咽癌进行MSI分析。结果 MSI的发生率为6 3.33% (19/ 30 ) ,其中复制错误 (ReplicationErrors ,RER)阳性率为36 .6 7% (11/ 30 )。MSI频率较高的 3个位点为D3S15 47(30 .8% )、D3S1313(34 .6 % )和D3S130 0 (37.5 % )。临床Ⅰ～Ⅱ期患者MSI频率高于Ⅲ～Ⅳ期 (P <0 .0 5 )。结论 揭示FRA3B脆性部位的MSI为鼻咽癌形成过程中的早期分子事件 。
- 邓燕飞田芳卢永德陈主初谢鼎华杨新明袁建辉
- 关键词：鼻咽肿瘤遗传学微卫星不稳定性染色体脆性位点
- 基于行为经济学的房地产企业项目经理激励机制分析
- 作为负责房地产项目开发过程的项目经理，在整个企业组织结构中往往扮演着极为重要的角色，是项目开发成败的关键。目前，我国房地产企业对项目经理普遍采用的物质薪酬体系－年薪制、股票期权等都是基于委托代理理论进行设计的。然而这些模...
- 田芳
- 关键词：委托代理项目经理激励机制行为经济学
- 文献传递
- 密度梯度离心法与免疫磁珠阴性选择法分离人外周血单个核淋巴细胞效果比较被引量：2
- 2016年
- 目的比较密度梯度离心法与免疫磁珠阴性分选的外周血单个核淋巴细胞的纯度及其存活率。方法用Ficoll分离液与免疫磁珠阴性分选试剂盒分离2 ml外周血单个核淋巴细胞,用血细胞计数比较两种方法分离的淋巴细胞的纯度。结果回收率比较:免疫磁珠阴性选择法为(20.92±2.45)%,低于Ficoll离心法的(45.26±21.36)%(P<0.05)。免疫磁珠阴性选择方法获取的单个核淋巴细胞中淋巴细胞比例为(99.1±1.98)%,高于Ficoll离心法的(82.5±22.10)%(P<0.05)。结论免疫磁珠阴性选择分离全血单个核淋巴细胞,用时短,纯度高,是一种较好的方法。
- 李中正田芳郭靖
- 关键词：密度梯度离心免疫磁珠
- 鼻咽癌中染色体3p21区域一个表达下调的EST的鉴定被引量：19
- 2003年
- 背景与目的:研究显示鼻咽癌细胞3p14-25存在高频率杂合性丢失位点。本研究拟寻找与筛选染色体3p21区域与鼻咽癌相关的表达序列标签(expressedsequencetag,EST),为定位候选克隆鼻咽癌相关新基因奠定基础。方法:充分利用网上的生物信息资源,采用定位查找ESTs,对ESTs进行同源性比较分析、筛选;运用逆转录PCR(reversetranscription-PCR,RT-PCR)方法,检测ESTs在鼻咽癌和正常鼻咽组织中的表达;并用Northernblot杂交方法,检测EST在人其他正常组织及肿瘤细胞系的表达状况。结果:在3p21区域筛选到一个在鼻咽癌中表达下调的EST(N31985),在60.00%(3/5)的鼻咽癌细胞株及47.06%(16/34)的鼻咽癌活检组织检测到有EST(N31985)表达下调,与正常鼻咽上皮组织相比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:染色体3p21区域EST(N31985)在鼻咽癌中表达下调,提示其可能参与鼻咽癌癌变过程。
- 贺修胜陈主初田芳肖志强贺智敏关勇军李峰何春梅袁建辉
- 关键词：基因表达RT-PCR鼻咽癌EST
- 鼻咽癌染色体3p14的精细等位基因缺失分析(英文)被引量：1
- 2001年
- 目的 进一步明确鼻咽癌染色体３ｐ１４区域等位基因杂合性丢失（ｌｏｓｓ ｏｆ ｈｅｔｅｒｏｚｙｇｏｓｉｔｙ，ＬＯＨ）的频率与共同缺失区范围，以便分离该区域内与鼻咽癌相关的候选抑瘤基因。方法 选择位于３ｐ１４的６个高密度微卫星多态标记，对３２例鼻咽癌组织进行ＬＯＨ分析。结果 ７１．８８％（２３／３２）的鼻咽癌在至少１个位点发生ＬＯＨ，丢失频率较高的３个位点是Ｄ３Ｓ１３１３（４６．４３％）、Ｄ３Ｓ１３００（５０．０％）和Ｄ３Ｓ１３１２（４４．４４％）。在存在丢失的２３例患者中，８例表现为一个连续的非随机的ＬＯＨ区域，其最小共同缺失区为Ｄ３Ｓ１３１３～Ｄ３Ｓ１３１２（约３．４个厘摩）。且该区域的缺失与鼻咽癌临床分期、ＥＢ病毒感染有明显关系。结论 鼻咽癌在３ｐ１４的最小共同缺失区位于Ｄ３Ｓ１３１３～Ｄ３Ｓ１３１２之间，该区域可能存在一个尚未克隆的与鼻咽癌发生发展密切相关的抑瘤基因。
- 邓燕飞田芳卢永德陈主初袁建辉杨新明谢鼎华邵细芸
- 关键词：鼻咽肿瘤遗传学等位基因杂合子检测
