王宝明
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
- 供职机构：浙江大学城市学院更多>>
- 发文基金：浙江省医药卫生科学研究基金浙江大学城市学院教师科研基金杭州市科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小檗碱对脂多糖诱导的人脐静脉血管内皮细胞损伤的影响被引量：1
- 2016年
- 目的探讨小檗碱（berberine，BBR）对脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导的人脐静脉血管内皮细胞humanumbilical vein endothelial cells，HUVECs）损伤的影响。方法体外培养人脐静脉血管内皮细胞，不同浓度（1．25、2．5、5．0μmol／L）da檗碱预孵24h后加入5μg／mLLPS再刺激24h，采用EDU染色法检测细胞活性，流式细胞术检测细胞周期变化和细胞凋亡率，Westernblot法检测磷酸化c-Jun氨基末端激酶（p-JNK）蛋白表达水平。结果LPS作用后HUVECs损伤明显，细胞活性明显降低，G2/M期细胞比例减少，凋亡细胞增加，p-JNK的表达增加；经过BBR预处理后，细胞活性恢复，G2/M期细胞比例增加，凋亡细胞减少，p-JNK的表达下降，并呈剂量依赖关系。结论小檗碱可有效地减轻LPS诱导的人脐静脉血管内皮细胞损伤，其机制可能与减少凋亡和降低JNK的磷酸化水平有关。
- 郭君平王丽君王宝明方洁朱锋
- 关键词：小檗碱
- 血管内皮生长因子受体2抗原肽-MHC I类分子单链三聚体DNA疫苗及用途
- 本发明属于生物技术领域，本发明提供了一种新的编码主要组织相容性抗原I类分子（H-2D<Sup>b</Sup>）限制性的血管内皮生长因子受体2抗原肽KDR2、b2微球蛋白（b2m）和H-2D<Sup>b</Sup>的单链三...
- 潘建平张立煌张大勇张翀方洁全胜王宝明
- 文献传递
- TcpC通过促进活性氧的产生诱导巨噬细胞凋亡
- 2013年
- 目的:研究含有Toll/interleukin 1 receptor结构域的蛋白(TcpC)对巨噬细胞凋亡的影响,探讨TcpC诱导巨噬细胞凋亡的分子机制。方法:通过Transwell将分泌TcpC的尿路致病大肠埃希菌CFT073野生株(TcpCwt)和敲除tcpc基因的CFT073突变株(TcpCmut)与小鼠巨噬细胞系J774A隔开共培养,Annexin V/PI双染法观察不同数量和不同处理时间的TcpCwt和TcpCmut对J774A细胞凋亡的影响;活性氧染色观察不同处理时间的TcpCwt和TcpCmut对J774A细胞内活性氧水平的影响,Annexin V/PI双染法观察不同浓度N-乙酰半胱氨酸清除活性氧后TcpCwt和TcpCmut对J774A细胞凋亡的影响,Western blot法检测0.1 mmol N-乙酰半胱氨酸处理前后与TcpCwt和TcpCmut共培养的J774A细胞内caspase-3表达。结果:与对照组和TcpCmut组相比,TcpCwt在细菌数量为5×105和5×106以及处理时间为24 h和36 h时均可显著促进J774A凋亡(均P<0.01)。共培养24 h和36 h的TcpCwt组J774A细胞内活性氧水平显著高于对照组和TcpCmut组(均P<0.01)。0.1 mmol和1 mmol N-乙酰半胱氨酸处理可显著抑制TcpCwt对J774A细胞的促凋亡作用(均P<0.01)。TcpCwt处理可显著降低J774A细胞内总caspase-3表达,而N-乙酰半胱氨酸处理可抑制与TcpCwt共培养的J774A细胞内caspase-3裂解,提高总caspase-3表达水平。结论:TcpC可促进巨噬细胞内活性氧产生,进而介导巨噬细胞凋亡。
- 张大勇林仪茜何非方洁张翀王宝明潘建平
- 关键词：肠致病性大肠杆菌巨噬细胞活性氧细胞凋亡
- TcpC诱导人血管内皮细胞凋亡及其机制
- 2013年
- 目的:研究TcpC对人血管内皮细胞凋亡的影响及其机制,为阐明大肠埃希菌所致败血症的病理生理机制提供新的实验依据。方法:以人脐静脉内皮细胞作为研究对象,将表达TcpC的CFT073野生株(TcpCwt)和敲除tcpc基因的CFT073突变株(TcpCmut)与人脐静脉内皮细胞共培养;Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡;JC-1染色法检测线粒体膜电位变化;Western blotting检测凋亡相关蛋白的表达。结果:TcpCwt与人脐静脉内皮细胞共培养24 h后,人脐静脉内皮细胞数量较少,有脱壁现象,且多数细胞呈碎片状。与TcpCmut相比,TcpCwt能显著诱导人脐静脉内皮细胞发生凋亡(P<0.05)。TcpCwt能显著降低人脐静脉内皮细胞线粒体膜电位,而TcpCmut处理的人脐静脉内皮细胞线粒体膜电位变化与空白对照差异无显著性意义。TcpC能增加多聚ADP核糖聚合酶蛋白裂解,抑制抗凋亡蛋白Mcl-1及XIAP的表达。结论:大肠埃希菌分泌的TcpC能通过线粒体途径引起多聚ADP核糖聚合酶切割,并抑制抑凋亡蛋白Mcl-1和XIAP的表达,诱导血管内皮细胞凋亡。
- 张翀周佳乐方洁张大勇王宝明陈瑞玲潘建平
- 关键词：肠致病性大肠杆菌内皮细胞脐静脉线粒体细胞凋亡
