王伟洁
- 作品数:15 被引量:10H指数:1
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- 相关领域:轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 一种发酵培养基及用该培养基发酵生产胸苷磷酸化酶的方法
- 本发明提供一种发酵培养基,包含:NaCl(5~10g/L),葡萄糖(20~30g/L),酵母膏(10~20g/L),蛋白胨(10~20g/L),胸苷(10~20mmol/L),以及双蒸水。基于上述发酵培养基的发酵方法,步...
- 李红梅王伟洁陈宝珍薛芳
- 基因组重排选育胸苷磷酸化酶高产菌株被引量:1
- 2013年
- 以短乳杆菌为研究对象,通过基因组重排技术选育胸苷磷酸化酶高产菌株。首先采用紫外复合诱变筛选出EA_(42)、EB_(27)作为基因组重排育种的亲本并制备成原生质体,分别采用紫外照射50 min和60℃水浴加热60 min双亲灭活原生质体,然后用质量分数40%PEG 6000,30℃恒温诱导融合10 min进行基因组重排。经过3轮基因组重排育种,成功选育出3株胸苷磷酸化酶高产菌株,其中菌株F3-36在菌体发酵量提高的前提下,进行5次传代测试其胸苷磷酸化酶活均在2.500U/mg湿茵体,比原始茵株酶活提高了260%。
- 李红梅王伟洁薛芳陈宝珍
- 关键词:基因组重排原生质体短乳杆菌胸苷磷酸化酶
- 产胸苷磷酸化酶短乳杆菌融合菌株的构建及其特性
- 2013年
- 利用紫外加热灭活双亲原生质体技术对短乳杆菌原生质体进行融合,考察短乳杆菌原生质体制备、再生及融合的影响因素,并对短乳杆菌融合子产酶能力和遗传稳定性进行了研究。结果表明:短乳杆菌在含0.6%甘氨酸发酵培养液培养至对数生长期,2 mg/mL溶菌酶于37℃恒温水浴酶解脱壁2 h,原生质体制备率和再生率可达95%和48%;20 W紫外灯距离20 cm照射50 min,60℃处理短乳杆菌原生质体60 min,原生质体的灭活率几乎为100%;将双亲灭活的原生质体用40%PEG6000,30℃恒温融合10 min,筛选融合子F15并进行5次传代测试其胸苷磷酸化酶活均在1.500 U/mg湿菌体,较亲本酶活提高了50%。
- 王伟洁李红梅薛芳高露娇黄艳青
- 关键词:胸苷磷酸化酶短乳杆菌原生质体融合子
- 一种1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶突变体及其基因与用途
- 本发明公开了一种1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶突变体及其基因与用途,本发明的1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶突变体,具有催化3-羟基丙醛生成1,3-丙二醇的活性,为含有Q202H突变的1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶。所得到...
- 李红梅王伟洁邓龙华
- 文献传递
- 一种食物含水量检测装置
- 本实用新型提供的一种食物含水量检测装置,包括:盛放部,用于盛放食物,含有中空桶和圆形底板,圆形底板上设有复数个滤孔;挤压部,用于挤压食物,含有升降机构,n型压杆和圆形压板,圆形压板向下对食物进行挤压;感应滤网,用于感应食...
- 姚远董庆利石服鑫张成楠王慧卿王伟洁朱玉兵尹凤雪
- 文献传递
- 产胸苷磷酸化酶菌株初筛方法的建立及其应用被引量:1
- 2014年
- 建立了一种快速简便地筛选高产胸苷磷酸化酶菌株的初筛方法及其在紫外诱变育种中的应用。结果显示,在液体培养基中,添加25mmol/L胸苷不会影响菌体生长且菌体中的胸苷磷酸化酶能催化胸苷生成胸腺嘧啶,在同等浓度下产物胸腺嘧啶OD290nm远大于胸苷OD290nm,从而导致发酵液OD290nm显著升高,据此建立产胸苷磷酸化酶短乳杆菌的初筛方法。在此基础上结合紫外诱变条件的优化,确定初次紫外照射时间为20 s,停止5 min后再照射10 s、15 s、20 s,控制紫外致死率在80%左右,以此条件构建突变文库。通过初筛和复筛确定突变株EB27、EA42酶活分别达到1.025 U/mg湿菌体和0.916 U/mg湿菌体,较初始菌株提高了50%和35%,且具有良好的遗传稳定性。
- 陈宝珍李红梅王伟洁陈群毅
- 关键词:短乳杆菌紫外诱变胸苷磷酸化酶
- 加热搅拌装置
- 本实用新型涉及的加热搅拌装置,用于在溶质溶解于溶剂过程中进行加热和搅拌操作,其特征在于,包括:电加热器,用于加热由所述溶质和所述溶剂组成的混合物;搅拌组件,用于使所述溶质和所述溶剂均匀混合;以及支架,用于为所述搅拌组件提...
- 王伟洁李红梅王慧卿侯堃
- 文献传递
- 一种发酵培养基及用该培养基发酵生产尿苷磷酸化酶的方法
- 本发明提供的一种发酵培养基,包含:NaCl (3~12g/L),葡萄糖(10~25g/L),酵母膏(5~15g/L),蛋白胨(2~15g/L),K<Sub>2</Sub>HPO<Sub>4</Sub>.3H<Sub>2<...
- 李红梅陈宝珍王伟洁侯堃周思远刘阳
- 文献传递
- 自溶超声波耦合法提取啤酒废酵母中β-1,3-D-葡聚糖被引量:7
- 2014年
- 采用自溶-超声波耦合法提取啤酒废酵母中β-1,3-D-葡聚糖。首先以自溶率为考察指标,将单因素和正交实验相结合,结果显示,pH=5.0条件下,质量分数5%NaCl和体积分数1.5%乙酸乙酯混合添加可以最大限度地促进酵母细胞的自溶,从而促进酵母细胞质壁分离。进而,采用超声波法从自溶后收集的细胞壁沉淀中提取β-1,3-D-葡聚糖,以质量分数2%NaOH作超声溶剂,利用Box-Behnken设计考察了超声功率、超声时间和超声次数对葡聚糖提取率的影响,确定最佳提取条件为:超声功率550 W,超声时间33 min,超声次数2次,在该条件下葡聚糖提取率达到50.5%,与纯超声波提取葡聚糖法相比提取率提高了2倍。
- 李红梅王伟洁侯堃黄艳青高露姣
- 关键词:啤酒废酵母生物工程
- 固定化酵母细胞生物合成胞苷三磷酸工艺的优化被引量:1
- 2012年
- 以胞苷一磷酸(CMP)为底物,采用响应面分析法对固定化酵母细胞发酵制备胞苷三磷酸(CTP)的影响因素进行优化,采用HPLC法对CTP定量。结果表明:在CTP生物合成中磷酸根离子和Mg2+浓度存在一个临界浓度低于临界浓度二者将限制CTP产率;在本实验范围内固定化酵母发酵制备CTP的最佳工艺为:20mL底物样液添加20g固定化酵母,CMP浓度100mmol/L、葡萄糖浓度100mmol/L、磷酸盐浓度250mmol/L、Mg2+浓度15mmol/L、pH6.1、反应时间2h,在此条件下CTP的产率可达67.89%。
- 李红梅马伟王伟洁
- 关键词:固定化酵母生物转化响应面分析法