王卫亮
- 作品数:6 被引量:60H指数:4
- 供职机构:河北联合大学附属医院更多>>
- 发文基金:河北省科技厅科研项目国家自然科学基金河北省高等学校人文社会科学研究项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 蓝氏贾第鞭毛虫α-7.1、α-11贾第素的原核表达及抗原活性鉴定被引量:8
- 2012年
- 目的原核表达蓝氏贾第鞭毛虫的α-7.1、α-11贾第素蛋白。方法经RT-PCR获得α-7.1、α-11贾第素基因片段,经双酶切连入原核表达载体pET-28a(+),构建成为重组表达载体pET-28a(+)-α-7.1及pET-28a(+)-α-11,并转化大肠杆菌Rosetta(DE3)。IPTG诱导后,收集菌体,裂解后进行SDS-PAGE及Western blot检测。结果成功构建了原核表达载体pET-28a(+)-α-7.1和pET-28a(+)-α-11,经IPTG诱导后,在大肠杆菌中高效表达,SDS-PAGE及Western blot分析显示,在相对分子量约43kD和35kD的位置分别出现目的蛋白条带,与理论值相符;通过相应α-7.1、α-11贾第素抗血清的Westernblot证实两种贾第素重组蛋白的抗原活性良好;经Ni-NTA亲和层析柱纯化获得了高纯度的重组的α-7.1、α-11贾第素融合蛋白。结论成功地克隆、表达并纯化了具有良好抗原活性的α-7.1、α-11贾第素蛋白。
- 王洋杨志宏王沂曹蕾余源陈阳王卫亮慈雅丽田喜凤
- 关键词:蓝氏贾第鞭毛虫原核表达
- 神经外科重症监护病房气管切开患者痰培养首次阳性的病原菌分析被引量:1
- 2012年
- 目的了解神经外科重症监护病房气管切开患者下呼吸道感染的病原菌构成及药物敏感性,为临床抗感染药物的应用提供依据。方法选择2010年1月至2011年10月我院神经外科重症监护病房气管切开患者51例,留取痰培养标本,分析痰培养首次阳性的病原菌构成及药物敏感试验结果。结果51例气管切开患者全部发生下呼吸道感染;痰培养首次阳性结果中共培养出致病菌14种,共计感染69例次,主要为革兰阴性茵,占89.9%(62/69),其中前3位为铜绿假单胞菌占27.4%(17/62)、肺炎克雷伯菌占19.4%(12/62)、鲍曼氏不动杆菌占17.7%(11/62);药物敏感试验结果显示各菌对抗感染药物表现出严重耐药及多重耐药。结论我院神经外科重症监护病房气管切开患者下呼吸道感染的病原菌主要为革兰阴性菌,病原菌耐药率较高。
- 王卫亮李建民成杰田喜凤
- 关键词:气管切开重症监护病房革兰阴性菌感染革兰阳性菌感染
- 蓝氏贾第鞭毛虫α-4贾第素的原核表达及纯化被引量:10
- 2011年
- 目的原核表达并纯化蓝氏贾第鞭毛虫的α-4贾第素蛋白。方法经RT-PCR获得α-4贾第素基因片段,经双酶切连入原核表达载体pET-28a(+),构建成为重组表达载体pET-28a(+)-α-4,并转化大肠杆菌Rosetta(DE3)。IPTG诱导后,收集菌体,裂解后进行SDS-PAGE及Western blot检测,并用Ni-NTA亲和层析柱纯化融合蛋白。结果成功构建了原核表达载体pET-28a(+)-α-4,经IPTG诱导后,在大肠杆菌中高效表达,目的蛋白以包涵体形式存在;SDS-PAGE及Western blot分析显示,在相对分子量约34 kD的位置出现目的蛋白条带,与理论值相符;经Ni-NTA亲和层析柱纯化获得了高纯度的重组的α-4贾第素融合蛋白。结论成功克隆、表达并纯化了α-4贾第素蛋白,为α-4贾第素的细胞定位及功能研究提供了必要条件。
- 王洋余源王卫亮陈阳慈雅丽田喜凤郑佳杨志宏
- 关键词:蓝氏贾第鞭毛虫原核表达
- 高血压脑出血患者气管切开术后痰培养阳性的病原菌分析被引量:1
- 2013年
- 目的了解神经外科重症监护病房高血压脑出血患者气管切开后肺感染的病原菌构成及其药物敏感性,为临床抗生素的应用提供依据。方法 2010年1月—2012年2月,我院神经外科重症监护病房的68例高血压脑出血气管切开患者,留取痰培养标本,分析痰培养阳性的病原菌构成及药物敏感试验。结果 68例气管切开患者全部发生下呼吸道感染;痰培养阳性结果中共培养出致病菌17种170株,主要为革兰阴性菌(84.1%),其中占前三位的为铜绿假单胞菌(26.5%),肺炎克雷伯菌(亚种)(18.8%),鲍曼不动杆菌(15.3%);药物敏感试验结果显示各菌对抗生素表现出严重耐药及多重耐药。结论我院神经外科重症监护病房高血压脑出血气管切开患者肺感染的病原菌主要为革兰阴性菌,病原菌耐药率较高。
- 刘刚王卫亮
- 关键词:高血压脑出血气管切开痰培养病原菌药敏试验
- 改良的亲情护理与传统亲情护理对脑卒中偏瘫患者焦虑、抑郁状况疗效的比较被引量:36
- 2015年
- 脑卒中(stroke)又被称为急性脑血管病事件,是由于急性脑循环障碍所致局部或全面性功能缺失综合征,具有高发病率、高病死率、高致残率,已成为威胁人类健康的主要疾病。偏瘫作为一种功能障碍,常可导致患者心理失衡。研究报道,20%-50%的卒中患者可能发生抑郁(post-stroke depression,PSD),出现持续的情感失落和兴趣减退,甚至出现自杀。
- 朱亚芹成杰隋丽丽王卫亮于颖张静
- 关键词:脑卒中偏瘫抑郁状况急性脑血管病脑循环障碍
- 双氢青蒿素对蓝氏贾第鞭毛虫滋养体蛋白质的损伤被引量:8
- 2010年
- 目的探讨双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对体外培养的蓝氏贾第鞭毛虫(Giardialamblia)滋养体蛋白质的损伤作用。方法用改良TYI-S-33培养基培养蓝氏贾第鞭毛虫滋养体;设立实验组(DHA组)和正常对照组(C组)。实验组用含双氢青蒿素的培养基(含LC50=200μg/mL的DHA)培养;对照组培养基不含药物。提取各组虫体总蛋白,经Brad-ford法进行蛋白质定量,样本经2D-电泳和硝酸银染色后,扫描检测凝胶电泳图蛋白点的数量和种类,获取蛋白质点匹配信息,挑选匹配性高的蛋白点,进行质谱(MALDI-TOF MS)分析。结果经双氢青蒿素作用后虫体总蛋白质含量(0.6993μg/mL)明显低于对照组(4.8241μg/mL),二者差异有显著性(P<0.001)。蛋白质二维电泳凝胶图分析结果显示,正常对照组(C组)蛋白点密集,约1253个点,布满整块凝胶,蛋白表达量高(蛋白点颜色深且清晰、明亮);与此相反,实验组(DHA组)蛋白点显著减少,DHA作用6h后约617个点,作用12h后约326个点,蛋白表达量明显降低(蛋白点颜色浅,不清晰)。其次,正常对照组与双氢青蒿素组的12kDa^30kDa、等电点pI3.0~7.6范围内蛋白点表达量存在明显差异,即实验组该范围内大多数蛋白点完全消失,45kD^60kDa的蛋白点仅剩6个点。质谱分析鉴定结果显示,在正常对照组胶图所选的80个匹配良好的蛋白点中,鉴定出6种骨架蛋白(14个点),而实验组(DHA组)蛋白胶图中相对应的蛋白点消失。结论双氢青蒿素对蓝氏贾第鞭毛虫滋养体的蛋白质具有明显的损伤作用,其中包括细胞骨架蛋白。
- 余源陈阳王卫亮杨志宏田玉娜王玥田喜凤卢思奇赵永强
- 关键词:蓝氏贾第鞭毛虫双向电泳质谱骨架蛋白