王全凯
- 作品数：260 被引量：903H指数：14
- 供职机构：中国疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 梅花鹿IFN-β1基因的克隆与分子进化分析被引量：3
- 2014年
- 根据GenBank中牛干扰素-β1（IFN-β1）基因序列（E00137）,设计并合成了1对引物,以梅花鹿肝脏组织DNA为模板,采用PCR技术扩增梅花鹿IFN-β1全基因,并克隆、测序。结果表明：梅花鹿IFN-β1基因全长561 bp,编码186个氨基酸,含有6个与二硫键形成有关的半胱氨酸,3个糖基化位点,成熟蛋白含有4个α螺旋,3个β折叠区,7个β转角。序列比较分析发现,梅花鹿IFN-β1基因序列与GenBank发表的23种IFN-β1基因核苷酸序列同源性为3.2%~91.1%,氨基酸序列同源性为21.9%~79.7%。梅花鹿与其他23种动物的IFN-β1基因序列分析和系统进化树分析表明,IFN-β1基因存在种属特异性。梅花鹿INF-β1基因的成功克隆,为进一步研究梅花鹿INF-β1基因表达、生物学活性和应用奠定了基础。
- 苏凤艳李哲刘存发宗颖曾范利王全凯
- 关键词：梅花鹿分子进化
- 检测犬瘟热病毒抗体的重组N蛋白-ELISA方法的建立及应用被引量：4
- 2008年
- 将已构建成功的重组质粒pET-N转化入Rosetta2(DE3)菌株中,在IPTG诱导下获得重组N蛋白。用镍离子亲和层析方法对表达产物进行纯化,对纯化效果及纯化产物的特异性进行SDS-PAGE电泳及Western blot检测。以纯化的重组N蛋白作为包被抗原,对各种反应条件进行了优化,建立了检测CDV抗体的间接ELISA方法。用此方法检测了270份血清样品,并与法国Synbiotics公司ELISA试剂盒检测结果相比较,符合率达92.4%。为应用血清学方法对犬科动物进行犬瘟热流行病学的调查奠定了基础。
- 简中友贾赟王全凯徐立秋胡传伟李叶李振荣
- 关键词：重组质粒重组N蛋白间接ELISA
- 蓝舌病及其检测方法研究进展
- 2014年
- 本文从引起蓝舌病的病毒病原学、流行病学、发病机制及免疫防制、病理变化、诊断、预防措施等方面,对蓝舌病进行全面综述,重点总结了此病的诊断方法,为更深入研究此病奠定基础。
- 王贞钧孙颖杰贾赟张小飞王全凯刘钊张雪栾慎顺
- 关键词：蓝舌病毒病原学流行病学防御措施
- 鹿血多肽的制备工艺及抗氧化能力研究被引量：10
- 2014年
- 以新鲜鹿血为原料,利用胰蛋白酶水解制备鹿血多肽,以水解度为指标,在单因素和正交实验的基础上,确定酶解的最佳工艺条件,即加酶量为6%,pH为9,反应温度为37℃,反应时间为4h,水解度为46.72%±0.11%。并进一步对鹿血多肽进行抗氧化能力测定,在高浓度时多肽的羟自由基清除能力和DPPH自由基清除能力较高。
- 胡太超陶荣珊李庆杰张晶苏凤艳王艳梅王全凯
- 关键词：酶解正交实验抗氧化能力
- 散养与圈养梅花鹿茸各部位化学成分差异的研究
- 为了解散养与圈养梅花鹿茸各部位化学成分的差异,对散养与圈养梅花鹿茸不同部位的16种氨基酸及15种无机元素含量进行测定研究。结果表明:圈养梅花鹿茸各部位必须氨基酸含量和游离氨基酸总量及无机元素总含量均高于散养梅花鹿茸。但对...
- 薄士儒王全凯
- 关键词：散养圈养
- 文献传递
- GMA诱导的16HBE恶性转化细胞相关差异LncRNA筛选及其研究
- 目的：筛选GMA 诱导的16HBE 恶性转化细胞(第30 代)相关差异表达LncRNA及其相关mRNA,探讨差异表达的LncRNA 在GMA 诱导的16HBE 恶性转化细胞中的表达水平及意义.方法：收获经8 μg/mL ...
- 王全凯谢广云刘红梅许建宁
- 关键词：甲基丙烯酸环氧丙酯16HBE细胞PCA3PRUNE
- 蜜蜂残翼病毒中国DWV-JL1株衣壳蛋白基因序列分析
- 2015年
- 蜜蜂残翼病毒是引起蜜蜂残翼病的病原体。吉林出入境检验检疫局检验检疫技术中心将成功分离鉴定得到的中国首株蜜蜂残翼病毒毒株命名为“中国DWV—JL1株”，全长9826nt。本文主要研究中国DWV—JL1株核苷酸序列位置为2880～3792nt之间的片段，该段序列为编码衣壳蛋白的一部分，为相对保守序列。通过RT—PCR、克隆及质粒双酶切鉴定分析，得到一段大小约900bp的片段。通过BLAST、进化树及残基化分析，有96％-97％的同源性。氨基酸序列差异性仅为7％。该段序列与韩国株的亲缘关系最近，而与欧洲和美洲各国家获得的毒株序列亲缘关系较远，推测中国DWV—JL1株起源于亚洲。
- 张健杨倩宋战昀郑言王向辉隋佳辰王全凯王振国牟峻
- 关键词：RT-PCR进化树衣壳蛋白
- 修复基因XRCC1、XPD和XRCC3多态性与苯致DNA损伤修复能力关系的研究被引量：4
- 2007年
- 目的探讨XRCC1、XPD、XRCC3基因多态性与苯致DNA损伤修复能力的关系。方法以确诊并已脱离苯作业的80名慢性苯中毒患者作为病例组,以同期接苯的62名苯作业工人为对照组,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析技术,检测XRCC1 C26304T(Arg194Trp)、G27466A(Arg280His)、G28152A(Arg399Gln)、G36189A(Gln632Gln)和XPD C22541A(Arg156Arg)、C23591T(Asp312Asn)、A35931C(Lys751Gln)以及XRCC3 C18067T(Thr241Met)位点的多态性,采用细胞阻滞微核试验和碱性彗星试验分别从细胞水平和分子水平检测DNA修复能力。结果携带XPD35931 AC+CC变异基因型的个体、携带XPCC318067C/T变异基因型的个体均比携带相应野生基因型个体的苯致DNA损伤修复能力强。
- 许建宁杨敏黄慧隆王全凯王雅文李桂兰
- 关键词：苯中毒DNA修复能力
- 水貂株犬瘟热病毒融合蛋白基因的克隆与序列分析被引量：3
- 2008年
- 以犬瘟热病毒水貂分离株RNA为模板,经RT-PCR反应,扩增出融合蛋白基因的1053bp DNA片段,通过T-A克隆技术,成功构建克隆载体PMD-18T/F。序列分析表明:分离株与01-2689株、2544-Han95株、A75-17株、DOGDK91C株、00-2601株、ONP株、PDV-2株核苷酸序列同源性分别为94.3%、93.5%、94.4%、93.6%9、5.3%、97.3%和94.5%;氨基酸序列同源性分别为97.2%、96.6%、97.4%、97.4%、97.4%、97.2%和98.0%。抗原指数分析表明分离株与疫苗ONP株、强毒A75-17株在40-50位氨基酸间存在明显差异。
- 苏凤艳宗春苗王卓聪丁庆东王全凯
- 关键词：水貂犬瘟热病毒融合蛋白基因克隆
- 梅花鹿干扰素-β1在MDBK细胞中表达及抗牛病毒性腹泻病毒活性检测被引量：1
- 2016年
- 为真核表达梅花鹿干扰素β1(IFN-β1)并检测其抗牛病毒性腹泻病毒(BVDV)活性,本研究以梅花鹿肝脏基因组为模板,通过PCR扩增出IFN-β1的编码区序列,克隆于真核表达载体pVAX1中,构建重组真核表达质粒pVAX1-IFNβ1,并转染MDBK细胞进行表达。结果显示,将pVAX1-IFNβ1转染MDBK细胞后经western blot和间接免疫荧光法检测和鉴定证实,转染的重组质粒能够在MDBK细胞中正确表达目的蛋白,表达的重组蛋白约为25 ku。此外,采用细胞病变抑制法检测表明转染后重组细胞表达的IFN-β1具有抗BVDV活性。本研究为梅花鹿IFN-β1蛋白抗病毒分子机制的研究及抗病毒药物的开发奠定了基础。
- 刘千辉李哲苏凤艳曾范利王全凯
- 关键词：梅花鹿真核表达
