王严
- 作品数：5 被引量：15H指数：3
- 供职机构：大连理工大学环境与生命学院生物科学与工程系更多>>
- 发文基金：辽宁省科技厅科技攻关项目转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 产植酸酶菌株的筛选及其植酸酶基因的克隆被引量：3
- 2007年
- 从土壤中筛选到产植酸酶活性较高的烟曲霉菌株WY-2,其植酸酶最适pH为5.5,最适温度为55℃。通过对烟曲霉WY-2植酸酶基因进行PCR扩增,获得了一个1.5kb大小的特异性产物,将其克隆到载体pMD18-T中。测序结果分析表明,该基因片段含有植酸酶基因完整的阅读框架(ORF),基因全长1459bp,其中包含一个61bp的内含子,编码465个氨基酸,有7个潜在的糖基化位点,5′端有一编码26个氨基酸的信号肽序列。该基因与已报道的烟曲霉ATCC34625植酸酶基因有91%同源性,编码的氨基酸序列同源性为91%。
- 王严高晓蓉苏乔王静云安利佳
- 关键词：烟曲霉植酸酶基因克隆
- 一种新的耐热性植酸酶基因在烟草中的表达被引量：6
- 2007年
- [目的]探究一种新的耐热性植酸酶基因在烟草中的表达结果。[方法]克隆了泡盛曲霉植酸酶基因编码区全序列,使其在烟草中高效表达,对重组植酸酶与天然植酸酶性质进行初步的分析和比较。[结果]对烟草叶片的植酸酶活性检测结果表明,重组植酸酶基因在烟草中得到较高水平表达,转基因植株的最高植酸酶活力为对照烟草的13倍;对烟草重组植酸酶蛋白的酶学性质进行了初步分析,结果表明重组植酸酶拥有与天然植酸酶同样的最适pH值和最适温度,耐热性略微下降,但在80℃处理15 min后仍有33%的残余酶活力。[结论]该研究为该植酸酶基因转化饲料作物的开发提供理论依据,也为泡盛曲霉植酸酶的工业化生产开辟了新的途径。
- 高晓蓉王国坤王严夏秀英安利佳
- 关键词：泡盛曲霉植酸酶耐热性转基因烟草
- 曲霉植酸酶基因的克隆及其表达研究
- 植酸酶作为一种单胃动物饲料添加剂，其饲喂效果已经在世界范围内得到确认。但目前植酸酶在饲料中的推广应用还相当有限，究其原因主要有二：一是天然材料中植酸酶含量太低导致植酸酶生产成本过高;二是当前商业植酸酶的热稳定性难以完全满...
- 王严
- 关键词：植酸酶基因克隆表达饲料添加剂
- 文献传递
- 黑曲霉WY-6植酸酶的表达、纯化及性质研究被引量：3
- 2007年
- 目的:表达黑曲霉WY-6植酸酶基因及研究重组酶的性质。方法:通过PCR方法从黑曲霉WY-6基因组中扩增出植酸酶基因,并将该基因表达在毕赤酵母中,再利用蛋白质分离纯化技术对重组酶进行纯化,并测定其性质。结果:黑曲霉WY-6植酸酶基因成功表达在毕赤酵母中,重组植酸酶经饱和硫酸铵分级沉淀、超滤和阴离子交换层析步骤后得以纯化,纯化后的植酸酶比活力为147U/mg,分子量为67kDa,两个最适pH分别为3.0和5.5,最适温度为55℃,与胃蛋白酶以0.01的比率(胃蛋白酶/植酸酶,wt/wt)混合作用2h后仍保留70.9%残余活力。结论:获得了具有商业应用潜能的基因工程植酸酶。
- 王严高晓蓉苏乔王静云安利佳
- 关键词：黑曲霉植酸酶基因毕赤酵母
- 烟曲霉WY-1植酸酶基因的克隆及其在烟草中的表达被引量：3
- 2007年
- 以自行筛选的烟曲霉WY-1为出发菌株,通过PCR方法克隆其植酸酶基因,并构建了含有植物信号肽序列的植酸酶基因植物表达载体,利用农杆菌介导的叶盘法对烟草叶片进行了遗传转化。结果表明,PCR鉴定和Southern杂交分析说明植酸酶基因已整合到烟草的基因组中;RT-PCR检测结果证实了植酸酶基因已得到转录表达;酶活性分析表明功能性的植酸酶已成功表达在烟草中,这是烟曲霉植酸酶基因在烟草中的首次表达。
- 王严高晓蓉苏乔夏秀英安利佳
- 关键词：烟曲霉植酸酶基因烟草
