王正艳 作品数:10 被引量:18 H指数:2 供职机构: 郧阳医学院附属东风医院 更多>> 发文基金: 湖北省自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
阿仑膦酸钠对成骨细胞增殖及矿化的影响 被引量:2 2010年 【目的】探讨阿仑膦酸钠对体外培养大鼠成骨细胞(OB)增殖、分化及矿化的影响。【方法]用混合醇消化法分离培养新生SD大鼠颅骨0B,观察不同浓度阿仑膦酸钠(1×10^-10、1×10^-9、1×10^-8、1×10^-7、1×10^-6mol/L)对成骨细胞增殖与矿化的影响。采用倒置相差显微镜观察0B的形态,用噻唑蓝(MTT)法检测OB增殖情况,茜素红染色法观察0B矿化结节的形成。【结果]1×10^-6、1×10^-7、1×10^-8mol/L的阿仑膦酸钠均能促进成骨细胞的增殖;阿仑膦酸钠浓度为1×10^-8mol/L时成骨细胞ALP活力最强;1×10^-6mol/L对骨基质矿化小鲒有抑制作用,1×10^-8mol/L促进骨基质矿化功能。【结论】适宜浓度的阿仑膦酸钠促进成骨细胞增殖及分化,促进骨基质矿化结节生成。 李锐 王正艳 施永彦 赵宙 张功礼关键词:细胞分裂 PI3K、PKC、MAPK信号转导途径及其在支气管哮喘中的作用 被引量:6 2008年 王正艳 王成国关键词:支气管哮喘 蛋白激酶C 丝裂原活化蛋白激酶 CD4^+CD25^+调节性T细胞对哮喘大鼠气道炎症的影响 被引量:5 2009年 目的观察CD4^+CD25^+调节性T细胞(CD4^+CD25^+Treg)对哮喘大鼠气道炎症的影响。方法将卵白蛋白(OVA)免疫耐受大鼠CD4^+CD25^+Treg细胞过继转移给哮喘大鼠,然后观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞计数及分类,ELISA检测BALF中IL-4、IL-5和IFN-1及血清OVA特异性IgE含量,HE染色观察肺组织的病理改变。结果与哮喘组比较,过继转移CD4^+CD25^+Treg细胞后哮喘大鼠BALF中细胞总数、中性粒细胞和淋巴细胞百分率降低(P〈0.05),嗜酸性粒细胞(Eos)百分率明显降低(P〈0.01);BALF中IL4和IL-5含量明显降低,IFN-1含量明显升高,血清OVA特异性IgE含量明显降低(P〈0.05);气道炎症明显减轻。结论过继转移OVA免疫耐受大鼠CD4^+CD25^+Treg细胞可以明显抑制哮喘的慢性气道炎症。 薛克营 王成国 程立 杨中卫 王正艳 李威 石明 唐友勇关键词:CD4阳性T淋巴细胞 磁激活分选法双重分离大鼠外周血单个核细胞CD4^+CD25^+调节性T细胞 被引量:2 2008年 目的:应用磁激活细胞分选(MASC)技术从卵白蛋白(OVA)免疫耐受大鼠外周血单个核细胞(PBMCs)中分选出大量高纯度CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg),以研究其在支气管哮喘中的作用。方法:从OVA免疫耐受大鼠外周血中分离出PBMCs,应用MASC技术阴性分选CD4+T细胞,再阳性分选出CD4+CD25+Treg;流式细胞仪检测。结果:分选前的CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T细胞数的11.07%,CD4+T细胞占总数的21.88%;CD4阴性分选后,CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T细胞数的10.95%,CD4+T细胞占总数的89.28%;CD25阳性分选后,CD4+T细胞超过总数的95%,而CD4+CD25+Treg细胞占总数的90.92%,CD4+CD25+Treg细胞纯度大于90%。结论:应用MASC技术成功从OVA免疫耐受大鼠的PBMCs中分选出了高纯度的CD4+CD25+Treg细胞。 王成国 薛克营 程立 李威 石明 王正艳关键词:CD4^+CD25^+ 调节性T细胞 外周血单个核细胞 PI3K在细胞外基质分泌细胞因子表达中的作用 被引量:1 2009年 目的探讨纤维连接蛋白(FN)、Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)两种细胞外基质(ECM)成分对被动致敏的人气道平滑肌细胞(HASMCs)免疫功能的影响及磷脂酰肌醇-3激酶(P13K)在此调控中的作用。方法将HASMCs接种于FN、ColⅠ包被的培养板和空白培养板中,用10%哮喘患者血清被动致敏HASMCs,以10%非哮喘者血清为对照,在加入血清前用PBK抑制剂(LY294002)预处理HASMCs 30min。采用RT—PCR法检测HASMCs RANTES(regulated upon activation,normal T cell expressed and secreted)、Eotaxin、TGF—β1 mRNA表达;ELISA法测定HASMCs培养上清中RANTES、Eotaxin、TGF—β1蛋白水平。结果与单纯对照血清组比较,单纯哮喘血清组、对照血清+FN组、对照血清+ColⅠ组HASMCs RANTES、Eotaxin、TGF-β1 mRNA和HASMCs培养上清中蛋白的表达均增高(P〈0.05)。哮喘血清+FN、哮喘血清+ColⅠ处理HASMC后,RANTES、Eotaxin、TGF—β1 mRNA和HASMCs培养上清中蛋白的表达均高于单纯哮喘血清组,且LY294002干预后上述各指标均下降(P〈0.05)。结论细胞外基质对被动致敏的HASMCs免疫功能具有调控作用,PI3K可能参与细胞外基质对被动致敏的HASMCs的免疫功能调控。 刘瑾 施珊娜 许淑云 徐永健 胥杰 陈忠仁 王正艳关键词:细胞外基质 气道平滑肌细胞 磷脂酰肌醇-3激酶 细胞外基质对哮喘大鼠气道平滑肌细胞PI3Kp85表达的影响 2009年 目的:研究细胞外基质(ECM)对哮喘大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)磷脂酰肌醇-3-激酶p85(PI3Kp85)表达的影响。方法:卵白蛋白(OVA)致敏法复制大鼠哮喘模型,将培养后的大鼠叶支气管ASMCs分别种植在涂覆有纤维连接蛋白、Ⅰ型胶原及层粘蛋白的培养瓶中培养,Western blot检测各组ASMCs中PI3Kp85蛋白表达,Real-time PCR检测其mRNA。另取12只正常大鼠做对照。结果:哮喘纤维连接蛋白组、层粘蛋白组、Ⅰ型胶原蛋白组ASMCs中PI3Kp85 mRNA的表达分别是(7.63±0.61)、(9.73±0.68)、(16.22±0.88),均明显高于对照组(5.93±0.75)(P<0.01);蛋白表达情况与mRNA趋势一致。结论:纤维连接蛋白、Ⅰ型胶原及层粘蛋白可以上调哮喘大鼠气道平滑肌细胞中PI3Kp85表达。 王正艳 李锐 王成国 刘瑾 许淑云 薛克营关键词:哮喘 气道平滑肌细胞 细胞外基质 磷脂酰肌醇-3-激酶 CD4^+CD25^+调节性T细胞对哮喘大鼠免疫功能影响 2009年 目的:观察CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)对CD4+CD25-T细胞增殖和Th1/Th2细胞因子分泌的影响,探讨其在哮喘气道炎症中的作用机制。方法:将哮喘大鼠CD4+CD25-T细胞分别与卵白蛋白(OVA)免疫耐受大鼠CD4+CD25+Treg细胞和哮喘大鼠CD4+CD25+Treg细胞联合培养,3H胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法测量细胞增殖情况,ELISA检测细胞IL-4、IL-5和IFN-γ含量。结果:OVA耐受大鼠CD4+CD25+Treg细胞能抑制CD4+CD25-T细胞增殖和Th2细胞因子分泌(P<0.05);哮喘大鼠CD4+CD25+Treg细胞可明显抑制IFN-γ的分泌(P<0.05)。结论:OVA免疫耐受大鼠CD4+CD25+Treg细胞可能通过抑制哮喘大鼠CD4+CD25-T细胞增殖和影响Th1/Th2平衡发挥作用,哮喘大鼠CD4+CD25+Treg细胞存在功能异常,可能与哮喘的发病有关。 薛克营 金卫国 王成国 程立 杨中卫 王正艳关键词:CD4+CD25+调节性T细胞 哮喘 丹参注射液抑制哮喘大鼠肺IL-13和嗜酸性粒细胞趋化因子表达 2008年 目的 探讨丹参注射液抑制哮喘气道变应性炎症的分子机制.方法 30只SD大鼠随机分成正常对照组,哮喘组,丹参组,每组10只.HE染色行肺组织病理学检查,计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数并分类,应用免疫组化SP法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定肺组织中白细胞介素-13(IL-13)和嗜酸性粒细胞趋化因子(Eotaxin)表达.结果病理组织学显示:丹参组较哮喘组肺组织炎性细胞浸润明显减少.丹参组BALF细胞总数及淋巴细胞(Lym)、中性粒细胞(Neu)和嗜酸性粒细胞(Eos)百分率较哮喘组明显减少(P<0.05,P<0.01),与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).哮喘组肺组织IL-13和Eotaxin表达较正常对照组明显增加(P<0.05),丹参组IL-13和Eotaxin表达较哮喘组明显减少(P<0.05).IL-13和Eotaxin表达呈正相关(r=0.90,P<0.01).结论 丹参注射液可减轻哮喘大鼠气道炎症反应,其机制可能与降低哮喘大鼠肺内IL-13和Eotaxin表达有关. 王成国 薛克营 程立 李威 石明 王正艳关键词:哮喘 白细胞介素13 CD4+CD25+Treg在哮喘发病中的作用及丹参对其影响的研究 薛克营 李斌 李秀楼 李丹 周咏明 王成国 蔡立明 杨拥军 杨中卫 王正艳 李威 程立 石明 唐友勇 研究CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)在哮喘发病中的作用,观察丹参是否通过影响CD4+CD25+Treg而对哮喘发挥治疗作用,探讨丹参治疗哮喘的新机制。首先用流式细胞仪检测哮喘患者外周血单个核细...关键词:关键词:丹参治疗 免疫抑制活性 心包囊肿误诊为胸腔积液一例 被引量:2 2010年 王正艳 薛克营 程立 李威 石明 唐友勇关键词:纵隔囊肿 心包 误诊 胸腔积液